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2024
08-29

實驗操作 | 免疫組化(IHC)操作步驟+注意事項！
大家好！今天我們來聊聊免疫組化(IHC)實驗的操作流程。IHC是一個超級強大的技術(shù)，能夠讓你在組織切片中找到特定的蛋白質(zhì)。跟我來，我們一步步搞定它，讓實驗變得輕松愉快！IHC實驗流程：通常包括樣本固定、包埋、切片、脫蠟水化、抗原修復、滅活、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色、復染、封片觀察12個部分。1、樣本固定目的：確保組織樣本的質(zhì)量和完整性，為后續(xù)的免疫染色打下堅實基礎。操作步驟：1）取材：從動物或人體取得所需的組織樣本。對于組織塊，要確保其大小適中，不宜過大，以便于固定液能夠充分滲透；2）初步
2024
08-27

LncRNA數(shù)據(jù)深度挖掘工具（二）
RIP(RNAImmunoprecipitation)和RNApull-down等實驗技術(shù)是我們深入研究RNA和蛋白質(zhì)相互作用的關鍵工具。RIP運用目標蛋白的特異性抗體分離純化與蛋白相互作用的RNA，RNApull-down通過RNA探針捕獲與之相互作用蛋白質(zhì)。上文我們詳細了解了RIP技術(shù)，今天帶大家了解一下RNApull-down技術(shù)。RNApull-downRNApull-down是研究細胞內(nèi)RNA與蛋白/RNA結(jié)合情況的技術(shù)。先將RNA進行標記（如生物素標記），再與細胞裂解液共同孵育，從而
2024
08-26

如何評估類器官免疫共培養(yǎng)殺傷效果
概述類器官免疫共培養(yǎng)是一種先進的研究手段，它結(jié)合了3D的類器官培養(yǎng)技術(shù)和免疫細胞，以模擬體內(nèi)微環(huán)境并研究細胞間的相互作用。這種共培養(yǎng)策略已被廣泛應用于疾病建模、藥物篩選、個性化治療、炎癥機制研究、腫瘤免疫相互作用研究以及上皮-免疫細胞相互作用的研究。那么，如何評估類器官免疫共培養(yǎng)殺傷效果？小愛從免疫共培養(yǎng)方法和殺傷效果檢測方法兩方面給大家介紹一下。免疫共培養(yǎng)方法一、PBMC制備1、實驗前準備試劑提前1h準備：人淋巴細胞分離液(abs930)提前1h取出，在室溫充分平衡并顛倒混勻。2、外周血梯度密
2024
08-21

多重熒光免疫組化 | T細胞分型
在免疫組化研究中，通過使用針對這些標志物的特異性抗體，可以對T細胞的不同亞群進行鑒定和分析。這有助于研究T細胞在免疫反應中的作用，特別是在腫瘤免疫微環(huán)境中的功能。接下來就和小愛一起來了解一下T細胞的分型~一、T細胞背景介紹T細胞是一群起源于骨髓，成熟于胸腺，在外周免疫器官組織活化，在血液、淋巴循環(huán)，在病變部位發(fā)揮效應的異質(zhì)性細胞。T細胞不產(chǎn)生抗體，而是直接通過抗原特異性受體識別病原體。T細胞在胸腺中分化并作為CD4+輔助T細胞或CD8+細胞毒性T細胞協(xié)調(diào)免疫反應。T細胞主要從兩方面為免疫反應做出
2024
08-19

植物血凝素的生物學功能與應用指南
產(chǎn)品介紹：植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)是指從紅蕓豆(PhaseolusVulgaris)中提取的一種菜豆類凝集素。它是由4個亞基通過非共價鍵結(jié)合形成的四聚體糖蛋白，包含兩種亞基分子，L亞基（白細胞凝集素）和E（紅細胞凝集素），含有5種異構(gòu)體（L4，L3E1，L2E2，L1E3和E4）。L亞基具有白細胞凝集和高促有絲分裂活性；E亞基具有高紅細胞凝集和低促有絲分裂活性。根據(jù)不同的亞基組成，PHA可以分為幾種不同的形式，主要包括PHA-L、PHA-E、PHA-P和PHA-
2024
08-17

科研與臨床的得力助手——總RNA抽提試劑盒的應用與優(yōu)勢
在分子生物學和生物醫(yī)學研究領域，RNA的抽提與分析是重要的一環(huán)?？俁NA，作為細胞內(nèi)所有RNA的混合體，包括mRNA、rRNA、tRNA等，其抽提質(zhì)量直接影響著后續(xù)實驗的準確性與可靠性?？俁NA抽提試劑盒，作為一種高效、便捷的工具，為科研人員和臨床工作者提供了強有力的支持。一、總RNA抽提試劑盒的原理與組成總RNA抽提試劑盒通?；诜?氯仿抽提或柱純化技術(shù)。酚/氯仿抽提利用RNA在酚/氯仿中的不溶解性，通過離心將RNA與細胞碎片、蛋白質(zhì)等分離；而柱純化技術(shù)則利用特異性吸附柱，結(jié)合特定的緩沖液系統(tǒng)
2024
08-15

DAPI染色液：細胞核標記的關鍵工具
在細胞生物學和組織學研究中，DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole）染色液是一種廣泛使用的熒光染料，主要用于細胞核的標記和觀察。DAPI能夠結(jié)合到細胞核的DNA中，通過熒光顯微鏡可以清晰地顯示出細胞核的位置和形態(tài)。本文將深入探討DAPI染色液的特性、應用領域、操作步驟以及其在現(xiàn)代生物學研究中的重要性。DAPI是一種藍色熒光染料，能夠特異性地與DNA結(jié)合。它的熒光特性源自于其與DNA的結(jié)合形成的復合物。在紫外光或近紫外光的激發(fā)下，DAPI發(fā)出藍色熒光，這使得細胞核在熒
2024
08-13

細胞培養(yǎng)皿在生物制藥領域的應用與挑戰(zhàn)
細胞培養(yǎng)皿在生物制藥領域扮演著至關重要的角色，其應用廣泛且深入，但同時也面臨著一些挑戰(zhàn)。應用生物制藥產(chǎn)品生產(chǎn)：細胞培養(yǎng)皿作為細胞培養(yǎng)的基礎工具，被廣泛用于生產(chǎn)各種生物制藥產(chǎn)品，如蛋白質(zhì)藥物、抗體藥物和疫苗等。通過精確的細胞培養(yǎng)控制，可以在培養(yǎng)皿中實現(xiàn)細胞的高效增殖和目標產(chǎn)物的分泌。藥物篩選與研發(fā)：在藥物研發(fā)過程中，細胞培養(yǎng)皿被用于體外模擬疾病環(huán)境，以評估候選藥物對細胞的影響和療效。這有助于快速篩選出具有潛力的藥物分子，加速新藥的開發(fā)進程。生物治療技術(shù)：隨著細胞治療和基因治療技術(shù)的興起，細胞培養(yǎng)皿
2024
08-12

藥效評價生化分析：精準把脈藥物作用
在藥物研發(fā)的征途中，藥效評價是確保新藥安全、有效的關鍵步驟。生化分析作為這一過程中的重要工具，無論是在體外的細胞實驗還是體內(nèi)的動物模型中，都扮演著至關重要的角色。體外實驗可以提供精確控制的環(huán)境，讓研究人員能夠細致觀察藥物對細胞的直接影響。通過生化分析，可以測定藥物對細胞增殖、凋亡的影響，評估其對特定信號通路的調(diào)控作用，以及對細胞因子釋放的改變。體內(nèi)藥效評價則將我們帶入一個更為復雜的生物體內(nèi)環(huán)境。生化分析在這一階段幫助研究人員理解藥物在活體內(nèi)的分布、代謝和排泄過程。通過檢測血清中的生化指標，可以評
2024
08-08

多能干誘導神經(jīng)干分化全攻略
在生命的宏偉藍圖中，干細胞扮演著“萬能建筑師”的角色，它們具有自我更新和分化成多種類型細胞的能力。而人多能干細胞，作為干細胞家族中比較出色的，更是蘊含著無限可能，能夠分化為人體幾乎所有的細胞類型，包括神經(jīng)細胞。這一特性，讓科學家們看到了治療因神經(jīng)元損失或損傷導致的疾?。ㄈ缗两鹕?、阿爾茨海默病、脊髓損傷等）的曙光。然而，要實現(xiàn)這一目標，關鍵在于找到一種高效、穩(wěn)定且安全的方法，引導人多能干細胞定向分化為神經(jīng)干細胞(NSCs)，進而發(fā)育成具有特定功能的神經(jīng)元或膠質(zhì)細胞。正是基于這一需求，神經(jīng)誘導培養(yǎng)
2024
08-06

LncRNA數(shù)據(jù)深度挖掘工具——RIP技術(shù)
長鏈非編碼RNA(Longnon-codingRNA，lncRNA)是長度大于200個核苷酸的RNA分子，通常不編碼蛋白，而是以RNA的形式在表觀遺傳調(diào)控、細胞周期調(diào)控和細胞分化調(diào)控等眾多生命活動中發(fā)揮重要作用，成為遺傳學研究熱點。圖1LncRNAs作用機制一般來說，非編碼RNA功能研究的主線包含3個主要步驟：高通量篩選：對收集的樣本進行分組，采用高通量測序技術(shù)（如RNA-Seq）和相應的特異性數(shù)據(jù)庫進行高通量篩選，通過對轉(zhuǎn)錄本編碼潛能進行篩選，判斷其是否具有編碼潛能，從而可以判定該轉(zhuǎn)錄本是否為
2024
08-05

探索腫瘤微環(huán)境中的免疫堡壘：三級淋巴結(jié)構(gòu)TLS的研究應用
在癌癥的復雜世界中，免疫系統(tǒng)與腫瘤細胞之間的斗爭是一場精細而微妙的戰(zhàn)爭。近年來，科學家們發(fā)現(xiàn)，在腫瘤微環(huán)境中，一種特殊的免疫結(jié)構(gòu)——三級淋巴結(jié)構(gòu)(TertiaryLymphoidStructures,TLS)在這場戰(zhàn)爭中扮演著至關重要的角色。本文將帶您深入了解TLS的神秘面紗，以及它在癌癥治療中的研究應用。什么是TLS？TLS是腫瘤組織內(nèi)部自發(fā)形成的類似淋巴組織的免疫結(jié)構(gòu)，它們在腫瘤微環(huán)境中充當局部免疫反應的熱點。TLS由多種免疫細胞組成，包括T細胞、B細胞、樹突狀細胞等，它們共同協(xié)作，對腫瘤細
2024
07-29

免疫細胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定
概述免疫細胞培養(yǎng)的六個基本流程：樣本制備、細胞分選、分型鑒定、擴增&培養(yǎng)、質(zhì)量優(yōu)化、后續(xù)研究。小愛已經(jīng)給大家詳細介紹了《免疫細胞培養(yǎng)通關技巧之樣本制備》和《免疫細胞培養(yǎng)通關技巧之細胞分選》，今天我們繼續(xù)一起學習分型鑒定的相關內(nèi)容。分型鑒定(Phenotyping)：利用細胞表面標記物進行細胞鑒定，目前常用的方法是流式細胞術(shù)。如果我們利用流式分選得到目的細胞，一般來說，分選后需要回測細胞進行目的細胞的純度驗證，即分型鑒定，也就是說流式分選后目的細胞的分型鑒定與分選所用的細胞標記物基本相同。如果我們
2024
07-25

解鎖蛋白質(zhì)的秘密：蛋白信息查詢工具與使用指南
在生物醫(yī)學研究的廣闊領域中，蛋白質(zhì)扮演著至關重要的角色。它們不僅是細胞的主要構(gòu)成成分，還參與了幾乎所有的生物化學過程。了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能及其相互作用對于疾病機理的解析、藥物靶點的發(fā)現(xiàn)以及生物技術(shù)的應用至關重要。本文將為您介紹一系列蛋白信息查詢工具，并提供詳盡的使用指南，幫助您輕松解鎖蛋白質(zhì)的深層信息。市面上存在多種蛋白信息查詢工具，它們各有千秋，服務于不同的研究需求。以下是幾個廣泛使用的數(shù)據(jù)庫：1、UniProt：查詢蛋白定位、修飾、分子量等基本信息，查詢蛋白序列，查找同源性高的蛋白；2、T
2024
07-22

外泌體研究解決方案
背景介紹外泌體(exosomes)是一類由細胞分泌到胞外的囊泡，最早由Pan和Johnstone在綿羊網(wǎng)織紅細胞中發(fā)現(xiàn)并命名。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)包括血細胞、免疫細胞、癌細胞、干細胞等在內(nèi)的幾乎所有細胞都可以產(chǎn)生外泌體，所產(chǎn)生的外泌體不僅存在于細胞培養(yǎng)液中，也存在于血液、尿液、母乳、唾液、胸腔積液等體液中。外泌體可攜帶供體細胞中的一些物質(zhì)，被認為是細胞間通訊和物質(zhì)交換的重要載體，可通過直接或間接的形式調(diào)控細胞的功能和生物學行為。研究表明，外泌體參與腫瘤疾病的發(fā)展進程，可作為腫瘤的無創(chuàng)液體活檢
2024
07-15

雞胚提取物的科學探索與應用
在現(xiàn)代生物科技領域，雞胚提取物因其生物學特性和廣泛的應用前景而備受矚目。這種提取物不僅在科學研究中顯示出重要的價值，也在醫(yī)療和美容行業(yè)中發(fā)揮著關鍵作用。雞胚提取物是從孵化幾天后的雞蛋中提取的液體成分，它含有豐富的生物活性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、酶、激素及多種生長因子。這些成分使得雞胚提取物在細胞生長和組織修復方面具有潛在的促進作用。從科研角度來看，雞胚提取物作為一種研究工具，被廣泛用于發(fā)育生物學和疾病模型的研究?？茖W家們利用其富含的生長因子來研究細胞分化、遷移以及器官形成過程。此外，通過觀察提取物對不同
2024
07-12

免疫細胞培養(yǎng)攻略之細胞分選
概述免疫細胞培養(yǎng)的六個基本流程：樣本制備、細胞分選、分型鑒定、擴增&培養(yǎng)、質(zhì)量優(yōu)化、后續(xù)研究。小愛給大家詳細分享了《免疫細胞培養(yǎng)攻略之樣本制備（一）》，今天繼續(xù)通關第二關：細胞分選。細胞分選(CellSorting)：根據(jù)細胞所具有的特性把某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術(shù)，它是對某一特定細胞進行生化分析和功能分析的前提和基礎。在進行細胞分選前，我們要明確目的細胞占比、標記物、選擇何種分選方法。目的細胞占比：不僅涉及到樣本的選擇，也關乎我們是否進行樣本的預富集，這部分內(nèi)容我們
2024
07-12

外泌體RNA提取試劑盒的技術(shù)原理與應用探討
外泌體RNA提取試劑盒的技術(shù)原理主要基于外泌體的膜結(jié)構(gòu)特性以及先進的分子生物學技術(shù)。外泌體作為細胞間信息傳遞的重要載體，其內(nèi)部包裹著豐富的RNA分子，這些RNA分子在疾病診斷、生物標志物發(fā)現(xiàn)等領域具有巨大的潛力。技術(shù)原理上，外泌體RNA提取試劑盒通常包含預處理試劑、提取試劑、分離膜以及檢測試劑等關鍵組分。首先，通過預處理試劑對生物樣本進行前處理，以去除雜質(zhì)和干擾物質(zhì)，確保外泌體的有效提取。隨后，利用提取試劑中的特殊材料（如磁珠、硅膠等）與外泌體膜蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，形成復合物。這些復合物在磁力或
2024
07-11

探秘生命之源：牛垂體提取物的科學之旅
在生命的宏偉畫卷中，每一個細胞、每一滴血液都承載著復雜的生物學密碼。而在這眾多的生物分子中，牛垂體提取物以其生理活性，成為了科學家們探索生命奧秘的一把鑰匙。今天，讓我們一起走進這個神秘而又充滿活力的領域，揭開牛垂體提取物的面紗。一、垂體的奧秘與重要性垂體，這個位于大腦底部的小小腺體，被譽為“主腺”，因為它分泌的激素直接或間接地影響著身體的每一個角落。垂體分為前葉和后葉，其中前葉分泌的生長激素、促甲狀腺激素、促腎上腺皮質(zhì)激素等，對于調(diào)節(jié)生長發(fā)育、新陳代謝、應激反應等方面起著至關重要的作用。二、牛垂
2024
07-09

IHC實驗難題破解：常見問題與應對策略
免疫組化(IHC)是一種用于檢測組織或細胞中特定蛋白質(zhì)表達的實驗技術(shù)。這項技術(shù)在醫(yī)學研究和診斷中非常重要，但實驗過程中可能會遇到一些問題。讓小愛帶你來看看常見問題的應對策略吧~無染色1、一抗和二抗不兼容-使用抗一抗種屬來源的二抗（例如，如果一抗是兔來源的，則使用抗兔的二抗）。確認二抗是否識別一抗的亞型。2、沒有足夠的一抗與目的蛋白結(jié)合-使用更高濃度的抗體。-4℃下長時間孵育（如過夜孵育）。3、抗體可能不適用于IHC，因為其可能無法識別蛋白的天然(3D)形式-查看抗體使用說明書，確認抗體是否經(jīng)過I

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