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上海鹿森生物工程有限公司
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瓊脂糖凝膠電泳原理及操作流程2020/09/09
原理:瓊脂糖凝膠電泳的分析原理與其他支持物電泳主要區(qū)別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相比于蛋白質太大,對大多數(shù)蛋白質來說其分子篩效應微不足道,現(xiàn)廣泛應用于核酸的研究中。蛋白質和核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據(jù)這個原理可將其分開。電泳緩沖液的p
蔗糖的性質和作用2020/09/01
蔗糖的性質是雙糖,晶體白色,具有旋光性,用途是食品中重要的添加劑,用作冷凍點的改良劑、結晶改良劑和膨松劑。物理性質:蔗糖極易溶于水,其溶解度隨溫度的升高而增大,溶于水后不導電。蔗糖還易溶于苯胺、氮苯、乙酸乙酯、乙酸戊酯、熔化的酚、液態(tài)氨、酒精與水的混合物及丙酮與水的混合物,但不能溶于汽油、石油、*、三氯甲烷、四氯化碳、二硫化碳和松節(jié)油等有機溶劑。蔗糖屬結晶性物質。純蔗糖晶體的比重為1.5879,蔗糖溶液的比重依濃度和溫度的不同而異。蔗糖的比旋度為+66.3°至+67.0°。化學性質:蔗糖及蔗糖溶
化學試劑保存八原則2020/08/25
物質的保存方法,與物質的物理、化學性質有關。實驗室在保存化學試劑時,一般遵循一下8條原則。1.密封:多數(shù)試劑都要密封存放,突出的有以下3類:①易揮發(fā)的試劑,如濃鹽酸、濃硝酸、濃溴水等;②易與水蒸氣、二氧化碳作用的試劑,如無水氯化鈣、苛性鈉、水玻璃等;③易被氧化的試劑(或還原性試劑),如亞硫酸鈉、氫硫酸、硫酸亞鐵等。2.避光:見光或受熱易分解的試劑,要避免光照,置陰涼處,如硝酸、硝酸銀等,一般應盛放在棕色試劑瓶中。3.防蝕:對有腐蝕作用的試劑,要注意防蝕;強氧化劑、有機溶劑不可用帶橡膠塞的試劑瓶存
CCK-8試劑盒的特點好處2020/08/21
介紹:CCK-8試劑中含有WST–8:化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪*(1-MethoxyPMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數(shù)量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒
做ELISA實驗,這些技巧少不了!2020/08/17
介紹:ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。特點:1.高效、靈敏、特異的抗體。2.穩(wěn)定的重復性和可靠性。3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。4.適
聯(lián)碩生物:無水碳酸鈉的介紹與運用2020/08/11
一、介紹:無水碳酸鈉化學式Na2CO3,又叫做碳酸鈉、純堿,俗稱蘇打。白色粉末,無氣味。有堿味。有吸濕性。露置空氣中逐漸吸收1mol/L水分(約15%)。400℃時開始失去二氧化碳。遇酸分解并泡騰。溶于水(室溫時3.5份,35℃時2.2份)和甘油,不溶于醇。水溶液呈強堿性,pH11.6。二、應用:無水碳酸鈉是重要的化工基本原料,主要用途有:①生產(chǎn)各種玻璃。在玻璃原料中作為玻璃調整劑或熔劑,使石英砂(玻璃形成體)中Si-O鍵斷裂而易熔,并降低粘度,增大膨脹系數(shù)。②化工原料。例如與石英砂反應制硅酸鈉
試劑盒的儲存方法2020/08/07
試劑盒的儲存在ELISA實驗中也是至關重要的:今天我司為大家介紹如何儲存ELISA試劑盒。ELISA試劑盒收到后立即儲存于2-8℃下:效期見試劑盒標簽;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。運用前:一切試劑平衡至室溫:不同批次的試劑不能交流運用。1.停止液:1瓶:12ml:0.5M硫酸:儲存于2-8℃至有效期。2.胎球蛋白A示蹤抗體:1瓶:0.6ml:濃縮:HRP符號的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質中;此試劑運用前需用示蹤劑抗體稀釋液進行稀釋;儲存于2-8℃至有效期。3.包被板:96孔:
ELISA 試劑盒分為內(nèi)源性物質和外源性物質兩種2020/07/28
血清是常用的標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致,ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質和外源性物質兩種:1.內(nèi)源性物質普遍認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響檢測結果。常見的干擾物質有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應物質和其它物質等。(1)類風濕因子人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結合,從而導致假陽性
NC膜的選擇、注意事項及應用技巧2020/07/23
酸纖維素膜(nitrocellulosefiltermembrane,簡稱NC膜),是蛋白印跡廣泛使用的轉移介質,對蛋白有很強的結合能力,而且適用于各種顯色方法,包括同位素,化學發(fā)光(Luminol類)、常規(guī)顯色、染色和熒光顯色;背景低,信噪比高。在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應的發(fā)生處。NC膜是生物學試驗中重要的耗材之一。硝酸纖維素NC膜的使用很簡便,比如不需要甲醛預處理,只要在去離子水面浸潤排出膜內(nèi)氣泡,再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了;硝酸纖維素NC膜很容易封閉,也不
BI胎牛血清的保存注意事項及優(yōu)勢2020/07/22
胎牛血清(南美血源)的保存應該注意以下幾點:(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量,補體參與反應有
關于血清的主要成分2020/07/15
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。一、血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作
聯(lián)碩生物教您如何用酶標記抗體法染色2020/07/10
很多實驗新手剛剛做酶聯(lián)免疫試驗,都會有很多不了解的方面,聯(lián)碩生物將是您身邊的實驗好幫手。今天,小編在這里要和大家分享下如何運用酶標記抗體法染色。酶標記抗體法的實驗原理總體來說和熒光素標記抗體法的原理類似,分為直接法和間接法,其原理基本相同,但敏感性不同。一、直接法直接法是將酶(如HRP)標記在特異性抗體(*抗體)上,然后用酶標記抗體直接與相應原特異性結合,形成抗原—抗體—HRP復合物,然后用酶底物DAB-H202顯色。該法的優(yōu)點是簡單、步驟少,省時、特異性高、非特異性染色輕:缺點是敏感性差,因為
細胞培育的關鍵2020/07/07
一、萬物的成長離不開水,細胞也是相同的,若要它成長,有必要要用新鮮的雙蒸水,不含任何雜質和有離子等成分。二、PBS(也可用BBS、如:HanksD-Hanks液裝備)-此產(chǎn)品主要用于免疫組化染色時安排或細胞的漂洗。Sciencell的DPBS(SicenCellNo.0303)是一種無毒、無滲合物的緩沖液,它不包括Ca2+,Mg2和酚紅而且經(jīng)過0.2μm過濾消毒,可用于沖刷細胞而不會造成損害。三、胰蛋白酶的效果是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的安排或許細胞對胰酶的效果反響不相同,胰酶渙
MSC無血清培養(yǎng)基與血清培養(yǎng)基有何區(qū)別?2020/07/03
在描述產(chǎn)品區(qū)別之前,先簡單描述下第3代間充質干細胞無血清培養(yǎng)基。第3代間充質干細胞無血清培養(yǎng)基是怎么開發(fā)出來的?研發(fā)人員根據(jù)近幾十年來,中國及國外的科研人員在間充質干細胞研究方面取得的一些成果,比如什么樣的物質可以很好的促進干細胞生長,什么樣的物質可以抑制間充質干細胞的分化,什么樣的物質有更好的貼壁效果等等。在此基礎之上,開發(fā)出一個初步的間充質干細胞無血清培養(yǎng)基配方。然后,構建相應數(shù)學模型,結合大量的實驗,確定各種組分組合的比例。后,通過應用于不同來源的人體組織(臍帶或脂肪),提取及培養(yǎng)間充質干
細胞收到后要怎樣處理?2020/06/30
收到細胞株包裹時,請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng),或立即冷凍保存(置于–70°C,隔夜后,移到liqN2)。冷凍細胞解凍程序:1.根據(jù)細胞說明書來配置培養(yǎng)基,不同的細胞株適應的培養(yǎng)基不同,請務必按細胞需求來配置。絕大多數(shù)的細胞均無法立即適應不同的基礎培養(yǎng)基或不同的血清種類,所以當細胞換成你們自己的培養(yǎng)基生長狀態(tài)變差或者速度變緩的時候,不要著急,可以靜養(yǎng)一段時間。給細胞一個適應的時間,不要一日看三回,操之過急;如實驗確實緊張,可以使用中喬新舟細胞株*培養(yǎng)基,
關于抗原抗體的生物活性2020/06/28
抗原抗體的主要功能從而有效地鏟除侵入機體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物,中和它們所開釋的毒素或鏟除某些自身抗原,使機體堅持正常平衡,但有時也會對機體形成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的發(fā)生,對人體可形成危害。(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子差異,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外發(fā)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助
酶免疫試驗的優(yōu)點及局限性2020/06/16
酶免疫試驗之所以能成為臨床免疫檢驗中的主導技術,是與它的方法上的特異性和靈敏性、操作上的簡便性以及試劑的穩(wěn)定性分不開的,還有很重要的一點是,其對環(huán)境沒有污染威脅。盡管如此,作為一項免疫檢驗技術,酶免疫試驗還是有其局限性的,不但所檢測的生物學體液樣本如血清中有可能存在各種干擾實驗的因素,而且在實驗過程中,影響結果的因素也很多,尤其是進行手工的ELISA測定時。此外,在定性ELISA測定中,陽性判定值(CUT-OFF)的建立,是在一定的統(tǒng)計學基礎上的,相對于某個具體的受檢者來說,其有可能并不具備正確
關于細胞樣的保存2020/06/12
一、操作步驟:1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上,用培育基培育,時間通過預試驗確定;2、細胞長好后,用洗刷液洗2分鐘×3次,室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min,蒸餾水洗刷;3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞,(干燥后-20℃冰凍保存2周以上)4、雜交前將固定的細胞進行如下處理;順次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脫水每次5min,用二甲苯洗刷,除掉殘留脂質順次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,進行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;5、在37℃用胃蛋
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別在哪里?2020/06/09
胎牛血清與新生牛血清的三大區(qū)別1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們在未發(fā)育*的胎牛的心臟進行穿刺取血,完成采血的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集自已經(jīng)出生一段時間的小牛,而且它們的發(fā)育相對于胎牛而言更加*。2、組份與比例不同雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別,可是諸如促細胞生長因子和促貼附因子等組份并不相同,而且兩者之間的激素還有其他活性物質的比例也不同。另外,胎
關于細胞培養(yǎng)牛血清種類2020/06/01
一、組份與比例不同胎牛與小牛血清組份與比例不同,兩者所含的促細胞成長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同,用處與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才干成長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。二、血清的成份這幾種血清的成份,總體沒有什么顯著不同,只是有一些成分與其生存環(huán)境有關,如抗體很等少。此外,因成長發(fā)育的需求,有些成分在小牛出世后會發(fā)作一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的不同。有一點能夠必定,胎牛血清中的部分功用蛋白與
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