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胎牛血清在實(shí)驗(yàn)中起到什么作用？2023/02/14: 胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制常用方法2023/02/13: 一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)監(jiān)控質(zhì)控過程通常的做法是實(shí)驗(yàn)室直接用合適的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)樣品作為監(jiān)控樣品，定期或不定期將監(jiān)控樣品以比對(duì)樣或密碼樣的形式，與樣品檢測(cè)以相同的流程和方法同時(shí)進(jìn)行，檢測(cè)室完成后上報(bào)檢測(cè)結(jié)果給相關(guān)質(zhì)量控制人員，也可由檢測(cè)人員自行安排在樣品檢測(cè)時(shí)同時(shí)插人標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，驗(yàn)證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。適用范圍一般可用于：儀器狀態(tài)的控制、樣品檢測(cè)過程的控制、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的儀器比對(duì)、人員比對(duì)、方法比對(duì)以及實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)等。這種方法的特點(diǎn)是可靠性高，但成本高。二、人員比對(duì)質(zhì)控過程由實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的檢測(cè)人員在合理的時(shí)

培養(yǎng)基配制操作步驟2023/02/10: 1、計(jì)算稱量根據(jù)待檢樣品屬性計(jì)算出所需的不同培養(yǎng)基的體積，根據(jù)說明書進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；電子天平需開機(jī)預(yù)熱30min后使用，稱量過程中手要穩(wěn)，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中，若灑落，應(yīng)立即停止稱量，使用潔凈布擦干粉末，重新調(diào)“0”后稱量。2、溶化對(duì)于可溶性淀粉,先用少量冷水調(diào)成糊狀,再放入沸水中；不易溶解的培養(yǎng)基，先加入少量純化水振搖溶解后，二次加水配制；需分裝的培養(yǎng)基，需完quan溶解，含瓊脂的培養(yǎng)基需加熱融化，完quan溶解后，分裝至不同容器中進(jìn)行滅菌。3、分裝如果要制作斜面培養(yǎng)基，須將培養(yǎng)基分裝

保存血清時(shí)遇突發(fā)問題怎么處理2023/02/08: 1.保存血清的方法是怎樣的呢？我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損？我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，血纖維蛋白(形成凝血的蛋白

細(xì)胞培養(yǎng)的方法及注意事項(xiàng)2023/02/07: 1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;2.無菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上;3.培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗(yàn):將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi),用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取完quan培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天,肉眼見無渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌,分裝成支置-20度保存;5.

胎牛血清的作用你知道嗎？2023/02/02: 牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)

抗血清的鑒定方法2023/01/30: 1.抗體特異性的鑒定常用雙向免疫擴(kuò)散法。（1）粗抗原及純抗原之間皆有一條沉淀線，且兩者互相融合，則已產(chǎn)生單價(jià)特異性抗體；（2）若純化抗原出現(xiàn)一條，而粗抗原出現(xiàn)多條線，且一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接，需去除雜抗。（3）若不出現(xiàn)沉淀線，表示免疫失敗。2.抗體效價(jià)的測(cè)定顆粒性抗原采用凝集試驗(yàn)，可溶性抗原采用雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（棋盤滴定）、ELISA等方法。3.抗體純度的鑒定采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫電泳等。若只出現(xiàn)一條蛋白電泳區(qū)帶說明抗體純化已達(dá)到要求。

分離與純化的基本操作規(guī)程2023/01/12: 酶的分離純化一般包括三個(gè)基本步驟：即抽提、純化、結(jié)晶或制劑。首先將所需的酶從原料中引入溶液，此時(shí)不可避免地夾帶著一些雜質(zhì)，然后再將此酶從溶液中選擇性地分離出來，或者從此溶液中選擇性地除去雜質(zhì)，然后制成純化的酶制劑。酶分離純化的最終目的是獲得單一純凈的酶，因此，容許在不破壞“目的酶”的限度內(nèi)，使用各種手段;酶與底物和抑制劑的結(jié)合常使其理化性質(zhì)和穩(wěn)定性發(fā)生改變，這種特性已被用于酶的分離純化。由于酶及其來源的多樣性及與之共存的高分子物質(zhì)的復(fù)雜性，目前還很難找到一種通用的方法以適用于一切酶的純化。為了使

滅菌前后培養(yǎng)基pH值差異的原因2023/01/09: 培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物的試驗(yàn)結(jié)果，而pH值又是培養(yǎng)基的重要監(jiān)控項(xiàng)目。這是因?yàn)槲⑸锏纳L不僅依賴豐富的營養(yǎng)，還需要一個(gè)適宜的pH環(huán)境，只有在適宜的pH環(huán)境下微生物才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性，因此培養(yǎng)基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果。在培養(yǎng)基配制過程中，滅菌過程對(duì)培養(yǎng)基pH值影響尤為重要。我們常?？梢园l(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基在滅菌前后pH值有差異，一般滅菌后pH值都會(huì)有所下降，這是為什么呢？滅菌的時(shí)間和溫度在高壓濕熱滅菌時(shí)，長時(shí)間的高溫會(huì)對(duì)培養(yǎng)基產(chǎn)生很多不利的影響，例如會(huì)導(dǎo)致

使用緩沖液的注意事項(xiàng)2023/01/03: 使用緩沖液注意這些問題1)緩沖液使用前必須過濾。2)溶劑、樣品易受到細(xì)菌和霉菌的影響，要注意清潔。3)一般不能直接用有機(jī)溶劑做清洗沖洗。4)梯度洗脫時(shí)，選低吸收值的緩沖液：例如：梯度洗脫時(shí)，緩沖液與有機(jī)相應(yīng)預(yù)混，以防止析鹽。在保證峰不拖尾的情況下，盡可能選用低濃度的緩沖鹽，防止析鹽;緩沖鹽濃度，一般用20～30mM基本上就可以了，如果流動(dòng)相中有機(jī)相含量高的話，流動(dòng)相中的鹽類緩沖液濃度就不能過高，鹽的濃度起碼要保證在流動(dòng)相條件下不會(huì)析出。離子對(duì)緩沖液濃度要高一點(diǎn)，一般50～100mM。緩沖液大量稀

微生物污染的種類，你知道嗎？2022/12/20: 有害微生物污染因環(huán)境條件變化打破了正常的生態(tài)平衡體系,抑制一些微生物生長而促進(jìn)另一些微生物旺長,形成了不同于正常微生物群落結(jié)構(gòu)的有害微生物群落,改變?cè)瓉淼纳鷳B(tài)功能,造成了環(huán)境質(zhì)量的惡化,直接或間接地影響其他生物的生存。與另外兩種類型的微生物污染相比,這類微生物污染的毒性作用范圍更廣,后果更為嚴(yán)重。有害微生物群落的物種構(gòu)成可能包括細(xì)菌、真菌、藻類、原生動(dòng)物等各種微生物,不僅包括了有害微生物種類,甚至包括了一些正常條件下的有益微生物種類。從此可知,對(duì)于生態(tài)毒理學(xué)來說,凡是對(duì)生態(tài)系統(tǒng)有害的微生物及其群

常用培養(yǎng)基的基礎(chǔ)介紹2022/12/16: 1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型

胰蛋白酶的介紹2022/12/15: 胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，純化獲得的結(jié)晶，再制成的凍干制劑。易溶于水，不溶于三lv甲烷、乙醇、yi醚等有機(jī)溶劑。在pH1.8時(shí)，短時(shí)間煮沸幾乎不失活；在堿溶液中加熱則變性沉淀，Ca2+有保護(hù)和激活作用，胰蛋白酶的等電點(diǎn)為pH10.1。牛胰蛋白酶原有229個(gè)氨基酸組成，含6對(duì)二硫鍵，其氨基酸排列順序和晶體結(jié)構(gòu)已被闡明。在腸激酶活自身催化下，酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解，釋放出來纈-天-天-天-天-賴6肽，生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個(gè)，分子量238

細(xì)胞培養(yǎng)為什么要先裂解紅細(xì)胞？2022/12/13: 紅細(xì)胞裂解液一、基本介紹紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡便易行的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。二、使用說明①組織細(xì)胞樣品1、新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，離心棄去上清液。2、從4

液體培養(yǎng)基的配置原則2022/12/12: 根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此，要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)，配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力，能以簡單的無機(jī)物如co2和無機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此，培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長。營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長需要，

生化實(shí)驗(yàn)中加入緩沖液的目的和作用2022/12/09: 生物緩沖液是一種能夠保持pH值不受酸堿度影響的溶液，多種細(xì)胞只能在很小的PH范圍內(nèi)活動(dòng)，需要有緩沖體系來維持整個(gè)過程不受干擾。尤其是在生化實(shí)驗(yàn)中，生物緩沖液極其受重視，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)中的各類物質(zhì)非常容易使PH發(fā)生變化，而這就直接影響到整體工作進(jìn)程。例如在酶活性實(shí)驗(yàn)中，有時(shí)因?yàn)镻H的變化大，會(huì)使酶活性下降甚至失活，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行下去，所以在生化實(shí)驗(yàn)中加入緩沖液的主要目的就是維持PH的穩(wěn)定。一、為什么緩沖溶液可以維持PH值的穩(wěn)定呢？其實(shí)這主要是因?yàn)榫彌_溶液自身的成分和性能，它的成分里包含了酸、鹽或堿，所

滅活型和非滅活型保存液有何區(qū)別？2022/12/07: 1、滅活型：病毒和細(xì)菌受理化因素作用后失去感染性，稱為滅活（inactivation）。多數(shù)病毒比細(xì)菌更容易被滅活。這也使得病毒的長期保存通常比細(xì)菌的保存更困難。其實(shí)大多數(shù)病毒耐冷不耐熱，對(duì)熱不穩(wěn)定。55—60℃，通常在數(shù)分鐘內(nèi)，病毒的衣殼蛋白就會(huì)發(fā)生變性，使病毒失去感染能力。這可能是因?yàn)榇藭r(shí)的病毒已失去了對(duì)正常細(xì)胞的吸附能力或脫衣能力。病毒存在不易保存和易感染的弊端，但滅活型病毒保存液解決了這一弊端。病毒保存液（滅活型）采用高濃度的胍鹽可以快速對(duì)呼吸道病原體進(jìn)行滅活、保存使樣品失去感染性，里面

PIPES緩沖液的注意事項(xiàng)2022/12/05: PIPES全名哌suo-1,4-二乙磺酸，是一種兩性離子生物緩沖劑，也是GOOD’S緩沖劑里的一種。具有高水溶性、底細(xì)胞膜通透性、穩(wěn)定的酸堿解離性、低金屬螯合能力、高化學(xué)穩(wěn)定性，并且能在紫外線和可見光區(qū)中低吸收光譜等優(yōu)良特性。PIPES作為一種應(yīng)用非常廣泛的緩沖劑，在植物組化學(xué)中可以以最小化戊二醇固定導(dǎo)致的脂質(zhì)損傷和實(shí)驗(yàn)假象。由于PIPES的pka十分接近生理性PH值，因此非常適合體外細(xì)胞培養(yǎng)。但是PIPES能形成自由基，所以不適合用于氧化還原反應(yīng)中。那么，在使用PIPES時(shí)，需要注意些什么呢？

細(xì)胞復(fù)蘇步驟和注意事項(xiàng)2022/12/02: 一、主要步驟①將冷凍管從液氮中取出，迅速投入37℃水浴融化，細(xì)胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時(shí)間延長會(huì)提高細(xì)胞死亡率，復(fù)蘇過程中一般細(xì)胞死亡率在20%～25%之間。②迅速用酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒，然后放置在冰浴上。③小心開啟瓶蓋，把細(xì)胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱，36℃～38℃培養(yǎng)1h，讓細(xì)胞貼壁。④細(xì)胞貼壁后，小心移棄培養(yǎng)基，主要是去掉DMSO(懸浮生長細(xì)胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細(xì)胞及其碎片，加5mL新鮮培養(yǎng)基，36℃～38

DMEM高糖，含谷氨酰胺和丙酮酸鈉的特點(diǎn)2022/11/30: 背景及概述培養(yǎng)基是為適合生物生長所需要的人工配制的混合物質(zhì)養(yǎng)料。常指培養(yǎng)微生物或生物細(xì)胞組織的養(yǎng)料，主要用于微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定、保藏和釀造、發(fā)酵等方面。具體成分根據(jù)生物營養(yǎng)需要而不同。一般含有水、碳水化合物、含氨物質(zhì)和礦質(zhì)鹽類等。按所用原料不同可分為兩類：應(yīng)用化學(xué)藥品配成并標(biāo)明成分的，稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基，應(yīng)用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配成，稱為天然培養(yǎng)基。又因加入或不加入賦形劑可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。特點(diǎn)DMEM（Dulbecco'sModifiedEagleMe

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