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上海鹿森生物工程有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第7年
超低吸附產(chǎn)品的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)有哪些?2025/02/25
超低吸附系列產(chǎn)品與傳統(tǒng)培養(yǎng)表面有什么不同?該怎么選?細(xì)胞培養(yǎng)中,除了選擇合適的培養(yǎng)試劑搭配優(yōu)化后的培養(yǎng)條件,還需要謹(jǐn)慎選擇合適的培養(yǎng)器皿,對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有至關(guān)重要的影響。1)用于貼壁細(xì)胞的TC處理培養(yǎng)表面TC處理表示該器皿經(jīng)過表面的改性處理,適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。如LANSO的細(xì)胞培養(yǎng)耗材都經(jīng)過TC處理,能夠優(yōu)化貼壁效果,提高培養(yǎng)效率。2)用于懸浮細(xì)胞的未經(jīng)處理培養(yǎng)表面高質(zhì)量,透光良好的聚苯乙/烯表面疏水,是懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的理想選擇,也適用于各種生化檢驗(yàn)。使用這種表面,細(xì)胞可以在懸浮
細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟分析以及注意事項(xiàng)2025/02/11
細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)的過程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)??寺 <?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或j少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用
細(xì)胞染色的方式2025/02/06
細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段,然而,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來說,想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見的問題。細(xì)胞染色是生物學(xué)研究中常用的技術(shù),它涉及到使用特定的染料或熒光探針來觀察和分
PCR產(chǎn)品如何選擇2025/01/21
PCR單管:在樣品量少時(shí)使用,可根據(jù)樣本數(shù)量靈活使用。管身和管蓋相連,易與微量離心管搞混,但不可混用。PCR管管壁較薄,有利于保證PCR擴(kuò)增中熱傳導(dǎo)的速度和均勻,但也因此無法承受較大的離心力;微量離心管管壁比較厚,滿足離心要求,但也導(dǎo)致了傳熱慢、不均勻。PCR八連管:在樣本量增大時(shí)可選擇八連管。一般有透明和白色雙色可選擇,分別適用于普通PCR和qPCR。PCR板:PCR板在批量處理樣本時(shí)使用,適用性廣,看使用不同自動(dòng)化應(yīng)用。板孔邊有數(shù)字、字母編碼,便于標(biāo)記和識(shí)別。有透明、彩色透明和白色款,彩色和
什么是弗氏佐劑2025/01/15
弗氏佐劑(FreundsAdjuvant)在20世紀(jì)40年代由JulesFreund發(fā)明,通常被認(rèn)為是目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中免疫佐劑,常用于動(dòng)物免疫制備抗體。弗氏佐劑可以使抗原持續(xù)緩釋,同時(shí)又能非特異性地增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的特異性免疫應(yīng)答,增強(qiáng)相應(yīng)抗原的免疫原性或改變免疫反應(yīng)類型。弗氏佐劑(FCA/CFA),本質(zhì)是一種含非代謝油(如礦物油),表面活性劑(如阿拉塞),或含滅活細(xì)菌(如結(jié)核分枝桿菌)的混合物,通過等體積混合水溶性抗原溶液形成油包水的乳劑,抗原乳劑不僅提高體內(nèi)抗原的分布范圍從而增強(qiáng)與相關(guān)細(xì)胞的相互
細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)2025/01/02
一:細(xì)胞培養(yǎng)熒光顯微鏡對(duì)于直接用培養(yǎng)皿拍攝都沒有什么壓力,不過依然更建議做爬片,不僅效果更好而且更適合拍共聚焦,不想拍了也可以冷凍保存。爬片的預(yù)處理需要用多聚賴氨酸增加細(xì)胞粘附性1,用多聚賴氨酸涂在爬片上放置30-120分鐘。2,然后用滅菌的超純水清洗和浸泡,。3,自然干燥了之后放在紫外下照射至少1個(gè)小時(shí)以上。爬片之前經(jīng)過高溫滅菌的可以不需要這么久。4,如果用普通蓋玻片而不是專用細(xì)胞爬片的話,一般還需要用0.1%Tween-20的PBS洗一下,因?yàn)楦鶕?jù)我的經(jīng)驗(yàn),幾個(gè)牌子的普通蓋玻片都比較臟,不能
新品推薦 | 國(guó)產(chǎn)超濾管正式上線!2024/12/12
貨號(hào)名稱外管容量?jī)?nèi)管容量型號(hào)膜材質(zhì)包裝規(guī)格LS-U9005超濾管15ml5kd50ml15ml5kdPES超濾膜12個(gè)/盒LS-U9010超濾管15ml10kd50ml15ml10kdPES超濾膜12個(gè)/盒LS-U9030超濾管15ml30kd50ml15ml30kdPES超濾膜12個(gè)/盒LS-U9050超濾管15ml50kd50ml15ml50kdPES超濾膜12個(gè)/盒LS-U9100超濾管15ml100kd50ml15ml100kdPES超濾膜12個(gè)/盒LS-U8005超濾管4ml5kd15
移液槍的選購技巧2024/12/03
1.產(chǎn)品性能,即移液器的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。對(duì)于絕大多數(shù)用戶而言,購買之前檢測(cè)產(chǎn)品性能既有難度又無必要。因此,主要還是依據(jù)制造廠商提供的技術(shù)數(shù)據(jù)。但還是不要輕易相信賣家的口頭承諾,一定要查閱制造商提供的書面材料。2.產(chǎn)品的可靠耐用這一方面,主要取決于移液器所用的材料。對(duì)于外殼,應(yīng)當(dāng)有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱性(如PVDF材質(zhì));對(duì)于活塞,市場(chǎng)上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質(zhì)。不銹鋼機(jī)械性能好、壽命長(zhǎng),只是不太適合用于強(qiáng)酸強(qiáng)堿的移液;陶瓷則有很高的耐腐蝕性,但機(jī)械性能較差。當(dāng)然,優(yōu)質(zhì)的材
濾膜的種類濾膜的用途濾膜的原理2024/11/26
膜分離過程是利用薄膜分離混合物的一種方法。薄膜作為兩相之間的選擇通過性相,可使兩相的某一種或多種組分透過膜,截留其他組分,從而實(shí)現(xiàn)不同組分之間的分離,達(dá)到分離、濃縮和純化的目的,它主要利用流體壓力差為推動(dòng)力的篩分分離過程。微孔過濾、反滲透、納濾、超濾均屬于壓力驅(qū)動(dòng)型膜分離技術(shù)。微孔分離過程是在流體壓力差的作用下,利用膜對(duì)被分離組分的尺寸選擇性,將膜孔能截留的微粒及大分子溶質(zhì)截留,而使??撞荒芙亓舻牧W踊蛐》肿尤苜|(zhì)透過膜。微孔濾膜操作有死端過濾(垂直流過濾)和錯(cuò)流過濾(切線流過濾)。死端過濾主要用
移液槍的使用訣竅2024/11/19
移液槍是實(shí)驗(yàn)操作上的工具,對(duì)于頂尖高手而言,重要的就是實(shí)驗(yàn)的誤差最小,重復(fù)再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用。1.影響移液槍精度因素(1)溫度:室溫低時(shí),手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時(shí)往往發(fā)生誤差(2)氣密性:tip和槍體的結(jié)合部,以及槍內(nèi)柱體之間的長(zhǎng)期磨損,造成誤差(3)吸速:容易造成tip內(nèi)氣泡產(chǎn)生,而且會(huì)污染槍頭(4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時(shí),蒸汽進(jìn)入槍頭,內(nèi)壓增高,結(jié)果在壓出液體時(shí),壓力變大,而產(chǎn)生誤差。解決辦法:反復(fù)抽吸4-5次就可改善。2.具體使用方法更換tip法:(1)
細(xì)胞復(fù)蘇的主要步驟及注意事項(xiàng)2024/11/05
一、主要步驟:①將冷凍管從液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,細(xì)胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時(shí)間延長(zhǎng)會(huì)提高細(xì)胞死亡率,復(fù)蘇過程中一般細(xì)胞死亡率在20%~25%之間。②迅速用酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒,然后放置在冰浴上。③小心開啟瓶蓋,把細(xì)胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱,36℃~38℃培養(yǎng)1h,讓細(xì)胞貼壁。④細(xì)胞貼壁后,小心移棄培養(yǎng)基,主要是去掉DMSO(懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細(xì)胞及其碎片,加5mL新鮮培養(yǎng)基,36℃~3
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的特征有哪些2024/10/22
定義:最初,人們只是運(yùn)用脂質(zhì)體模擬生物膜,研究膜的構(gòu)造及功能,從而發(fā)現(xiàn)了膜的融合及內(nèi)吞作用,因而可用作外源物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的載體。特性:陽離子脂質(zhì)體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過靜電作用將DNA分子包裹入內(nèi),形成DNA一脂復(fù)合體,也能被表面帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜吸附,再通過膜的融合或細(xì)胞的內(nèi)吞作用,偶爾也通過直接滲透作用,DNA傳遞進(jìn)入細(xì)胞,形成包涵體或進(jìn)入溶酶體其中一小部分DNA能從包涵體內(nèi)釋放,并進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,再進(jìn)一步進(jìn)入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。已有眾多的文獻(xiàn)報(bào)道,脂質(zhì)體本身會(huì)參與細(xì)胞生理活動(dòng),引起基因表
透析袋的用處有多大?2024/10/10
透析袋是用半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。新透析袋可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜,截留分子量MWCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量)。截留分子量越大也就是說透過性
緩沖液的原理2024/09/29
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí),H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí),溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時(shí),緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc
重組蛋白可分為哪幾種2024/09/24
重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng):原核蛋白表達(dá),哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá),酵母蛋白表達(dá)及昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運(yùn)用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng),提高表達(dá)成功率。按功能分,可分為以下幾種:1.白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。由于最初是由白細(xì)胞產(chǎn)生且又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用,所以得名,現(xiàn)仍沿用此名。2.干擾素(interferon,IFN
細(xì)胞爬片的準(zhǔn)備及操作方法2024/09/12
胞爬片就是讓玻片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi),細(xì)胞在玻片上生長(zhǎng)。主要用于組織學(xué),免疫組織,冰凍切片,細(xì)胞涂片,原位雜交等。細(xì)胞爬片的準(zhǔn)備1.蓋玻片的選擇:爬片可用一般的蓋玻片,也可用專用細(xì)胞爬片(價(jià)格比較昂貴)但是細(xì)胞貼壁牢固,拍出照片效果好;2.爬片的剪裁:可根據(jù)自己的需要,到染色時(shí)再將之切開,這樣既保證了細(xì)胞均一性,又可同時(shí)做幾個(gè)指標(biāo)的染色剪裁成合適大小,置于6孔板、12孔板或24孔板;3.爬片的使用前處理:將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時(shí),
如何用PBS清洗細(xì)胞?2024/09/09
一:取材撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮2~3mm2置于載玻片上,用吸管加6mmoI的PBS緩沖液兩滴,使材料充分浸入到液體中,處理約5分鐘。(撕取的材料大小適中,且為內(nèi)表皮)二:去垢處理用吸水紙吸凈浸泡材料的PBS緩沖液,加2~3滴37°C預(yù)溫的去垢劑1%TritonX-100,使液體充分浸泡材料,并立即放入37C水浴鍋中處理15分鐘。(吸水紙不要直接在材料上面吸,以免帶丟材料,去垢處理過程中不要讓材料干燥)三:沖洗吸去1%Triton,用6mmol的PBS緩沖液輕輕沖洗,反復(fù)兩至三次。四:固定用吸水紙吸盡
細(xì)胞培育所需求的基本條件有哪幾個(gè)?2024/08/27
1.溫度細(xì)胞溫度過低時(shí)細(xì)胞成長(zhǎng)緩慢甚至不成長(zhǎng)。利用冷凍保藏細(xì)胞可保持細(xì)胞的原有割裂分解能力。溫度過高導(dǎo)致細(xì)胞。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需求的適溫度決定的。大都生物大分子遇到高溫后簡(jiǎn)單導(dǎo)致空間結(jié)構(gòu)改動(dòng)或者喪失(變性)。細(xì)胞膜遇到高溫后簡(jiǎn)單變化。2.pH過酸或過堿可導(dǎo)致細(xì)胞。這主要與蛋白質(zhì)的變性和細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)受損有關(guān)。3.透壓細(xì)胞內(nèi)外可溶于水的物質(zhì)份額和品種決定細(xì)胞的脹大與收縮程度,因?yàn)榧?xì)胞膜是半透膜,只允許對(duì)自己有利的物質(zhì)經(jīng)過。4.細(xì)胞養(yǎng)物養(yǎng)分物和水一同,又名細(xì)胞培育液,培育液中含有細(xì)胞增殖和成長(zhǎng)所
siRNA轉(zhuǎn)染操作及要點(diǎn)2024/08/20
siRNA(小干擾RNA)是一種新型的基因治療工具,是由21-25個(gè)核苷酸組成的雙鏈短RNA分子,能夠特異性地誘導(dǎo)靶基因的沉默,進(jìn)而抑制蛋白的表達(dá)。siRNA最初由AndrewFire和CraigMelo在1998年提出,之后在2001年被證明可以特異性地抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的靶基因表達(dá)。siRNA的抑制作用是通過其與AGO蛋白組裝成的RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)發(fā)揮的。一條鏈被降解,另一條鏈則與靶基因的mRNA互補(bǔ)配對(duì),使其被切割降解,從而達(dá)到治療相關(guān)疾病的目的。與傳統(tǒng)的基因治療相比,siR
移液槍的原理是什么?2024/08/13
移液器其實(shí)就是一個(gè)加了彈簧和活塞位置調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)的針筒。至于你問為什么那么精確,其實(shí)微量注射器(微量進(jìn)樣器)也很準(zhǔn),只不過不能像移液器一樣標(biāo)準(zhǔn)化使用操作。移液器確保反復(fù)使用的要素,主要和密封性有關(guān)。任何廠牌的移液器,最后其實(shí)都是首先拼密封性,其次是調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)的準(zhǔn)確性。密封良好的移液器,只要調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)經(jīng)過校準(zhǔn)并且可以穩(wěn)定保持精度,就不必?fù)?dān)心有問題。移液器的密封性主要有幾個(gè)因素:1)活塞的品質(zhì)活塞的材質(zhì)很重要,要經(jīng)得起長(zhǎng)期與套筒相互摩擦2)套筒的品質(zhì)不能容易彎曲變形或熱脹冷縮3)O型彈性密封圈這個(gè)是耗材,一
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