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上海信裕生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年
氣溫驟升ELISA試劑盒做試驗(yàn)需謹(jǐn)慎2017/09/05
氣溫驟升ELISA試劑盒做試驗(yàn)需謹(jǐn)慎1、ELISA試劑盒的預(yù)備按ELISA試劑盒說明書的請(qǐng)求預(yù)備試驗(yàn)中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾水或去離子水,包含用于洗刷的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運(yùn)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運(yùn)用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的有些應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。2、保溫在ELISA中通常有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶物后??乖贵w反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時(shí)刻,這一保溫進(jìn)程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中
試劑盒實(shí)驗(yàn)的功效可能超出您的幻想2017/08/15
試劑盒實(shí)驗(yàn)的功效可能超出您的幻想ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的成效可能超出您的幻想!然而殘次的試劑盒使得實(shí)驗(yàn)的可靠性常常得不到很好的確保,所以公司盡力加速生物科研試劑的創(chuàng)新和發(fā)展,全面提高科研試劑的質(zhì)量。我們有專業(yè)的銷售和技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì),迎得了國內(nèi)外廠商的共同好評(píng)。樣本要求1.樣本不能含疊氮鈉,由于疊氮鈉是辣根過氧化物酶的抑制劑。2.標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能當(dāng)即實(shí)驗(yàn),可將標(biāo)本兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒本試劑盒使用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中樣本水平。用純化的抗體包
傳代培養(yǎng)細(xì)胞染色體顯示法2017/08/03
傳代培養(yǎng)細(xì)胞染色體顯示法1.培養(yǎng)細(xì)胞:取處于指數(shù)生長期、用較大瓶皿培養(yǎng)的、80%~90%匯合單層培養(yǎng)細(xì)胞。2.加秋水仙素:使用zui終濃度為0.02~0.8微克/毫升營養(yǎng)液,溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6~10小時(shí);或用低溫封閉法:把培養(yǎng)細(xì)胞置于4℃條件下6~12小時(shí)后,再于37℃溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6~10小時(shí)處理(加秋水仙素)。3.采集分裂細(xì)胞:可利用分裂中期細(xì)胞體變圓與底物附著不牢特點(diǎn),此時(shí)手持培養(yǎng)瓶,左右反復(fù)橫向水平搖動(dòng),令培養(yǎng)液在培養(yǎng)細(xì)胞表面反復(fù)沖刷。應(yīng)用此法可使90%的中期分裂細(xì)胞從瓶壁脫落,注意勿用力過猛
技術(shù)講解:為何ELISA試劑盒OD值不正常2017/07/26
技術(shù)講解:為何ELISA試劑盒OD值不正常ELISA試劑盒OD值不正常找原因:1.試劑盒未回溫(對(duì)應(yīng)解決方法:試劑盒回溫到25℃);2.溫度控制不好(對(duì)應(yīng)解決方法:控制正確溫度);3.孵育時(shí)間不準(zhǔn)確(對(duì)應(yīng)解決方法:控制孵育時(shí)間);4.洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加(對(duì)應(yīng)解決方法:洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干);5.陽光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹(對(duì)應(yīng)解決方法:避風(fēng)避陽);6.酶標(biāo)儀的波長錯(cuò)誤Elisa試劑盒(對(duì)應(yīng)解決方法:酶標(biāo)儀的波長450nm);7.抗體的稀釋錯(cuò)誤(對(duì)應(yīng)解決方法
原代細(xì)胞培養(yǎng)2017/07/18
原代細(xì)胞培養(yǎng)一、原理將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。二、儀器、材料及試劑儀器:培養(yǎng)箱(調(diào)整至37℃),培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術(shù)器械、血球計(jì)數(shù)板、離心機(jī)、水浴箱(37℃)材料:胎鼠或新生鼠試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank’s液,碘酒三、操作步驟(一)胰酶消化法1、器材:將孕鼠或新生
【免疫熒光】技術(shù)全解—染色篇2017/07/07
【免疫熒光】技術(shù)全解—染色篇免疫熒光技術(shù)既有抗原抗體反應(yīng)的高度特異性,又能在熒光顯微鏡下清晰地顯示其形態(tài),直觀性強(qiáng)。該方法可用于組織學(xué)中抗原或抗體的定位,也可用于體液標(biāo)本中抗原或抗體的定量檢測。一:熒光抗體染色于已固定的標(biāo)本上滴加經(jīng)適當(dāng)稀釋的熒光抗體。置濕盒內(nèi),在一定溫度下溫育一定時(shí)間,一般可用25~37℃30min,不耐熱抗原的檢測則以4℃過夜為宜。用PBS充分洗滌干燥。熒光顯微鏡檢查應(yīng)在通風(fēng)良好的暗室內(nèi)進(jìn)行。經(jīng)熒光抗體染色的標(biāo)本應(yīng)在染色當(dāng)天鏡檢,每次鏡下觀察時(shí)間以1~2h為宜,時(shí)間過長將使高
培養(yǎng)小鼠樹突狀細(xì)胞攻略2017/06/22
培養(yǎng)小鼠樹突狀細(xì)胞攻略1.C57Bl/6小鼠2.處死小鼠,75%酒精浸泡10min3.解剖取出小鼠股骨和脛骨4.去除骨上組織5.沖洗骨髓腔,直至骨變白6.收集的細(xì)胞沉淀以10000/ml細(xì)胞數(shù)接種,培養(yǎng)液含200U/mlrmGM-CSF和IL-4答:不知道U和ng之間是如何換算的呢,因?yàn)槲矣玫氖荝&D的細(xì)胞因子,是以ng為單位的,是否像論壇上有戰(zhàn)友所說的1U=1ng呢?答:活性單位是個(gè)效應(yīng)單位,是表示生物制品的活性的,和質(zhì)量單位不是簡單換算關(guān)系。有生物活性的物質(zhì),往往可殺死生物(如抗生素可殺死細(xì)
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇及細(xì)胞計(jì)數(shù)存活測試的操作方法與步驟2017/06/06
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇及細(xì)胞計(jì)數(shù)存活測試的操作方法與步驟細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)工作,可以解決細(xì)胞因?yàn)檫B續(xù)繼代造成的退變或轉(zhuǎn)化。細(xì)胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)以及細(xì)胞凍存和復(fù)蘇后都需要細(xì)胞計(jì)數(shù)。一、細(xì)胞冷凍保存1、材料:生長良好之培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO(SigmaD-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene5000-0020)、0.4%(w/v)trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球計(jì)數(shù)盤與蓋玻片、等速降溫機(jī)(KRYO10SeriesII)2、冷凍保存方法:(1)
Cell:研究解密面孔在大腦中的編碼2017/06/05
當(dāng)你看人面照片時(shí),大腦會(huì)立刻識(shí)別出照片上的人是誰,或你之前是否見過。近年來,神經(jīng)學(xué)家一直試圖弄清大腦是如何識(shí)別和感知人臉的。近日,刊登于《細(xì)胞》期刊上的研究顯示,科學(xué)家已經(jīng)了解靈長類動(dòng)物大腦中的人臉識(shí)別編碼系統(tǒng)?!拔覀儼l(fā)現(xiàn),這個(gè)編碼系統(tǒng)非常簡單。”美國加州理工學(xué)院生物工程教授DorisTsao說,“我們發(fā)現(xiàn),當(dāng)一只猴子看到一張面孔時(shí),其大腦中僅有205個(gè)神經(jīng)元參與了相關(guān)編碼過程?!痹诟绲难芯恐校琓sao團(tuán)隊(duì)使用功能性核子共振成像技術(shù)識(shí)別了人類和其他靈長類動(dòng)物大腦中負(fù)責(zé)識(shí)別面孔的區(qū)域。他們將這6
發(fā)現(xiàn)病原真菌招募腸道微生物促進(jìn)殺蚊的新機(jī)制2017/06/02
5月22日,學(xué)術(shù)期刊《美國科學(xué)院院刊》(PNAS)在線發(fā)表了中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所王四寶研究組題為Insectpathogenicfungusinteractswiththegutmicrobiotatoacceleratemosquitomortality的研究論文。該研究揭示了病原真菌利用腸道微生物加速殺蚊的新機(jī)制。蚊蟲傳播多種疾病,嚴(yán)重威脅人類的生命健康。蚊蟲控制是阻斷蚊媒傳染病的重要措施。病原真菌通過昆蟲體壁侵染,在蚊蟲生物防治和阻斷疾病傳播上具有巨大優(yōu)勢,被認(rèn)為
Science:鑒定出暴食神經(jīng)元2017/05/31
在一項(xiàng)新的研究中,來自美國耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員發(fā)現(xiàn)激活大腦一個(gè)區(qū)域中的之前不與進(jìn)食相關(guān)聯(lián)的神經(jīng)元能夠讓小鼠產(chǎn)生暴食行為。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在2017年5月26日的Science期刊上,論文標(biāo)題為“Rapidbinge-likeeatingandbodyweightgaindrivenbyzonaincertaGABAneuronactivation”。論文通信作者為耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)外科研究員AnthonyvandenPol,論文*作者為耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)外科研究員XiaobingZhang。
合成生物學(xué):細(xì)胞間通訊的光遺傳法檢測2017/05/27
合成生物學(xué):細(xì)胞間通訊的光遺傳法檢測基因表達(dá)的時(shí)間控制對(duì)細(xì)胞功能和命運(yùn)起到至關(guān)重要的作用,一些基因,如Notch效應(yīng)子基因Hes1,就表現(xiàn)出了快速的mRNA合成后又基于負(fù)反饋信號(hào)后而降解的基因表達(dá)振蕩模式??茖W(xué)家利用光遺傳方法創(chuàng)造出具有快速時(shí)空精度的人工振蕩模式,并利用生物發(fā)光或熒光報(bào)告基因在單細(xì)胞水平進(jìn)行振蕩探測。然而,科學(xué)家目前尚不清楚這種震蕩信息是否可以傳遞給相鄰細(xì)胞。Isomura等(GenesDev,2017)研發(fā)出一種聯(lián)合光遺傳學(xué)和生物發(fā)光的方法來研究這種震蕩信息是否能在細(xì)胞間進(jìn)行傳
*多發(fā)性硬化癥血檢產(chǎn)品有望近期上市2017/05/22
過去二十年中,治療多發(fā)性硬化癥(MS)的醫(yī)療工具手段一直在跨越式發(fā)展,比如說,近期Ocrevus已經(jīng)獲得批準(zhǔn)用于治療該疾病zui嚴(yán)重的耐藥性形式。盡管取得了這樣令人矚目的成功,研究人員尚未充分了解多發(fā)性硬化癥的潛在疾病機(jī)制和觸發(fā)因素。特別是這些復(fù)雜因素使得針對(duì)該疾病的診斷成為一個(gè)挑戰(zhàn)。多發(fā)性硬化癥病人如果進(jìn)展得越久,未能獲得有效治療,那么他們體內(nèi)也會(huì)增添更多不可逆轉(zhuǎn)的神經(jīng)損傷。針對(duì)這一未滿足的醫(yī)療需求,位于美國田納西州Nashville的IQuity公司將于5月底推出針對(duì)MS的血液檢測。這項(xiàng)許可
優(yōu)于二甲雙胍的一類新型口服降糖藥即將面世2017/05/19
由阿德萊德大學(xué)領(lǐng)導(dǎo)的研究為治療2型糖尿病的更安全有效的藥物的產(chǎn)生以及減少副作用和注射胰島素的需要鋪平了道路。在“藥物化學(xué)雜志”和“BBA一般受試者”雜志上發(fā)表的兩項(xiàng)研究顯示出新的潛在抗糖尿病藥物在分子水平上如何與其靶物質(zhì)相互作用。這些新的潛在藥物具有與zui常規(guī)處方的抗糖尿病藥二甲雙胍具有*不同的作用(二甲雙胍作用于肝臟以降低葡萄糖產(chǎn)量),并且在降低血糖方面可能更有效。他們針對(duì)在全身脂肪組織中發(fā)現(xiàn)的稱為PPARγ的蛋白受體,使其全部或部分活化,以增加對(duì)胰島素的敏感性和改變脂肪和糖的代謝來降低血糖
關(guān)于HE染色法的具體操作步驟,你都知道哪些?2017/05/16
關(guān)于HE染色法的具體操作步驟,你都知道哪些?HE染色原理HE染色法為蘇木精-伊紅染色法,是石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,也是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中zui基礎(chǔ)、zui廣泛的技術(shù)方法。屬性為堿性的蘇木素染色液可以使細(xì)胞著藍(lán)色,為酸性的伊紅使細(xì)胞著紅色,其結(jié)果胞核呈藍(lán)色,胞漿呈紅色。兩種不同的染色液使細(xì)胞通過顏色來改變折光率,在光鏡下呈現(xiàn)出細(xì)胞圖像。HE染色法之所以成為細(xì)胞染色zui常用的方法是因?yàn)镠E染色法過程中除化學(xué)反應(yīng)外,還有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核漿對(duì)比染
糖尿病在研新藥 3 期臨床全面成功2017/05/15
今天,藥明康德合作伙伴LexiconPharmaceuticals公布了3期inTandem1研究中的積極數(shù)據(jù)。之前,該公司宣布兩種劑量的sotagliflozin均達(dá)到了inTandem1研究的主要終點(diǎn),數(shù)據(jù)顯示在優(yōu)化胰島素背景下,1型糖尿病患者24周時(shí)A1C有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著降低。此次,新的重要發(fā)現(xiàn)包括sotagliflozin對(duì)1型糖尿病患者體重的效益,以及針對(duì)1型糖尿病高血壓患者的收縮壓(SBP)改善。此外,Lexicon公司宣布研究達(dá)到了重要次要終點(diǎn),包括凈效益、推注胰島素使用、空腹血漿
標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法及基準(zhǔn)物質(zhì)2017/05/09
標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法及基準(zhǔn)物質(zhì)1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法及基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液是指已知準(zhǔn)確濃度的溶液,它是滴定分析中進(jìn)行定量計(jì)算的依據(jù)之一。不論采用何種滴定方法,都離不開標(biāo)準(zhǔn)溶液。因此,正確地配制標(biāo)準(zhǔn)溶液,確定其準(zhǔn)確濃度,妥善地貯存標(biāo)準(zhǔn)溶液,都關(guān)系到滴定分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法一般有以下兩種:1.1直接配制法用分析天平準(zhǔn)確地稱取一定量的物質(zhì),溶于適量水后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中,稀釋至標(biāo)線,定容并搖勻。根據(jù)溶質(zhì)的質(zhì)量和容量瓶的體積計(jì)算該溶液的準(zhǔn)確濃度。能用于直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的物質(zhì),稱為基準(zhǔn)物質(zhì)或基準(zhǔn)試劑
ELISA實(shí)驗(yàn)中的封閉液等常用試劑的配制2017/05/02
ELISA實(shí)驗(yàn)中的封閉液等常用試劑的配制elisa實(shí)驗(yàn)中的封閉液小知識(shí)ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn),蔗糖封閉的原理:1、ELISA實(shí)驗(yàn)中,蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護(hù)劑”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理;那一種更好需要你實(shí)驗(yàn)后來驗(yàn)證。但多數(shù)選擇前者。封閉劑還
免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法2017/04/25
免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法一、標(biāo)本制作可制作涂片、印片、細(xì)胞單層培養(yǎng)物、組織切片,經(jīng)適當(dāng)固定或不固定,作免疫熒光染色用。二、熒光抗體染色方法(一)直接法1.染色切片經(jīng)固定后,滴加經(jīng)稀釋至染色效價(jià)如1:8或1:16的熒光抗體(如兔抗人γ-球蛋白熒光抗體或兔抗人IgG或IgA熒光抗體等),在室溫或37℃染色30min,切片置入能保持潮濕的染色盒內(nèi),防止干燥。2.洗片傾去存留的熒光抗體,將切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗兩次,攪拌,每次5min,再用蒸餾水洗1min,除去
刀豆蛋白A(Con A)誘導(dǎo)的小鼠肝炎模型2017/04/19
刀豆蛋白A(ConA)誘導(dǎo)的小鼠肝炎模型刀豆蛋白A(ConA)是一種被廣泛應(yīng)用可活化T細(xì)胞的有絲分裂原,依賴于輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)及巨噬細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng),ConA活化T淋巴細(xì)胞,刺激Th細(xì)胞及巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α和IFNY等細(xì)胞因子。TNF-α可直接損傷肝細(xì)胞,導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡。ConA誘導(dǎo)的小鼠肝損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,其病理特點(diǎn)主要是通過活化T淋巴細(xì)胞而致免疫性肝損傷。ConA靜脈注射小鼠體內(nèi)后,大部分在肝臟內(nèi)聚集,表明肝臟是ConA體內(nèi)誘導(dǎo)毒性的靶器官。在病毒性肝炎的炎癥發(fā)生過程中,淋巴細(xì)胞介導(dǎo)
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