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愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司

9
  • 2024

    10-09

    細(xì)胞活性氧(ROS)檢測(cè)攻略

    活性氧(ROS)是細(xì)胞代謝的副產(chǎn)物,包括超氧陰離子自由基、過(guò)氧化氫、羥基自由基等。它們?cè)诩?xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中起作用,但過(guò)量產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷,并與多種疾病有關(guān)。目前針對(duì)ROS的檢測(cè)方法包括熒光染色法、化學(xué)發(fā)光法、電子順磁共振技術(shù)(EPR/ESR)、電化學(xué)生物傳感器、色譜法、分光光度法和基于熒光蛋白的方法(表1)。表1常用ROS的檢測(cè)方法ROS檢測(cè)方法方法描述熒光染色法使用特定的熒光探針如DCFH-DA,可以檢測(cè)多種ROS,探針本身無(wú)熒光,進(jìn)入細(xì)胞后被酯酶水解生成DCFH,隨后被ROS氧化生成具有熒光的
  • 2024

    09-30

    WB疑難雜癥——膜蛋白

    什么是膜蛋白?膜蛋白是細(xì)胞膜的重要組成部分,負(fù)責(zé)許多關(guān)鍵的生物學(xué)功能如物質(zhì)運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞間識(shí)別等,人類(lèi)基因組中編碼的膜蛋白約占總蛋白質(zhì)組的25%左右。它們可以根據(jù)其與膜的結(jié)合方式和功能特點(diǎn)被分為不同的類(lèi)別。以下是膜蛋白的一些主要類(lèi)型和功能:1、膜蛋白分類(lèi)外在膜蛋白:這些蛋白分布在細(xì)胞膜的內(nèi)外表面,約占膜蛋白的20%-30%,主要在內(nèi)表面。它們通過(guò)離子鍵、氫鍵與膜脂分子的極性頭部相結(jié)合,或通過(guò)與內(nèi)在蛋白的相互作用,間接與膜結(jié)合,大多是親水性蛋白,主要的類(lèi)型有酶類(lèi)、受體蛋白、細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白、
  • 2024

    09-29

    抗體/蛋白標(biāo)記染料選擇指南及常見(jiàn)問(wèn)題解答

    在當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,精準(zhǔn)、高效地識(shí)別和追蹤目標(biāo)分子是解鎖疾病機(jī)制、開(kāi)發(fā)新型藥物以及推動(dòng)個(gè)性化醫(yī)療的關(guān)鍵??贵w/蛋白標(biāo)記技術(shù)作為一種強(qiáng)大的工具,在這一過(guò)程中發(fā)揮著不可替代的作用。通過(guò)將特定的化學(xué)標(biāo)簽(如熒光染料、酶或放射性同位素)與抗體或蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合,研究人員能夠以更高的靈敏度和特異性對(duì)復(fù)雜生物系統(tǒng)中的目標(biāo)分子進(jìn)行可視化和定量分析。常見(jiàn)抗體/蛋白標(biāo)記技術(shù)熒光素標(biāo)記:使用熒光素如AlexaFluor系列(AF488\AF594\AF647等)、Cy系列(Cy3\Cy5\Cy7等)、FITC等與
  • 2024

    09-27

    答應(yīng)我,看完再做ELISA(下)

    小伙伴們?cè)谏掀獙W(xué)習(xí)了ELISA實(shí)驗(yàn)的原理、類(lèi)型,并且根據(jù)自己的需求選擇了適合自己的試劑盒,那接下來(lái)就是ELISA的實(shí)操了,包括哪些實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)呢?快來(lái)和小愛(ài)一探究竟吧!ELISA實(shí)驗(yàn)步驟圖1ELISA標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程1、樣本采集:a)血漿:采集血漿時(shí)可使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝血?jiǎng)?。采集?0min內(nèi),1000xg離心15min。立即檢測(cè)或分裝后于≤-20℃儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融。b)細(xì)胞培養(yǎng)上清液:通過(guò)離心去除顆粒,立即檢測(cè)或分裝后將樣品于≤-20°C儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融。c)細(xì)胞裂解液
  • 2024

    09-26

    答應(yīng)我,看完再做ELISA(上)

    作為常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)技能之一的ELISA已經(jīng)成功逼瘋了一大批研究生:加樣加到手抽筋,拍板拍到人發(fā)瘋。為此,小愛(ài)嘔心瀝血寫(xiě)了一份ELISA實(shí)驗(yàn)詳解,原理、步驟、注意事項(xiàng)一網(wǎng)打盡,幫助各位小伙伴快速入門(mén)并精通ELISA(分為上下兩篇噢)。ELISA實(shí)驗(yàn)原理酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA),是一種利用抗原抗體結(jié)合專(zhuān)一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法,是免疫學(xué)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法。ELISA可適用多種樣本類(lèi)型,主要包括血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清液、細(xì)胞
  • 2024

    09-25

    細(xì)胞凋亡常見(jiàn)7種檢測(cè)方法大匯合

    提到細(xì)胞凋亡,想必大家都不陌生,咱們這個(gè)領(lǐng)域的,先不說(shuō)本科的時(shí)候?qū)W過(guò),考研的時(shí)候怎么說(shuō)它也是重要考點(diǎn)之一?;蛟S此時(shí)您的腦袋瓜子里立馬浮現(xiàn)出課本上那個(gè)經(jīng)典的凋亡信號(hào)通路圖......額,還有點(diǎn)記不清......沒(méi)關(guān)系,今天小編帶您回顧一下經(jīng)典的細(xì)胞凋亡信號(hào)通路,再看看它常見(jiàn)的檢測(cè)方法?!罴?xì)胞凋亡1)細(xì)胞凋亡是一種細(xì)胞主動(dòng)有序的死亡,它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等作用,它并不是病理?xiàng)l件下自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為了更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡。2)細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)通路。凋亡信號(hào)通路
  • 2024

    09-24

    一文了解TR-FRET技術(shù)

    什么是TR-FRET?TR-FRET(Time-ResolvedFluorescenceResonanceEnergyTransfer,時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移)是一種用于研究分子間相互作用的生物物理技術(shù)。它結(jié)合了兩種技術(shù):熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)和時(shí)間分辨熒光(TRF,Time-ResolvedFluorescence)。熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理圖熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)是一種物理現(xiàn)象,其中一個(gè)熒光分子(供體)在吸收光能后,可以將激發(fā)能量非放射性地傳遞給另一個(gè)分子(受體),如果受體在空間上
  • 2024

    09-23

    怎么才能分清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR“四胞胎”呢?

    它們的概念分別是什么?PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR這四種技術(shù)都是基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的技術(shù),但是它們之間存在一些區(qū)別。PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外擴(kuò)增DNA分子的技術(shù),利用DNA聚合酶和多個(gè)引物在所需溫度下擴(kuò)增目標(biāo)DNA分子。PCR反應(yīng)分為三個(gè)階段:預(yù)變性、變性-退火-延伸和延伸。PCR技術(shù)主要用于DNA序列的擴(kuò)增和檢測(cè),應(yīng)用廣泛,如基因克隆、DNA序列測(cè)定等。qPCR:實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)是一種實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR過(guò)程中熒光信號(hào)變化的技術(shù),可以定
  • 2024

    09-20

    HRP酶標(biāo)二抗和熒光二抗有什么區(qū)別?分別在什么時(shí)候用?

    在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,二抗的選擇至關(guān)重要。其中,HRP酶標(biāo)二抗和熒光二抗是兩種常見(jiàn)的二抗類(lèi)型,它們各具特色,并在不同的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景下發(fā)揮著關(guān)鍵作用。一、HRP酶標(biāo)二抗1.定義及特性HRP酶標(biāo)二抗,即辣根過(guò)氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)標(biāo)記的二抗,是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常規(guī)用的二抗。其特點(diǎn)包括比活性高、穩(wěn)定性好、分子量小、純酶容易制備等,因此在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。2.應(yīng)用場(chǎng)景HRP酶標(biāo)二抗常用于如免疫印跡(WB)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)以及免疫組織化學(xué)(IHC)等實(shí)驗(yàn)。在這些
  • 2024

    09-19

    從零開(kāi)始-細(xì)胞培養(yǎng)入門(mén)指南

    細(xì)胞是生命的基本單位,是生物學(xué)研究中非常有用的工具。細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程就是人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境,置于無(wú)菌、適宜溫度及酸堿度的環(huán)境中,保證充足的營(yíng)養(yǎng)使其不斷生長(zhǎng)繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能。作為基礎(chǔ)又常規(guī)的實(shí)驗(yàn)技能,自然頗受關(guān)注。后續(xù)會(huì)創(chuàng)建《常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)攻略》系列,會(huì)為大家介紹一些常見(jiàn)細(xì)胞的培養(yǎng)方案,包括但不限于T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、干細(xì)胞培養(yǎng)等。今天主要是細(xì)胞培養(yǎng)入門(mén)指南的相關(guān)內(nèi)容,其他的內(nèi)容大家可以持續(xù)關(guān)注追更。1.細(xì)胞類(lèi)型1)原代細(xì)胞(primarycell):是指從機(jī)體的組織經(jīng)蛋
  • 2024

    09-19

    精準(zhǔn)成像,多色揭密:深度優(yōu)化mIHC染料搭配

    在當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)技術(shù)正變得越來(lái)越重要。這項(xiàng)技術(shù)能夠在單一組織切片上同時(shí)檢測(cè)多種蛋白質(zhì),為我們提供了一個(gè)強(qiáng)大的工具,以揭示細(xì)胞和組織內(nèi)部復(fù)雜的生物學(xué)信息。隨著多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的不斷發(fā)展,越來(lái)越多老師希望在自己的片子上看到更豐富的靶標(biāo)信息,意味著我們需要用到更多種熒光染料去完成染色,但由于熒光染料產(chǎn)生的信號(hào)不是單純的線性,而是呈現(xiàn)山峰狀的分布,在最高點(diǎn)信號(hào)固然最好,但在最高點(diǎn)左右的一段范圍內(nèi)都能夠捕獲到它的信號(hào),那么相鄰的染料之間,難免會(huì)有信號(hào)的重疊,導(dǎo)致最后
  • 2024

    09-18

    人正常皮膚類(lèi)器官培養(yǎng)攻略

    流程類(lèi)器官原代培養(yǎng)流程準(zhǔn)備工作1、儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、臺(tái)式冷凍離心機(jī)、水浴鍋(abs72023)或水浴搖床,醫(yī)用冰箱、-80℃冰箱、移液器(一套)、眼科剪刀、眼科鑷。2、試劑耗材貨號(hào)品名規(guī)格儲(chǔ)存條件abs9932人正常皮膚類(lèi)器官培養(yǎng)基100mL2-8℃,3個(gè)月abs9931類(lèi)器官人正常皮膚原代組織消化液10mL-20℃,避免反復(fù)凍融,6個(gè)月;2-8℃,避光保存,6個(gè)月abs9751PBS-BSA潤(rùn)洗液100mL-20℃,有效期12個(gè)月abs9731類(lèi)器官原代培養(yǎng)緩沖
  • 2024

    09-14

    HEK293細(xì)胞系培養(yǎng)攻略

    HEK293細(xì)胞系家族歷史概覽1973年科學(xué)家從一個(gè)父母譜系不祥的人類(lèi)流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的人胚腎細(xì)胞,即293細(xì)胞(humanembryonickidney(HEK)293cellline),該細(xì)胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段,一開(kāi)始轉(zhuǎn)化非常困難,一直到幾個(gè)月后,科學(xué)家得到一個(gè)穩(wěn)定的可以快速生長(zhǎng)的293單克隆細(xì)胞株,自此HEK293誕生。HEK293細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物技術(shù)中的應(yīng)用頻率僅次于第一個(gè)人類(lèi)細(xì)胞系HeLa,并衍生出數(shù)百種克隆細(xì)胞系。SV40largeT抗原穩(wěn)轉(zhuǎn)入HEK
  • 2024

    09-13

    細(xì)胞消化液:原理、配方與實(shí)驗(yàn)操作指南

    細(xì)胞消化液是細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵工具,其原理主要通過(guò)酶解作用破壞細(xì)胞間的連接,使細(xì)胞從組織或培養(yǎng)基質(zhì)上分離成單個(gè)細(xì)胞,以便進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。常用的細(xì)胞消化液包括胰蛋白酶、EDTA和膠原酶等,它們能夠特異性地水解細(xì)胞表面的蛋白質(zhì),包括細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、纖維連接蛋白等,從而改變細(xì)胞間的連接狀態(tài)。配方方面,細(xì)胞消化液的配制需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確稱(chēng)取適量的酶粉,并加入適當(dāng)?shù)木彌_液(如D-Hanks液)中,調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍(通常為7.2-7.4),以確保酶的最佳活性。同時(shí),還需注意無(wú)菌操作,避免細(xì)菌污
  • 2024

    09-13

    免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之?dāng)U增&培養(yǎng)(四)

    概述免疫細(xì)胞培養(yǎng)的六個(gè)基本流程:樣本制備、細(xì)胞分選、分型鑒定、擴(kuò)增&培養(yǎng)、質(zhì)量?jī)?yōu)化、后續(xù)研究。小愛(ài)已經(jīng)給大家詳細(xì)介紹了《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之樣本制備(一)》和《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之細(xì)胞分選(二)》,《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定(三)》今天我們繼續(xù)一起學(xué)習(xí)擴(kuò)增&培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。從樣本制備到細(xì)胞分選、分型鑒定,我們終于獲得了純度高、活性好的目的細(xì)胞之后,便需要在體外人工模擬其在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,同時(shí)保證無(wú)菌、適宜的溫度和pH,給予免疫細(xì)胞充足的營(yíng)養(yǎng)使其不斷生長(zhǎng)繁殖,這個(gè)過(guò)程便是擴(kuò)增&培養(yǎng),主要可分為培養(yǎng)體
  • 2024

    09-11

    細(xì)胞活性檢測(cè) | 揭秘細(xì)胞活力的六大常用方法

    在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中,細(xì)胞活性檢測(cè)扮演著至關(guān)重要的角色。它不僅幫助科學(xué)家們?cè)u(píng)估細(xì)胞的生存狀態(tài),還能深入了解細(xì)胞對(duì)藥物、環(huán)境變化或病理過(guò)程的響應(yīng)。細(xì)胞活性檢測(cè)通常包括測(cè)量細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和細(xì)胞死亡等方面。今天,小愛(ài)向大家介紹細(xì)胞活性檢測(cè)的六大常用方法:ATP生物發(fā)光法、LDH檢測(cè)法、MTT比色法、CCK-8法、熒光染料法和細(xì)胞凋亡檢測(cè)法,一起揭秘細(xì)胞活力的科學(xué)奧秘。1、ATP生物發(fā)光法細(xì)胞內(nèi)ATP(腺苷三磷酸)的含量是細(xì)胞能量代謝的直接指標(biāo)。ATP生物發(fā)光法通過(guò)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)ATP的水平來(lái)評(píng)估
  • 2024

    09-10

    三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)TLS在癌癥中的應(yīng)用

    TLS三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)作為現(xiàn)在很熱門(mén)的研究領(lǐng)域,小愛(ài)今天來(lái)解讀一篇發(fā)表在Science的綜述;三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)在癌癥的研究《Tertiarylymphoidstructuresincancer》這張圖片提供了一個(gè)關(guān)于三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)(TertiaryLymphoidStructures,TLS)在癌癥中的不同狀態(tài)的概覽。它從幾個(gè)關(guān)鍵方面對(duì)TLS進(jìn)行了分類(lèi)和描述:1、位置(Localization):-Peritumoral:指腫瘤周?chē)腡LS,它們位于腫瘤邊緣。-Intratumoral:指腫瘤內(nèi)部的TLS
  • 2024

    09-09

    染色質(zhì)免疫沉淀法(ChIP)手冊(cè)(一)

    1、什么是CHIP、CHIP研究什么?CHIP全稱(chēng)染色質(zhì)免疫沉淀法,是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。它可以用來(lái)檢測(cè)特定的蛋白質(zhì)-DNA相互作用,如組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等與基因組特定區(qū)域的結(jié)合情況。ChIP技術(shù)可以幫助研究者了解細(xì)胞或組織中的基因表達(dá)和調(diào)控機(jī)制。圖1組蛋白八聚體*名詞解釋組蛋白:真核生物細(xì)胞核中的一種堿性蛋白質(zhì),它們的主要功能是幫助DNA分子的壓縮和組織,使其能夠適應(yīng)細(xì)胞核內(nèi)有限的空間。組蛋白與DNA一起構(gòu)成了染色體的基本結(jié)構(gòu)單元,稱(chēng)為核小體。轉(zhuǎn)錄因子:是一類(lèi)蛋白質(zhì),它
  • 2024

    09-04

    甄選耗材 | 生物分析實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)孔板

    在科學(xué)研究的漫長(zhǎng)征途中,每一個(gè)細(xì)節(jié)都可能影響實(shí)驗(yàn)的成敗。而實(shí)驗(yàn)室耗材,作為實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常用的工具,其質(zhì)量與性能直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率。愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司擁有超200種的實(shí)驗(yàn)耗材產(chǎn)品,均采用優(yōu)質(zhì)材料制成,覆蓋了生化實(shí)驗(yàn)室常用耗材。如微孔板、深孔板、平底發(fā)光板、酶標(biāo)板、PCR板、吸頭、吸管、離心管、PCR管、流式管、磁珠、儲(chǔ)液槽、細(xì)胞培養(yǎng)皿、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞篩網(wǎng)、細(xì)胞爬片等。一、均相檢測(cè)微孔板微孔板(96孔板,白色,淺孔)(abs7308)產(chǎn)品特點(diǎn):該產(chǎn)品采用優(yōu)質(zhì)的聚苯乙
  • 2024

    09-03

    CoIP實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題

    免疫(共)沉淀(IP/CoIP)是基于抗體和蛋白的特異性親和作用,通過(guò)捕獲與蛋白或抗原特異性結(jié)合的抗體,進(jìn)而從復(fù)雜的樣品中捕獲及富集目標(biāo)蛋白,同時(shí)可以測(cè)定與之相互作用的蛋白或其它生物大分子。CoIP原理圖CoIP實(shí)驗(yàn)對(duì)照的設(shè)置方法常見(jiàn)的主要有三種方式:1)第一種是實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染誘餌蛋白和標(biāo)簽蛋白,對(duì)照組只轉(zhuǎn)染標(biāo)簽蛋白,這種方法不僅可以提高誘餌蛋白的表達(dá)量,增加實(shí)驗(yàn)的成功率,而且標(biāo)簽抗體的成本低,親和力強(qiáng),但是畢竟不是本身生理狀態(tài)下的表達(dá)量,和實(shí)際結(jié)果可能有出入,而且需要構(gòu)建載體,更適用于誘餌蛋白表達(dá)
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