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抗體的免疫學(xué)五大功能2021/09/24: 1、中和（Neutralization）這是抗體最基本的功能?？贵w的中和指的是抗體和抗原結(jié)合后，抗原失去原有的功能。比如病毒的糖蛋白無法和細(xì)胞受體結(jié)合，酶無法進(jìn)行催化，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白無法轉(zhuǎn)運(yùn)等等。中和是抗體自身的功能，僅由抗體的分子結(jié)構(gòu)決定，不需要免疫系統(tǒng)的其它部分參與。2、凝集（Agglutination）抗原和抗體結(jié)合后會(huì)凝集成一團(tuán)，失去行動(dòng)力，有利于免疫系統(tǒng)的清除。3、調(diào)理（Opsonization）抗體和抗原結(jié)合會(huì)促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)抗原的吞噬。由于細(xì)胞膜帶負(fù)電會(huì)互相排斥，被抗體覆蓋的細(xì)菌或細(xì)胞更易

探討熒光定量PCR中的Ct值2021/09/15: 熒光定量PCR（qPCR）是目前病原檢測(cè)領(lǐng)域使用最為廣泛的核酸檢測(cè)方法（PCR檢測(cè)技術(shù)概述）。尤其是非洲豬瘟發(fā)生后，qPCR檢測(cè)得到了極大的普及，對(duì)于剛剛進(jìn)入qPCR檢測(cè)領(lǐng)域的人，很容易鉆入了“唯Ct值”的牛角尖，今天我們就聊聊qPCR中的Ct值。一、Ct值的基本概念1、什么是Ct值閾值循環(huán)數(shù)Thresholdcycle(Ct)也寫作Cq值，熒光信號(hào)大于熒光閾值時(shí)PCR循環(huán)數(shù)。儀器軟件通常將第3-15個(gè)循環(huán)的熒光值設(shè)為基線（baseline），是由于測(cè)量的偶然誤差引起的。閾值（threshold

實(shí)驗(yàn)室酶聯(lián)免疫技術(shù)的質(zhì)量控制要點(diǎn)2021/09/07: 實(shí)驗(yàn)室酶聯(lián)免疫技術(shù)的質(zhì)量控制：1.測(cè)定模式的影響ELISA測(cè)定模式包括：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法因受操作時(shí)差所引起的bu公平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。2.ELISA試劑的準(zhǔn)備不同批次的試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對(duì)

單克隆抗體與多克隆抗體的區(qū)別2021/09/02: 克?。褐笩o性繁殖細(xì)胞系，是由單一的祖先細(xì)胞分裂繁殖而形成的一簇細(xì)胞純系。在這個(gè)家族的所有成員中，如無突變發(fā)生，基因是*相同的。單克隆抗體（monoclonalantibodies,mAb）：由一個(gè)識(shí)別一種抗原表位的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體。高度均一、特異性強(qiáng)、效價(jià)高、少或無交叉反應(yīng)性。多克隆抗體（polyclonalantibody,pAb）：用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動(dòng)物，可刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物。多克隆抗體與

培養(yǎng)基制備常用的8個(gè)步驟過程2021/08/25: 培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長(zhǎng)因子。培養(yǎng)基的制備程序不同類型培養(yǎng)基制備的程序也不盡相同。但一般培養(yǎng)基的程序主要可分為：配料、溶化、矯正pH、澄清過濾、分裝、滅菌及檢定等8個(gè)步驟。1，配料：按培養(yǎng)基處方準(zhǔn)確稱取各種成分，先在三角燒瓶中加入少量蒸餾水，再加入各種成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水沖洗瓶壁。

?ATCC菌種四種的保存方法2021/08/19: 1、傳代保存法有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時(shí)，會(huì)很快死亡，因此在這種情況下，只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行ATCC菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存，它是基本的微生物保存法，例如酸奶等常用菌種的保存。傳代保存時(shí)，培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸ATCC菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。一般地，大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好，像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以使用3

血清的五大主要功能2021/08/03: 血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子

流式抗體保存注意事項(xiàng)2021/07/28: 1.流式抗體應(yīng)該如何保存？流式抗體一般都是直接帶熒光標(biāo)記的，一般情況下4°C避光可以保存一年，勿-20°C保存，熒光基團(tuán)在反復(fù)凍融之后會(huì)從抗體上脫落。2.流式抗體過了一年還能用嗎？一般來說，流式抗體還是比較穩(wěn)定的，如果說明書上寫4°C避光可以保存一年，大部分情況下，過了一年還是可以使用的，有些流式抗體甚至可以4°C避光保存2-3年。3.不能及時(shí)檢測(cè)的樣本應(yīng)該如何保存？流式實(shí)驗(yàn)建議是用新鮮細(xì)胞做，樣本如果不能及時(shí)上機(jī)檢測(cè)，可以在得到單細(xì)胞懸液后就立即放到4°C冰箱中，到第二天早上做流式，或嘗試抗體

介紹按用途分類的三種培養(yǎng)基2021/07/21: 根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分，可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。一、選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長(zhǎng)；而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長(zhǎng)；結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。二、增殖培養(yǎng)基在自然界中，不同種的微生物常生活在一起，為了分離我們所需要的微生物，在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質(zhì)，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基

生物素標(biāo)記實(shí)驗(yàn)指南2021/07/14: 生物素標(biāo)記反應(yīng)原理：NH2-ReactiveBiotin專一的與伯胺反應(yīng)（N-末端及賴氨酸殘基側(cè)鏈）形成穩(wěn)定的酰胺鍵一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：仔細(xì)閱讀使用說明書。計(jì)算待使用NH2-ReactiveBiotin的量。1.提前20min從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫（注：不需要用到的NH2-ReactiveBiotin繼續(xù)放置冰箱中）。2.溶解NH2-ReactiveBiotin：加入30μLDMF至NH2-ReactiveBiotin瓶中，靜置10min，待其充分溶解，此時(shí)生物素的濃度為10mM。二、操作步

牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)說明2021/07/07: 牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)說明需要自備的器材：1．方法儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光PCR擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20℃冰箱、可調(diào)移液器（2µL、20µL、200µL、1000µL）。2．耗材：熒光PCR專用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5mL經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水處理的滅菌離心管、吸頭（10µL、200µL、1000µL）、滅菌雙蒸水。樣本采集、存放及運(yùn)輸：1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存

介紹生物素親和素ELISA系統(tǒng)2021/07/01: 生物素親和素(又稱抗生物素)系統(tǒng)(biotinavidinsystem,BAS)標(biāo)記抗體的技術(shù)是20世紀(jì)70年代后期發(fā)展起來的一種新的免疫檢測(cè)方法。由于親和素與生物素間的親和力*，結(jié)合迅速，且極其穩(wěn)定，生物素標(biāo)記抗體和酶的標(biāo)記率高，又不影響蛋白的活性，使BAS標(biāo)記技術(shù)比常規(guī)酶聯(lián)免疫、放射免疫及熒光免疫技術(shù)有著更高的靈敏度，為微量抗原、抗體的檢測(cè)開辟了新的途徑。近年來，在BAS檢測(cè)中多用鏈霉親和素“streptavidin,SA”，它是鏈霉菌培養(yǎng)過程中的分泌物，完整的鏈霉親和素和從卵白中提取的親和

免疫熒光技術(shù)實(shí)驗(yàn)說明2021/06/23: 免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。一、傳統(tǒng)的免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟1、實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞樣品試劑、試劑盒：多聚甲醛、70%甲醇、丙酮、PBS、Triton、BSA、DAPI染液、DABCO、Tris、甘油儀器、耗材：玻片2、實(shí)驗(yàn)步驟細(xì)胞爬片免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟：第一

標(biāo)記基因和報(bào)告基因的區(qū)別與關(guān)聯(lián)2021/06/17: 標(biāo)記基因和報(bào)告基因的概念標(biāo)記基因(markergene)，是一種已知功能或已知序列的基因，能夠起著特異性標(biāo)記的作用。標(biāo)記基因是選擇標(biāo)記基因的簡(jiǎn)稱，是指其編碼產(chǎn)物能夠使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織具有對(duì)抗生素等的抗性，或者使轉(zhuǎn)化細(xì)胞、組織具有代謝的*性。在培養(yǎng)基中加入抗生素等選擇試劑的條件下，非轉(zhuǎn)化的細(xì)胞死亡或生長(zhǎng)受到抑制，而轉(zhuǎn)化的細(xì)胞能夠繼續(xù)存活，從而將轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織從大量的細(xì)胞或組織中篩選出來的一類基因。在基因工程意義上來說，它是重組DNA載體的重要標(biāo)記，通常用來檢驗(yàn)轉(zhuǎn)化成功與否；在基因定位意義上來說，

細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟2021/06/09: 一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等。二、取材在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞，經(jīng)過一定的處理后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的第一次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng)，實(shí)際上幼體組織比成年個(gè)體的組織容易培養(yǎng)，分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)，腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理，盡

如何正確溶解與稀釋ELISA標(biāo)準(zhǔn)品？2021/05/26: ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子，標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。怎樣正確溶解、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品呢？1.粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心，讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。2.根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解10-30min，讓粉末*溶解。注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。3.標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:（1）標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇：若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。若細(xì)胞上清樣本，建議

用鑒定試劑盒做微生物生化鑒定操作流程與注意事項(xiàng)2021/05/17: 生化鑒定試劑盒HiBio-ID™，試劑盒包含生化鑒定卡、輔助試劑、結(jié)果詮釋表和標(biāo)準(zhǔn)菌種表。一個(gè)生化鑒定卡上集成了12種或24種生化試驗(yàn)，將反應(yīng)后的顯色結(jié)果與《結(jié)果詮釋表》、《菌種標(biāo)準(zhǔn)表》比對(duì)后，從而對(duì)菌種作出鑒定。操作流程：1，準(zhǔn)備接種液①待測(cè)菌株需要先分離純化。只有純化的菌株才能用于檢測(cè)?？捎闷胀ㄅ囵B(yǎng)基如營養(yǎng)瓊脂（#M001）或適合的鑒別培養(yǎng)基分離菌株。（具體培養(yǎng)基以說明書為準(zhǔn)）②挑取單個(gè)菌落，接種到5ml腦心浸出液肉湯，在35-37℃培養(yǎng)4-6小時(shí)，直到菌液濁度達(dá)到產(chǎn)品說明書上的要求。一些苛

人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟及優(yōu)點(diǎn)2021/05/11: 人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:1.以稀釋液將待檢標(biāo)本做適當(dāng)稀釋（預(yù)試中確定）加入包被有已知抗原的酶標(biāo)板中（50ul/孔），加封口膠帶于37℃作用30min。2.棄反應(yīng)液，以沖洗液連續(xù)洗板5次并于吸水紙上拍干。3.加入酶標(biāo)抗體（濃度在預(yù)試中確定）。加封口膠帶后于37℃作用30min。4.重復(fù)第2步。5.加底物（濃度在預(yù)試中確定），加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60min，其間不時(shí)觀察，顯色滿意后加終止液50ul/孔。6.于酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，OPD用492nm測(cè)定，TMB用450nm測(cè)定。人ELIS

熒光核酸試劑儲(chǔ)存條件及探針法2021/04/28: 熒光核酸試劑儲(chǔ)存條件：14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻

標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存及使用方法2021/04/27: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)》技術(shù)規(guī)范，隨機(jī)抽取分裝后的樣品，采用高效液相色譜法（DAD檢測(cè)器）對(duì)純度進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)、穩(wěn)定性考察。檢驗(yàn)結(jié)果表明均勻性和穩(wěn)定性良好。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)zui小取樣量為5mg。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性跟蹤考察，有效期為自定值日期起2年。研制單位將繼續(xù)監(jiān)測(cè)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時(shí)通知用戶。包裝、儲(chǔ)存及使用1、包裝：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用螺口小玻璃瓶包裝，每瓶不少于500mg。2、儲(chǔ)存及使用：冷藏、避光、干燥條件下保存。使用前，在P2O5干燥器中干燥48小時(shí)以上，以除去水分。3、本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

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