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胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程2022/11/28: 胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中；因此，胎牛血清應(yīng)用很廣泛。比如，胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。真正胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程有哪些呢？胎牛血清主要步驟：1.固定和麻醉胎牛原血清采集的關(guān)鍵技術(shù)主要是懷孕母牛的剖腹產(chǎn)和太牛的全封閉無菌心臟穿刺采血，對懷孕8

牛血清蛋白的BSA結(jié)構(gòu)與配制方法2022/11/23: 血清蛋白(BSA）成分結(jié)構(gòu)牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白（BSA），又

蛋白質(zhì)的沉淀方法中哪些可以用于酶的制備過程2022/11/21: 蛋白質(zhì)的沉淀方法中只有鹽析法可以用于酶的制備過程。蛋白質(zhì)沉淀的概念：蛋白質(zhì)分子凝聚從溶液中析出的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)沉淀(precipitation)，變性蛋白質(zhì)一般易于沉淀，但也可不變性而使蛋白質(zhì)沉淀，在一定條件下，變性的蛋白質(zhì)也可不發(fā)生沉淀。定性分析：蛋白質(zhì)所形成的親水膠體顆粒具有兩種穩(wěn)定因素，即顆粒表面的水化層和電荷。若無外加條件，不致互相凝集。然而除掉這兩個穩(wěn)定因素(如調(diào)節(jié)溶液pH至等電點(diǎn)和加入脫水劑)蛋白質(zhì)便容易凝集析出。如將蛋白質(zhì)溶液pH調(diào)節(jié)到等電點(diǎn)，蛋白質(zhì)分子呈等電狀態(tài)，雖然分子間同性電

細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的三種生長現(xiàn)象2022/11/18: 細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有三種：混濁生長、沉淀生長、菌膜生長（表面生長）1、混濁生長：大多數(shù)細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長繁殖后均勻渾濁。如大腸埃希菌、志賀菌等。2、沉淀生長：少數(shù)鏈狀排列的細(xì)菌如鏈球菌，炭疽芽孢桿菌等則呈沉淀生長。3、菌膜生長（表面生長）：枯草芽孢桿菌、結(jié)核分歧桿菌和銅綠假單胞菌等專性需氧菌一般呈表面生長，常形成菌膜。細(xì)菌培養(yǎng)常見的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法（一）培養(yǎng)基培養(yǎng)基是供細(xì)菌生長用的，由人工方法將多種營養(yǎng)物質(zhì)根據(jù)各種細(xì)菌的需要而組合成的混合營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的基本成分有營養(yǎng)物質(zhì)、凝固物

細(xì)胞系的建立要求2022/11/15: 細(xì)胞系細(xì)胞系（cellline）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）、無限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（特定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。也有認(rèn)為細(xì)胞系(cellline）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系(FiniteCellLine)無限細(xì)胞系

動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理2022/11/14: 動物細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外條件下的生長，動物細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中不再形成組織。從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。用途指動物、(包括哺乳動物、昆蟲、魚類、禽類等)細(xì)胞在體外的培養(yǎng)技術(shù)，即在無菌條件下，從機(jī)體中取出組織或細(xì)胞，模擬體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件，讓它在培養(yǎng)器皿中繼續(xù)生存、生長和繁殖的方法。體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞。動物細(xì)胞培養(yǎng)給細(xì)胞生物學(xué)的研究帶來了極大的方便，解決了以人的活細(xì)胞材料作為研究對象或研究工具的問題

胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別2022/11/11: 先來看看牛血清大體的分類：胎牛血清、新生牛血清和小牛血清，而劃分三者之間的是根據(jù)對不同年齡段的牛采血所得到的不同的血清產(chǎn)品。胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。牛血清作為實(shí)驗(yàn)室廣泛推崇的天然培養(yǎng)被應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)。但這三種牛血清由于取血時間不同，其成分存在著一些差異。胎牛血清含

什么是PBS緩沖液？2022/11/10: PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na?HPO?、KH?PO?、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。由于Na?HPO?和KH?PO?它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣；而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1mmol/LCaCl?和0.5mmol/LMgCl?，以提供雙價陽離子。pbs緩沖液的配制方法含0.05%吐溫－20的pH7.4

標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)溶液配制常見問題2022/11/09: 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制常見問題1、能否直接將溶劑加入標(biāo)準(zhǔn)品的瓶子中進(jìn)行溶解，再轉(zhuǎn)移到容量瓶中定容?不能。一般除非特別指明，所有標(biāo)準(zhǔn)品廠商給出的產(chǎn)品質(zhì)量和體積都不是精確數(shù)值，比如10mg的標(biāo)準(zhǔn)品，其瓶中的產(chǎn)品重量可能大于10mg，如10.5mg或11mg。如果產(chǎn)品的重量為精確數(shù)值，廠家一般會特別注明。2、溶劑選擇：根據(jù)已有的方法或者物質(zhì)的相關(guān)理化性質(zhì)選擇合適溶劑。不適當(dāng)?shù)娜軇┛赡茉斐蔁o法溶解或者產(chǎn)品降解。3、稱量方法：請根據(jù)您需要稱量的重量和容許誤差選擇合適的天平。如使用十萬分之一的天平，建議稱量值不小于1

細(xì)胞培養(yǎng)生長減慢和死亡的原因2022/11/07: 培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢這種情況可能的原因包括：1．由于更換了不同培養(yǎng)液或血清，細(xì)胞需要重新適應(yīng)。2．試劑保存不當(dāng)，培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。3．培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。4．接種細(xì)胞起始濃度太低。5．細(xì)胞已老化。6．支原體污染。建議解決方法：1．比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。2換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長因子。3．用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，更換培養(yǎng)物。4．培養(yǎng)液需在2-8℃避光

細(xì)胞培養(yǎng)中血清能起到什么作用？2022/11/04: 血清主要作用：提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可*松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)為何需要在CO2培養(yǎng)箱中？2022/11/03: 細(xì)胞培養(yǎng)為何需要在CO2培養(yǎng)箱中？二氧化碳不僅是細(xì)胞生長的必需成分，還與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境，氧氣、二氧化碳是細(xì)胞生存的必要條件。氧氣參與細(xì)胞的三羧酸循環(huán)，為細(xì)胞生存、代謝與合成提供能量；二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，是細(xì)胞生長的必需成分，又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開放式培養(yǎng)中，以5%的二氧化碳?xì)怏w比例為宜。細(xì)胞污染的預(yù)防①實(shí)驗(yàn)用品防止污染。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要che底，各種溶液滅菌要仔細(xì)，并在

蛋白酶抑制劑作用原理分享2022/11/01: 蛋白酶抑制劑是什么？首先我們來了解蛋白酶：蛋白酶是人類免疫缺陷病毒基因編碼中的一種特異天冬酰蛋白酶，其作用是將基因和基因表達(dá)所產(chǎn)生的蛋白裂解，成為具有活性的病毒結(jié)構(gòu)蛋白和酶。蛋白酶抑制劑：蛋白酶抑制劑，外文名（proteaseinhibitor），多肽類化合物。是基于肽類的化合物，它們或競爭性抑制蛋白酶活性或作為互補(bǔ)蛋白酶活性點(diǎn)的抑制劑。蛋白酶抑制劑是90年代中后期的新產(chǎn)品，藥物合成工藝難度大。蛋白酶抑制劑作用原理是什么？蛋白酶抑制劑(proteaseinhibitor)從廣義上指與蛋白酶分子活

緩沖溶液有什么作用你知道嗎？2022/10/31: 緩沖溶液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念，緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生顯著的變化，緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。只要知道緩沖對的PH值，和要配制的緩沖液的pH值（及要求的緩沖液總濃度），就能按公式計算[鹽]和[酸]的量。這個算法涉及對數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計算麻煩，已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計算出所用緩

血清在科研實(shí)驗(yàn)中起到什么作用？2022/10/27: 鑒別方法：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝xue塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血

你了解抗體的基礎(chǔ)知識嗎？2022/10/25: 抗體(英語:antibody)，(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面?？贵w能識別特定外來物的一個du特特征，該外來目標(biāo)被稱為抗原?？贵w的分類：1.可將其分為抗毒素、抗菌抗體、抗病毒抗體和親細(xì)胞抗體（能與細(xì)胞結(jié)合的免疫球蛋白，如1型變tai反應(yīng)中的lgE反應(yīng)素抗體，能吸附在靶細(xì)胞膜上）2.按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、Ig

緩沖溶液在實(shí)驗(yàn)中起到什么作用2022/10/24: 緩沖溶液（BufferSolution）是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。pH緩沖系統(tǒng)對維持生物的正常pH值和正常生理環(huán)境起到重要作用。多數(shù)細(xì)胞僅能在很窄的pH范圍內(nèi)進(jìn)行活動，而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩沖體系，它們是蛋白質(zhì)緩沖系統(tǒng)、重碳酸鹽緩沖系統(tǒng)以及磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。每種緩沖體系所占的分量在各類細(xì)胞和器官中是不同的。在生化研究工作中，常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研

細(xì)胞培育有哪些基本條件？2022/10/19: 1.溫度細(xì)胞溫度過低時細(xì)胞成長緩慢甚至不成長。利用冷凍保藏細(xì)胞可保持細(xì)胞的原有割裂分解能力。溫度過高導(dǎo)致細(xì)胞。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需求的適溫度決定的。大都生物大分子遇到高溫后簡單導(dǎo)致空間結(jié)構(gòu)改動或者喪失（變性）。細(xì)胞膜遇到高溫后簡單變化。2.pH過酸或過堿可導(dǎo)致細(xì)胞。這主要與蛋白質(zhì)的變性和細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)受損有關(guān)。3.透壓細(xì)胞內(nèi)外可溶于水的物質(zhì)份額和品種決定細(xì)胞的脹大與收縮程度，因?yàn)榧?xì)胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質(zhì)經(jīng)過。4.細(xì)胞養(yǎng)物養(yǎng)分物和水一同，又名細(xì)胞培育液，培育液中含有細(xì)胞增殖和成長所

細(xì)胞復(fù)蘇的步驟及注意事項(xiàng)2022/10/17: 一、主要步驟①將冷凍管從液氮中取出，迅速投入37℃水浴融化，細(xì)胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時間延長會提高細(xì)胞死亡率，復(fù)蘇過程中一般細(xì)胞死亡率在20%～25%之間。②迅速用酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒，然后放置在冰浴上。③小心開啟瓶蓋，把細(xì)胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱，36℃～38℃培養(yǎng)1h，讓細(xì)胞貼壁。④細(xì)胞貼壁后，小心移棄培養(yǎng)基，主要是去掉DMSO(懸浮生長細(xì)胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細(xì)胞及其碎片，加5mL新鮮培養(yǎng)基，36℃～38

細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些基本要求？2022/10/13: 現(xiàn)代生物技術(shù)均通過細(xì)胞作為載體來進(jìn)行，無論是基因治療、干細(xì)胞、克隆技術(shù)都在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的。細(xì)胞的生長需要一定的營養(yǎng)環(huán)境，用于維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基，即指所有用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存細(xì)胞用的物質(zhì)，就其本意上講為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。它是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。細(xì)胞培養(yǎng)基其組成成分主要有：水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)離子及其他一些入核酸降解物、激素等。細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿

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