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分離菌種都有些什么方法？2022/08/24: 純種分離從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中，不僅需要通過(guò)分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物，而且還必須隨時(shí)注意保持微生物純培養(yǎng)物的“純潔”，防止其他微生物的混入。純種分離的目的是將目的菌從混雜的微生物中分離出來(lái)，獲得純培養(yǎng)。如果樣品沒(méi)有經(jīng)增殖培養(yǎng)而直接進(jìn)行分離，那么要得到具有某一特性的純種，就更該細(xì)致、謹(jǐn)慎的操作。純種分離的常用方法有4種：傾注平板分離法、涂布平板分離法、平板劃線分離法和組織分離法。1、傾注平板

你知道霉菌的生長(zhǎng)條件嗎？2022/08/23: 總體來(lái)講，霉菌的生長(zhǎng)受霉菌種類和環(huán)境因素兩方面影響，環(huán)境因素中溫度，濕度，營(yíng)養(yǎng)和光照比較關(guān)鍵。1、水份。霉菌生長(zhǎng)繁殖主要的條件之一是必須保持一定的水份，一般來(lái)說(shuō)，米麥類水份在14%以下，大豆類在11%以下，干菜和干果品在30%以下，微生物是較難生長(zhǎng)的。食品中真正能被微生物利用的那部分水份又稱為水份活性（Wateractivity縮寫(xiě)為Aw），Aw越接近于1，微生物最易生長(zhǎng)繁殖。食品中的Aw為0.98時(shí)。微生物最易生長(zhǎng)繁殖，當(dāng)Aw降為0.93以下時(shí)，微生物繁殖受到抑制，但霉菌仍能生長(zhǎng)，當(dāng)Aw在0.

IgG的分離與提純實(shí)驗(yàn)2022/08/22: 實(shí)驗(yàn)方法原理硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質(zhì)。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離，是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質(zhì)溶液中可與蛋白質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)水分子，從而破壞蛋白質(zhì)表面的水化膜，降低其溶解度，使之從溶液中沉淀出來(lái)。各種蛋白質(zhì)的溶解度不同，因而可利用不同濃度的鹽溶液來(lái)沉淀不同的蛋白質(zhì)。這種方法稱之為鹽析。鹽濃度通常用飽和度來(lái)表示。硫酸銨因其溶解度大，溫度系數(shù)小和不易使蛋白質(zhì)變性而應(yīng)用廣。實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物血清樣品試劑、試劑盒硫酸銨NH4OHPB液BaCl2溶液納氏液洗脫

常見(jiàn)pH值的磷酸鹽緩沖液的配制2022/08/19: 1、磷酸鹽緩沖液取磷酸二氫鈉38.0g,與磷酸氫二鈉5.04g,加水使成1000mL,即得。2、磷酸鹽緩沖液（pH2.0）甲液：取磷酸16.6mL,加水至1000mL,搖勻。乙液：取磷酸氫二鈉71.63g,加水使溶解成1000mL.取上述甲液72.5mL與乙液27.5mL混合，搖勻，即得。3、磷酸鹽緩沖液（pH2.5）取磷酸二氫鉀100g,加水800mL,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5,用水稀釋至1000mL。4、磷酸鹽緩沖液（pH5.0）取0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液一定量，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值

如何規(guī)范的操作無(wú)菌取樣2022/08/17: 抽樣操作是整個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流程的第一步，也是首先應(yīng)當(dāng)保證的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)常會(huì)有這樣的情況：樣品檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常，我們排查了檢測(cè)流程的方方面面都沒(méi)有出現(xiàn)偏差，結(jié)果是樣品在抽樣時(shí)已經(jīng)被污染。這樣的情況事實(shí)上并不鮮見(jiàn)，如何杜絕呢？還得從規(guī)范抽樣操作開(kāi)始。由于不同類型的樣品應(yīng)采取不同的抽樣操作，為了使抽樣更加科學(xué)，下面針對(duì)不同樣品的抽樣操作進(jìn)行分類闡述。液體樣品：一般情況下，液體樣品比較容易獲得代表性樣品。液態(tài)食品一般盛放在大罐中，取樣時(shí)可連續(xù)或間歇攪拌。對(duì)于較小的容器，可在取樣前將液體上下顛倒，使其*混勻

各種培養(yǎng)基的移種方法2022/08/15: 一、斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)(1)材料瓊脂斜面培養(yǎng)基經(jīng)分離培養(yǎng)的平板培養(yǎng)物。(2)方法①在瓊脂斜面培養(yǎng)基試管上部標(biāo)明移種的菌名(或編號(hào))、接種日期、接種者的組別及代號(hào)。②左手持長(zhǎng)有細(xì)菌的平板底，右手持接種環(huán)。接種環(huán)在火焰上滅菌冷卻后，沾取平板劃線上發(fā)育良好的孤立菌落。把平板放回原處，立即用此手取斜面培養(yǎng)基斜持，用右手小指與手掌夾持棉塞，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后撥出棉塞，管口通過(guò)火焰滅菌。③將已沾菌的接種環(huán)伸入斜面培養(yǎng)基的管底部的凝固水，沿斜面培養(yǎng)基的表面從底向上劃一直線，然后再?gòu)牡撞肯蛏蟿澾B續(xù)曲折線；也可不劃直線只

培養(yǎng)基出現(xiàn)沉淀是什么原因?qū)е碌?/a>2022/08/11: 培養(yǎng)基為什么出現(xiàn)沉淀？自己購(gòu)買(mǎi)干粉培養(yǎng)基配制后，總是會(huì)出現(xiàn)沉淀的現(xiàn)象?，F(xiàn)總結(jié)可能是以下幾種原因。一、稱量錯(cuò)誤天平稱量不準(zhǔn)確、計(jì)算稱量錯(cuò)誤導(dǎo)致配制培養(yǎng)基的濃度不正確，都有可能導(dǎo)致岀現(xiàn)部分沉淀。二、水質(zhì)不佳多數(shù)培養(yǎng)基的制備需要使用純化水、去離子水配制，而天然水中含有含有較多的礦物鹽離子，若錯(cuò)誤的使用了自來(lái)水，礦泉水配制，或使用的純化水離子δ除凈，都有可能導(dǎo)致培養(yǎng)基滅菌后岀現(xiàn)渾濁現(xiàn)象或沉淀（磷酸鹽含量高的培養(yǎng)基更易出現(xiàn)此類問(wèn)題。三、培養(yǎng)基pH不正確偏酸或偏堿的pH有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀

細(xì)胞復(fù)蘇的小技巧2022/08/09: 細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外的培養(yǎng)技術(shù)，即在無(wú)菌條件下，從機(jī)體中取出組織或細(xì)胞，模擬機(jī)體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件，讓它在培養(yǎng)皿中繼續(xù)生存、生長(zhǎng)和繁殖的方法。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)我們可以獲得大量的、性狀相同的細(xì)胞，以便于研究細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能和機(jī)制。細(xì)胞復(fù)蘇流程：1、將凍存的細(xì)胞從液氮罐中取出，立即放入37°C的水浴中進(jìn)行融化，輕柔晃動(dòng)，加速融化，直到小瓶中只剩下一小塊冰，時(shí)長(zhǎng)應(yīng)控制在1min中；2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉(zhuǎn)移無(wú)菌操作臺(tái)中，打開(kāi)瓶蓋前，用酒精燈火焰對(duì)瓶口進(jìn)行消毒；3、將預(yù)加熱的

蛋白質(zhì)的組成和活性分析2022/08/08: 在評(píng)價(jià)樣品純度之前，首-先需要鑒定待測(cè)雜質(zhì)的類型，如核酸、碳水化合物、脂質(zhì)、無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)、同工酶類、失活蛋白質(zhì)，進(jìn)而確定在特定溶液條件中,能夠區(qū)分假定雜質(zhì)和目標(biāo)蛋白質(zhì)的理化特性(化學(xué)分析或物理特征）。而純度則是指待測(cè)雜質(zhì)含量低于某個(gè)特定水平。需要注意的是，上述說(shuō)明中并沒(méi)有要求描述雜質(zhì)的性質(zhì)。純化過(guò)程可能已將某一雜質(zhì)的濃度降低到檢測(cè)下限以下，但色譜峰中還有殘留。毫無(wú)疑問(wèn)，表觀純度取決于所選擇的測(cè)定方法及其靈敏度。由于大多數(shù)分離方法都能夠有效地去除非蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，因此遠(yuǎn)慕將主要介紹蛋白質(zhì)樣品中蛋白質(zhì)類

細(xì)菌培養(yǎng)基由哪些成分組成？2022/08/05: 培養(yǎng)基的組成成分包括三大類：營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、凝固物質(zhì)、抑制劑和指示劑。（一）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)盡管不同的細(xì)菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同，但細(xì)菌需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)含有水、氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽類和生長(zhǎng)因子等，常用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如下：1.蛋白胨：蛋白胨是制備培養(yǎng)基時(shí)常用的成分之一，提供細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的氮源。是動(dòng)物或植物蛋白質(zhì)經(jīng)酶或酸堿分解而成。植物胨和動(dòng)物胨各有優(yōu)點(diǎn)，配制培養(yǎng)基常將兩者按一定比例混合使用，提高培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。蛋白胨易溶于水，遇酸不沉淀，不因受高溫而凝固，并為兩性電解質(zhì)有緩沖作用。但吸水性強(qiáng)，應(yīng)注意干燥密封保存。2

自行配制標(biāo)準(zhǔn)溶液有哪些基本要求？2022/08/04: 1.應(yīng)采用具有高純度的溶質(zhì)或基準(zhǔn)物質(zhì)(如金屬、金屬氧化物或金屬化合物；酸、堿、金屬有機(jī)化合物、適宜的鹽類、有機(jī)溶劑等)。2.為確保配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的可靠性、準(zhǔn)確性,實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備、環(huán)境設(shè)施均應(yīng)滿足其要求,(應(yīng)有監(jiān)測(cè)、控制和記錄環(huán)境條件。特別對(duì)灰塵、電磁干擾、放射、溫度、濕度、供電等)。3.具有符合稱量要求器具、應(yīng)有正確稱量的電子分析天平,并通過(guò)周期性的檢定,有質(zhì)檢部門(mén)檢定的證書(shū)。4.要有配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的純度高的溶劑(采用雙重蒸餾去離子水、高純濃度的酸、堿或有機(jī)溶液)。5.配制所用的器皿用具,必須根據(jù)所測(cè)

酶的活性指標(biāo)有哪些？2022/08/03: 酶催化化學(xué)反應(yīng)的能力叫酶活力(或稱酶活性,activeunit)。1961年國(guó)際酶學(xué)會(huì)議規(guī)定:1個(gè)酶活力單位是指在特定條件(25℃,其它為最適條件)下,在1min內(nèi)能轉(zhuǎn)化1μmol底物的酶量,或是轉(zhuǎn)化底物中1μmol的有關(guān)基團(tuán)的酶量。影響因素酶活力可受多種因素的調(diào)節(jié)控制,從而使生物體能適應(yīng)外界條件的變化,維持生命活動(dòng)。沒(méi)有酶的參與,新陳代謝幾乎不可能維持。酶的活性指標(biāo)采用酶活力單位(由米式方程可知:酶促反應(yīng)速度受酶濃度和底物濃度的影響,也受溫度、pH、激活劑和抑制劑的影響。(1)酶濃度從米式方程

胰酶在細(xì)胞培養(yǎng)中起到什么作用2022/08/01: 胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力強(qiáng)。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.2

科研人必看！細(xì)胞培養(yǎng)干貨分享2022/07/29: 細(xì)胞培養(yǎng)的路上，有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的平皿之中，細(xì)胞點(diǎn)點(diǎn)，引無(wú)數(shù)英雄競(jìng)掛東南枝。正所謂“萬(wàn)事開(kāi)頭難”，即便是細(xì)胞復(fù)蘇與保存這兩件看似簡(jiǎn)單的事情，也能造成實(shí)驗(yàn)汪內(nèi)心無(wú)比巨大的陰影面積。其實(shí)，剛剛復(fù)蘇的細(xì)胞就像是剛剛出生的baby，非常脆弱，需要各位小伙伴的細(xì)心呵護(hù)，不然，細(xì)胞就會(huì)被我們花樣養(yǎng)死。為了避免細(xì)胞不明不白的掛掉，我們就要對(duì)細(xì)胞的各種習(xí)性了如指掌。1.俗語(yǔ)道，到什么山上唱什么歌，不同細(xì)胞用不同的培養(yǎng)液。此時(shí)，就不得不提起培養(yǎng)基里的“四大金剛”—MEM、DMEM、1640

天然培養(yǎng)基中血清的成分及其作用2022/07/27: 血清為天然培養(yǎng)基中重要和在組織培養(yǎng)中常使用的天然培養(yǎng)基。血清之所以成為培養(yǎng)中不可少的成分，主要因?yàn)檠逯泻泻芏喾N*的能維持細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的成分。在按人體內(nèi)成分模擬制成的合成培養(yǎng)基中，細(xì)胞所需成分雖相當(dāng)齊全，但仍然缺少很多能影響細(xì)胞增殖和各種生物學(xué)性狀的未知成分，故只有補(bǔ)充血清后，細(xì)胞才能更好地生長(zhǎng)增殖和進(jìn)行一定的功能活動(dòng)。因此當(dāng)前血清仍然為培養(yǎng)細(xì)胞中*的天然培養(yǎng)基。那么血清的主要成分及其作用都有哪些呢？1.蛋白質(zhì)：雖然蛋白質(zhì)是血清的主要成分，但許多蛋白質(zhì)的功能在體外情況下所剩無(wú)幾，而有幾種有關(guān)的

血清中的沉淀物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有影響嗎2022/07/27: （1）細(xì)胞生長(zhǎng)，經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)。（2）過(guò)濾，如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物，血清將很難過(guò)濾。一般說(shuō)來(lái)，因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時(shí)最后已經(jīng)經(jīng)過(guò)100納米或者40納米的過(guò)濾處理，并且經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的無(wú)菌檢測(cè)，因此?？寺〔煌扑]再過(guò)濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。在實(shí)驗(yàn)室中沒(méi)有必要再過(guò)濾處理血清，在大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。（3）污染，磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭(zhēng)端。研究者可能會(huì)在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會(huì)比較警覺(jué)的去做無(wú)菌試驗(yàn)，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會(huì)觀

細(xì)胞株的保存方法你了解嗎？2022/07/26: 1.紫外消毒30min后關(guān)閉紫外燈，開(kāi)啟超凈臺(tái)正常工作狀態(tài)，用酒精消毒操作者的雙手。2.將所需的培養(yǎng)基，胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺(tái)面內(nèi)，點(diǎn)燃酒精燈，將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再將瓶口對(duì)準(zhǔn)在酒精燈上消毒2-3次，旋開(kāi)瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋，分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上，瓶口對(duì)準(zhǔn)酒精燈，且放在距離酒精燈近的位置，瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。3.將培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈上消毒2-3次，旋開(kāi)后分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次，蓋放于酒精燈右側(cè)后將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液懸空倒進(jìn)污缸，

怎么通過(guò)顏色查看胎牛血清？2022/07/25: 不同品牌的胎牛血清可能會(huì)出現(xiàn)好幾種不同的顏色，胎牛血清顏色的不同主要是由于里面血紅蛋白的含量，我們可以就胎牛血清的顏色對(duì)所購(gòu)買(mǎi)的胎牛血清做一個(gè)簡(jiǎn)單的鑒別。根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國(guó)產(chǎn)血清的基本上是采血后馬上離心收集，所以很少會(huì)有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)樘ヅＱ迥?

胎牛血清主要功能及保存方法2022/07/21: 胎牛血清主要功能：1）提供維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素2）酸堿緩沖液作用3）提供蛋白酶抑制劑，使細(xì)胞傳代時(shí)細(xì)胞不受傷害4）細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料基質(zhì)上所需因子來(lái)源5）提供結(jié)合蛋白，結(jié)合或調(diào)控維生素、脂類、金屬和其他激素的結(jié)合物質(zhì)的活力；與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，解毒作用。胎牛血清標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)：1）內(nèi)毒素：標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml，含量*預(yù)示著已經(jīng)污染2）總蛋白含量：胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml3）血紅蛋白：標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl血清種類：1）胎牛血清（FBS）：八月齡胎牛心臟穿刺取血分離血清2）

血漿蛋白有什么功能？2022/07/20: 1、營(yíng)養(yǎng)功能每個(gè)成人3L左右的血漿中約含有200g蛋白質(zhì)，它們起著營(yíng)養(yǎng)貯備的功能。雖然消化道一般不吸收蛋白質(zhì)，吸收的是氨基酸，但是，體內(nèi)的某些細(xì)胞，特別是單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，吞飲完整的血漿蛋白，然后由細(xì)胞內(nèi)的酶類將吞入細(xì)胞的蛋白質(zhì)分解為氨基酸。這樣生成的氨基酸擴(kuò)散進(jìn)入血液，隨時(shí)可供其它細(xì)胞合成新的蛋白質(zhì)之用。2、運(yùn)輸功能蛋白質(zhì)巨大的表面上分布有眾多的親脂性結(jié)合位點(diǎn)，它們可以與脂容性物質(zhì)結(jié)合，使之成為水溶性，便于運(yùn)輸；血漿蛋白還可以與血液中分子較小的物質(zhì)（如激素、各種正離子）可逆性的結(jié)合，即可防止它

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