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免疫熒光染色原理及步驟2021/06/28

免疫熒光又稱免疫熒光抗體。免疫熒光實驗原理是將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少，相對使用標記抗體用量偏大。利用抗原抗體反應進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。下面詳細介紹免疫熒光染色步驟：1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間(參考：30min)。3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，

PBS緩沖液的作用和保存方法2021/06/25

PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphatebuffersaline)的簡稱，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。（注意：PBS不是磷酸緩沖液(phosphatebuffersolution，PB)）PBS緩沖液的作用：不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原

移液器的分類，用途以及維護保養(yǎng)2021/06/22

移液器又稱移液槍，其外文名稱為pipette，是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具。在進行分析測試方面的研究時，一般采用移液器移取少量或微量的液體。移液器的分類：1.根據(jù)工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器；2.根據(jù)能夠同時安裝吸頭的數(shù)量可將其分為單通道移液器和多通道移液器；3.根據(jù)刻度是否可調(diào)節(jié)可將其分為固定移液器和可調(diào)節(jié)式移液器；4.根據(jù)調(diào)節(jié)刻度方式可將其分為手動式移液器和電動式移液器；5.根據(jù)特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續(xù)注射移液器等。移液器的用途：用于臨床

細胞爬片的特點，操作注意事項及其保存方式2021/06/21

在醫(yī)學生物研究中，免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。細胞爬片是什么？其名為爬片，外文名稱為RoundCoverslip，用于各類細胞培養(yǎng)板中，讓細胞在爬片上生長，后續(xù)實驗可直接使用，避免了細胞從培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到載玻片上的損傷。細胞爬片采用玻璃片，經(jīng)滅菌，TC等處理后制作而成，可促進細胞在玻片上貼壁生長與形態(tài)伸展，在后期免疫組化、免疫熒光、原位雜交等處理過中也不易脫片。細胞爬片特點以及規(guī)格：-無污染，免清洗，節(jié)省實驗員的時間。-γ射線滅菌，無熱源、無DNA酶、無RNA酶。-化學穩(wěn)定性好，耐受實驗室常用溶劑

ELISA實驗操作要點：降低ELISA背景的四點tips2021/06/16

在ELISA試劑盒操作中，我們都認為ELISA實驗的原理似乎很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封閉。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果做得不太好，也有可能毀了整個實驗。在實驗結(jié)束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會影響您對結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景，下面有一些tips。一、洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可

如何把細胞鋪均勻？2021/06/09

做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是最常見的一個實驗了。但是有很多人不是很得要領(lǐng)，鋪得不是均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。一般96孔板每孔是加100微升細胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入。加完半邊板后，將未加的細胞懸液混一下，再繼續(xù)加剩余的半邊板子。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣。注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，

重組抗體的產(chǎn)生及有哪些優(yōu)勢？2021/06/07

1890年馮˙貝林（vonBehring）發(fā)現(xiàn)了抗白喉毒素血清，發(fā)明了人工被動免疫，并提出了抗原和抗體的概念，在后續(xù)漫長的抗體研究中，人類相繼發(fā)展出三代抗體制備技術(shù)：①第一代抗體：以抗原免疫高等脊椎動物制備的多克隆抗體；②第二代抗體：由雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的只針對某一種特定抗原決定簇的單克隆抗體；③第三代抗體：應用分子克隆技術(shù)、基因突變技術(shù)改造某種抗體的基因編碼序列，生產(chǎn)出的性能更*的抗體，也稱為基因工程抗體或重組抗體。單抗的出現(xiàn)及其顯著的*性（特異性高、蛋白類天然產(chǎn)物等特性）使其在疾病的研究、診斷和

ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種2021/06/04

血清是常用的標本，血漿一般可視為與血清同等的標本，標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：1．內(nèi)源性物質(zhì)普遍認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig（s）抗體、交叉反應物質(zhì)和其它物質(zhì)等。（1）類風濕因子人血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導致假陽性

菌種保存的幾種常用方法2021/06/02

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個因素而設(shè)計的。保藏方法大致可分為以下幾種：1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅

二甲基亞砜的基本用途有哪些？2021/05/31

二甲基亞砜（DMSO）是一種含硫有機化合物，分子式為C2H6OS，常溫下為無色無臭的透明液體，是一種吸濕性的可燃液體。具有高極性、高沸點、熱穩(wěn)定性好、非質(zhì)子、與水混溶的特性，能溶于乙醇、丙醇、苯和l仿等大多數(shù)有機物，被譽為“萬/能溶劑”。在酸存在時加熱會產(chǎn)生少量甲基硫醇、甲醛、二甲基硫、甲磺酸等化合物。在高溫下有分解現(xiàn)象，遇氯能發(fā)生劇烈反應,在空氣中燃燒發(fā)出淡藍色火焰。可作有機溶劑、反應介質(zhì)和有機合成中間體。也可用作合成纖維的染色溶劑、去染劑、染色載體以及回收乙q、二氧化l的吸收劑。一、基本用途

淺談酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試驗辦法2021/05/28

酶聯(lián)免疫測定是將抗原抗體反響的高度特異性和酶的催化作用相結(jié)合，開展建立一種非放射性符號免疫分析辦法。因為ELISA具有靈敏度高、特異性強，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作辦法簡潔快速、無放射性污染以及應用范圍廣等很多優(yōu)點，在醫(yī)學根底理論研究，病毒學和生物化學查驗等工作中應用十分廣泛。該法需將純化的抗原包被在固相載體，與必定稀釋度的待側(cè)血清反響，然后與酶符號的第二抗體（抗人IgG,IgA,IgM或抗人IgG.A.M的混合物）反響，酶可催化色原反響，在酶標測定儀必定波長下進行比色，測定吸光度。ELIS

什么是抗體？抗體的主要功能是什么？2021/05/24

定義：抗體（antibody）是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)。它（免疫球蛋白不僅僅只是抗體）是一種由漿細胞（效應B細胞）分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細胞的細胞膜表面?？贵w能識別特定外來物的一個*特征，該外來目標被稱為抗原。抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白?？贵w按其反應形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補體結(jié)合抗體等。按抗體產(chǎn)生的來源分為正?？贵w(天然抗體)，如

微孔濾膜的種類、用途及原理2021/05/21

微孔濾膜的種類和用途1、尺寸常用的針式過濾器有4mm、13mm、25mm、33mm規(guī)格，針頭式濾器規(guī)格的選擇通常是與樣品的體積有關(guān)：通常樣品量小于1mL時，選用4mm直徑的針頭式濾器；樣品量在1-10mL時，選用13mm直徑的針頭式濾器；樣品量在10-100mL時，選用25mm直徑的針頭式濾器；樣品量在10-200mL時，選用33mm直徑的針頭式濾器。尺寸4mm13mm25mm33mm過濾體積(cm2)0.10.653.94.6殘留體積(ml)≤11-1010-10010-200最高操作壓力(p

移液吸頭、移液器正確清洗、移液槍安裝和使用2021/05/19

1、移取揮發(fā)性樣品要注意兩點：a.在移液前務必潤洗兩次；b.在吸液完成后要盡快排液。2、移取高粘度樣品采用反向移液的模式：在吸液時把吸/排液按鈕按到第二檔(第二停止點)，而在排液時把按鈕按到第一檔(第一停止點)。另外，在吸液和排液時均需要3-5秒的停留時間。3、移取高密度/低密度樣品移液器的精度數(shù)值都是基于轉(zhuǎn)移純水，如果樣品的密度與水的密度相差很大，那么精度也會相應的差很多。因此，在移液前需要先搞清楚樣品的密度，然后把量程調(diào)節(jié)成待轉(zhuǎn)移樣品體積與密度的乘積。舉例而言，如果一個樣品的密度是1.2g/

離心管的特點及規(guī)格2021/03/29

產(chǎn)品貨號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品規(guī)格LS-MCT-060-C0.6ml離心管.滅菌.無DNA.無RNA.無酶1000只/袋LS-MCT-200-S2.0ml離心管.滅菌.無DNA.無RNA.無酶500只/盒LS-MCT-500-S5.0ml離心管.滅菌.無DNA.無RNA.無酶300只/盒LS-MCT-700-S7.0ml離心管.滅菌.無DNA.無RNA.無酶200只/盒LS-MCT-1000-S10ml離心管.連蓋.袋裝.滅菌.無DNA.無RNA.無酶100只/盒LS-MCT-1500-S-T15ml離心

PCR系列：八聯(lián)排管、單管、96孔板、384孔板2021/03/26

規(guī)格：PCR單管和八聯(lián)排產(chǎn)品貨號產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格LS-PCR-01-C-P0.1mlPCR管，透明，平蓋1000支/盒,10盒/箱LS-PCR-02-C-P0.2mlPCR管，透明，平蓋1000支/盒,10盒/箱LS-PCR-05-C0.5mlPCR管，透明，平蓋1000支/盒,10盒/箱LS-PCR-0208-C0.2mlPCR八聯(lián)排管,透明.平蓋(套裝)125條/盒,10盒/箱LS-PCR-0208-CP-C0.2mlPCR八聯(lián)排管,透明.凸蓋(套裝)125條/盒,10盒/箱LS-PCR-0

聯(lián)碩生物：八聯(lián)排管介紹篇2021/03/24

哈嘍，本期帶給大家介紹實驗室常用耗材之一【八聯(lián)排管】PCR管系列產(chǎn)品均采用高品質(zhì)高分子材料聚丙烯（PP）制成，適用于各種PCR和熒光定量PCR實驗。厚度均一的超薄管壁設(shè)計更便于熱量的傳遞以及溫度的精/準控制，以便/佳地將熱量傳導到反應溶液。標準管型設(shè)計可以很好的匹配主流PCR儀，如APPLIEDBIOSYSTEMS,EPPENDORF,BIORAD等。LANSO八聯(lián)排管整體透明，適用于熒光定量PCR等檢測。八聯(lián)排管管蓋與管相配套，具有出色的密封性。有凸蓋和平蓋兩種選擇，其中平蓋適合于實時PCR。

抗體和重組蛋白的使用及保存方法，有哪些？2021/03/16

無論是保存還是運輸，請避免反復凍融。反復凍融，冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu)，導致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構(gòu)象改變，從而降低抗體的結(jié)合能力，也加快了抗體球蛋白和重組蛋白的降解速度。抗體和重組蛋白保存得當與否，直接決定了抗體和重組蛋白的活性使用效果，如果保存得當，抗體和重組蛋白活性大部分都可以維持數(shù)年。1.收到抗體和重組蛋白后的操作收到抗體和重組蛋白后（大部分抗體和重組蛋白是溶液態(tài)），請務必在4℃，12000rpm，離心3分鐘，再打開管蓋進行分裝、溶解和保存（如果抗體和重組蛋白體積小于50

如何制作細菌培養(yǎng)皿2021/03/12

本期給大家?guī)砑毦囵B(yǎng)皿的實驗步驟~~一、配制培養(yǎng)基·打開無菌培養(yǎng)皿的塑料包裝，取出培養(yǎng)皿。打開皿蓋，小心地將準備好的較熱瓊脂溶液倒入培養(yǎng)皿中?！さ谷肴芤旱牧恐恍韪采w皿底，能形成一層培養(yǎng)基即可?！ぱ杆偕w上皿蓋，以防空氣中的細菌污染培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基冷卻30分鐘到2小時，直到瓊脂溶液冷卻并硬化成果凍狀制作好的培養(yǎng)基可以在冷藏環(huán)境中存放數(shù)月。二、細菌接種接種細菌的方式有很多，可以通過直接接觸接種或收集樣品接種等方式來完成?！ぶ苯咏佑|接種：使用含有細菌的物體直接與培養(yǎng)基接觸，將細菌傳遞到培養(yǎng)基上，普遍的

移液槍無污染移液才有意義，特殊樣品的移液技巧匯總2021/02/03

1移取揮發(fā)性樣品要注意兩點：a.在移液前務必潤洗兩次；b.在吸液完成后要盡快排液。2移取高粘度樣品采用反向移液的模式：在吸液時把吸/排液按鈕按到第二檔(第二停止點)，而在排液時把按鈕按到一檔。另外，在吸液和排液時均需要3-5秒的停留時間。3移取高密度/低密度樣品移液器的精度數(shù)值都是基于轉(zhuǎn)移純水，如果樣品的密度與水的密度相差很大，那么精度也會相應的差很多。因此，在移液前需要先搞清楚樣品的密度，然后把量程調(diào)節(jié)成待轉(zhuǎn)移樣品體積與密度的乘積。舉例而言，如果一個樣品的密度是1.2g/cm3，您需要轉(zhuǎn)移30