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塑料離心管的特點(diǎn)2023/07/31: 實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的，一般塑料的用的較多，因?yàn)椴ＡУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管有PP（聚丙烯）、PC(聚碳酸酯)，PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來說比較好。塑料離心管為透明或者半透明，可以直觀的看到樣品離心情況。接下來就介紹一下各種材質(zhì)塑料離心管的特點(diǎn)：PP（聚丙烯）：半透明，化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好，但是在低溫下會(huì)變脆，所以在離心時(shí)不要在4℃以下。PC(聚碳酸酯)：透明度較好，硬度大，可以高溫消毒，但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類。主要用于5萬

ACK紅細(xì)胞裂解液的作用原理2023/07/28: 紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。紅細(xì)胞裂解液的作用原理：細(xì)胞裂解液一般都使用含酶的，在血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原，當(dāng)裂解液中可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的

牛血清白蛋白（BSA）的應(yīng)用2023/07/27: 牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一種球蛋白，包含607個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點(diǎn)為4.7。應(yīng)用：牛血清白蛋白（BSA）在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性減輕不利環(huán)境因素，如加熱、表面張力及化學(xué)因素引起的變性。測定蛋白濃度按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白標(biāo)準(zhǔn)）+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、

二甲基亞砜的基本用途2023/07/26: 二甲基亞砜（DMSO）是一種含硫有機(jī)化合物，分子式為C2H6OS，常溫下為無色無臭的透明液體，是一種吸濕性的可燃液體。氯化鉻，氯化/*等過渡金屬鹵化物與氯化/*，氯化鈉等鹵化物在DMSO中有一定溶解度，故可以應(yīng)用在有機(jī)電化學(xué)中。二甲基亞砜廣泛用作溶劑和反應(yīng)試劑，特別是丙烯腈聚合反應(yīng)中作加工溶劑和抽絲溶劑，作聚氨酯合成及抽絲溶劑，作聚酰胺，聚酰亞胺和聚砜樹脂的合成溶劑，以及芳烴、丁二烯抽提溶劑和合成氯氟苯胺的溶劑等。同時(shí)也可以用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶

冰凍切片的制作步驟以及每個(gè)步驟的要求和作用？2023/07/24: 冰凍切片是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進(jìn)行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便，而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。制備步驟:將組織在恒溫冷凍機(jī)里面切片。冷凍腔內(nèi)的溫度一般設(shè)置為-18℃至-25℃，根據(jù)不同組織調(diào)節(jié)不同腔溫，平時(shí)應(yīng)將冷凍頭放置在冷凍臺(tái)上。冷凍切片機(jī)應(yīng)長期處在冷凍恒溫狀態(tài)。1、當(dāng)冰凍組織提取好之后，在冷凍頭上放少量的OCT或羧田基纖維素(可用普通膠水代替)，放上組織，速凍。2、待組織凍結(jié)后，將冷凍頭裝刀切片機(jī)上。3、粗切，修出切面細(xì)切幾張，用毛筆刷去刀上組織片

如何挑選凍存管2023/07/21: 材質(zhì)一般凍存管都是由無細(xì)胞毒性的材料制備的，實(shí)驗(yàn)室常用的材質(zhì)有塑料和玻璃。但因?yàn)椴ＡР馁|(zhì)的凍存管不能用在高速或者超速離心機(jī)上，所以塑料材質(zhì)的凍存管用的比較多。聚丙烯的化學(xué)和溫度穩(wěn)定性非常好，液氮的氣體狀態(tài)環(huán)境下，可耐低溫至零下187℃。除此之外，如果對(duì)樣品安全性要求比較高，可以選擇非致突變原料和無熱原的VID兼容管。并且注意使用前不要打開，如果已經(jīng)打開，那使用前一定一定要滅菌！構(gòu)成凍存管一般都由管帽、管體構(gòu)成，分為內(nèi)旋蓋和外旋蓋凍存管。如果樣本要液氮?dú)庀嘀斜４妫陀脙?nèi)旋凍存管，帶硅膠墊的；如果樣

擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶，原因是什么？2023/07/20: 1)引物用量偏大，引物的特異性不高。應(yīng)調(diào)換引物或降低引物的使用量。2)循環(huán)的次數(shù)過多。適當(dāng)增加模板的量，減少循環(huán)次數(shù)。3)酶的用量偏高或酶的質(zhì)量不好。應(yīng)降低酶量或調(diào)換另一來源的酶。4)退火溫度偏低，退火及延伸時(shí)間偏長。應(yīng)提高退火溫度，減少變性與延伸時(shí)間，也可采用二種溫度的PCR擴(kuò)增。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。5)樣品處理不當(dāng)。6)Mg2+濃度偏高。因適當(dāng)調(diào)整Mg2+使用濃度。7)若為PCR試劑盒。也可能時(shí)試劑盒本身質(zhì)量有問題。8)復(fù)制提前終止。使用非熱啟動(dòng)的聚合酶時(shí)常有發(fā)生。冰

你真的了解胎牛血清嗎？2023/07/18: 胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。胎牛血清的功能：胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)

PCR實(shí)驗(yàn)原理2023/07/14: 原理：PCR利用DNA聚合酶的催化作用，在高溫下依次完成DNA的變性、引物結(jié)合和DNA合成等反應(yīng)，從而使DNA序列得到擴(kuò)增。PCR的核心是引物，其能夠與目標(biāo)DNA序列的特定區(qū)域互補(bǔ)配對(duì)，使得DNA聚合酶能夠選擇性地合成引物兩側(cè)的DNA分子，從而擴(kuò)增出目標(biāo)DNA序列。操作過程：1.DNA模板的制備：將目標(biāo)DNA提取出來，使其成為PCR反應(yīng)的模板。2.引物的設(shè)計(jì)：根據(jù)目標(biāo)DNA的序列設(shè)計(jì)引物，以便在PCR反應(yīng)中能夠引導(dǎo)DNA擴(kuò)增。3.PCR管中的混合溶液制備：將模板DNA、引物和PCR反應(yīng)所需的其他

酶活性測定常見方法2023/07/12: （1）定時(shí)法：（兩點(diǎn)法）通過測定酶反應(yīng)開始后某一時(shí)間段內(nèi)（t1到t2）產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應(yīng)初速度的方法。其中t1往往取反應(yīng)開始的時(shí)間。酶與底物在一定溫度下作用一段固定的時(shí)間，通過加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、蛋白醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理沉淀劑等，使反應(yīng)停止（也叫中止反應(yīng)法）。加入試劑進(jìn)入化學(xué)反應(yīng)呈色測出底物和產(chǎn)物的變化。該法最基本的一點(diǎn)是停止反應(yīng)后才測定底物或物的變化。優(yōu)點(diǎn)：簡單易行，對(duì)試劑要求不高。缺點(diǎn)：難保證測定結(jié)果的真實(shí)性。難以確定反應(yīng)時(shí)間段酶促反應(yīng)是否處于線性期。隨著保溫時(shí)間的延續(xù)，酶變性失活加

胎牛血清的幾項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)你知道嗎？2023/07/07: 一、內(nèi)毒素內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí)，才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對(duì)細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代；內(nèi)毒素含量過高，會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國際上規(guī)定，胎牛血清的級(jí)別，應(yīng)以內(nèi)毒素水平的高低來確定，其中，特級(jí)胎牛血清的內(nèi)毒素應(yīng)二、血紅蛋白含量胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高；反之，數(shù)值越低。實(shí)際

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2023/07/06: 1、細(xì)胞復(fù)蘇將細(xì)胞凍存管從干冰中取出，立即放置37°水浴速融1min，見無冰晶即可不再水?。ㄓ描囎幽萌。⒓?xì)胞凍存液加入10~15ml完培中，吹打混勻，減少DMSO對(duì)細(xì)胞毒性，800rpm離心5min棄上清，細(xì)胞沉淀進(jìn)行下一步傳代。2、細(xì)胞傳代試劑與材料（貼壁細(xì)胞）：細(xì)胞：4T1乳腺癌細(xì)胞；基礎(chǔ)培養(yǎng)基：1640培養(yǎng)基（含有生物素、維生素B12、對(duì)氨基苯甲酸PABA、高濃度的維生素肌醇和膽堿；不含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長因子）；血清：胎牛血清FBS（細(xì)胞營養(yǎng)液：提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子

CCK8細(xì)胞實(shí)驗(yàn)2023/07/04: 實(shí)驗(yàn)一：細(xì)胞增殖分析1）制備細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)。2）在96孔板中接種細(xì)胞懸液，每孔約100μl，同樣的樣本可做3個(gè)重復(fù)。3）將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)一段時(shí)間（37℃,5%CO2），細(xì)胞貼壁需要大約2-4h，如果是懸浮細(xì)胞，該步驟可以省去。4）每孔各加入10μlCCK-8溶液，由于加入的CCK-8量比較少，可能會(huì)因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議在加完試劑后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板以幫助混勻，或者直接配置含10%CCK-8的培養(yǎng)基，以換液的形式加入。另外注意，加樣的過程中盡量不要產(chǎn)生氣泡。5）將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱

elisa試劑盒的產(chǎn)品特點(diǎn)及操作方法2023/07/03: 產(chǎn)品特點(diǎn)：一、高效、靈敏、特異的抗體；二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定，樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L，取100mL

如何配置PBS？2023/06/30: PBS作為生物實(shí)驗(yàn)中試劑，PBS是磷酸緩沖鹽溶液，一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH、可以緩沖pH等特點(diǎn)。PBS、蒸餾水和生理鹽水三種溶劑該怎么選擇呢？蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性；而生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)。在實(shí)驗(yàn)室也常見PB、PBST溶液。PB溶液的成分通常有磷酸鈉和磷酸鉀。若只是化學(xué)反應(yīng),用PB溶液就行。在PB的基礎(chǔ)上按照一定比例加

如何養(yǎng)細(xì)胞？2023/06/29: 一、細(xì)胞的營養(yǎng)來源針對(duì)大多數(shù)腫瘤細(xì)胞，營養(yǎng)配方一般為：90%合成培養(yǎng)基(DMEM、RPMI1640、MEM等)和10%胎牛血清(FBS);為了防止污染，可以加1%雙抗常見問題解答：Q：針對(duì)不同細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基配方一樣嗎?如何獲知呢?A：不同細(xì)胞的培養(yǎng)基是不同的。一般ATCC購買的細(xì)胞，針對(duì)不同細(xì)胞株，會(huì)有詳細(xì)介紹，包括生長的狀態(tài)圖、培養(yǎng)基的類型等。如人源乳腺癌細(xì)胞MCF-7細(xì)胞一般為1640，人源肺癌細(xì)胞A549可用DMEM培養(yǎng)基。Q：培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?A：因?yàn)榕囵B(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色

空氣位移移液管如何工作？2023/06/28: 設(shè)置容積時(shí)，活塞將移動(dòng)到適當(dāng)?shù)奈恢?。?dāng)操作按鈕按下第一檔時(shí)，活塞會(huì)排出音量設(shè)置上指示的相同空氣量。將頂端浸入液體后，操作按鈕被釋放。這會(huì)產(chǎn)生部分真空，并吸入體積的液體進(jìn)入頂端。當(dāng)操作按鈕再次按下第一檔時(shí)，進(jìn)入槍頭頂端的液體不會(huì)吹出。要清空頂端，需要將按鈕將按下到第二檔。影響空氣置換移液器精度的因素：溫度：移液精度最重要的因素是液體溫度。下圖顯示了液體溫度與移液器和空氣不同的時(shí)體積的變化。如果液體、移液器和空氣的溫度相同，則精度不會(huì)受到顯著影響。密度：密度是液體的質(zhì)量/體積比。密度根據(jù)溫度和氣壓而

如何選擇包埋劑2023/06/26: 包埋劑的分類一般用光學(xué)顯微鏡觀察的切片，用石蠟、火棉膠、碳蠟、明膠等作包埋劑；電子顯微鏡則使用環(huán)氧杯脂、聚苯乙/烯樹脂、異丁/烯樹脂及水溶性樹脂；硬組織包埋(骨、牙齒)則采用塑料包埋，甲酯甲基內(nèi)/烯。*實(shí)際上包埋劑就是浸誘劑，浸透和包埋時(shí)用的是同一種物質(zhì)，只是用在不同的步驟上叫法不同而已。如用石蠟作浸透，那么同樣要用同樣的石蠟包埋。如何選擇合適的包埋劑包埋劑的作用組織對(duì)象有特定需求，選擇合適包埋劑可以提高包埋質(zhì)量，從而提高切片質(zhì)量。接下來，為大家簡單做了分類：石蠟：常用常見的包埋劑，是病理制片經(jīng)

細(xì)胞分裂的原理、作用2023/06/25: 細(xì)胞分裂（celldivision）是指活細(xì)胞增殖及其數(shù)量由一個(gè)細(xì)胞分裂為兩個(gè)細(xì)胞的過程。分裂前的細(xì)胞稱母細(xì)胞（mothercell），分裂后形成的新細(xì)胞稱子細(xì)胞（daughtercell）。通常包括細(xì)胞核分裂和細(xì)胞質(zhì)分裂兩步。在核分裂過程中母細(xì)胞把遺傳物質(zhì)傳給子細(xì)胞。真核細(xì)胞分裂包括有絲分裂、減數(shù)分裂、無絲分裂。細(xì)胞分裂（celldivision）是活細(xì)胞增殖其數(shù)目由一個(gè)細(xì)胞分裂為兩個(gè)細(xì)胞的過程。分裂前的細(xì)胞稱母細(xì)胞，分裂后形成的新細(xì)胞稱子細(xì)胞。一般包括細(xì)胞核分裂和細(xì)胞質(zhì)分裂兩步。在核分裂過程

如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板？2023/06/21: 細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?。?）平底和圓底（U型和V型）培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞，通常是選用平底的，這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí)，無論是貼壁和懸浮細(xì)胞，一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別

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