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液相色譜中影響峰擴(kuò)散的6大因素？2023/07/26: 氣相色譜與液相色譜在速率理論方程上的差異主要是由于氣體與液體的性質(zhì)差異造成的。液體的黏度比氣體大約100倍，表面張力大約10000倍，密度大約1000倍；氣體還具有高壓縮性系數(shù)。溶質(zhì)在液體中的擴(kuò)散系數(shù)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于在氣體中，液相在傳質(zhì)過(guò)程中對(duì)理論塔板高度的影響尤其的大。與氣相色譜速率理論方程不同的是，液相色譜增加了固定相孔結(jié)構(gòu)內(nèi)滯留流動(dòng)相傳質(zhì)項(xiàng)。因此我們可以得知主要有以下幾個(gè)方面會(huì)影響色譜峰擴(kuò)張：1.渦流擴(kuò)散渦流擴(kuò)散是由于柱填料粒徑大小不同及填充不均勻等因素造成的流動(dòng)相在色譜柱內(nèi)遷移過(guò)程中發(fā)生的渦流

液相色譜“雙峰”的5大原因2023/07/03: 色譜雙峰指的是明明是同一種物質(zhì)，但在色譜圖中卻呈現(xiàn)雙峰，讓實(shí)驗(yàn)人員誤認(rèn)為含有兩種物質(zhì)。那么，出現(xiàn)雙峰的原因主要有哪些呢？今天小編就和大家聊一聊，液相色譜出現(xiàn)“雙峰”的原因。在HPLC分析中，在色譜柱正常，樣品濃度適宜，分析方法合適，色譜峰在出峰時(shí)間較短的條件下，峰型應(yīng)對(duì)稱(chēng)而尖銳。但在實(shí)際操作中，如果對(duì)樣品不了解，前處理不恰當(dāng)或者分析方法不合理等，會(huì)出現(xiàn)峰形不正常的情況，其中雙峰現(xiàn)象就是液相色譜中常見(jiàn)的問(wèn)題之一。出現(xiàn)色譜雙峰的原因一般有以下幾種原因：色譜柱的問(wèn)題、溶劑、進(jìn)樣量、樣品特性，以及pH。

液相色譜操作過(guò)程中的注意事項(xiàng)2023/05/17: 液相色譜對(duì)于多數(shù)人來(lái)說(shuō)都是很好上手的儀器了，但是就算是用過(guò)幾年、經(jīng)驗(yàn)豐富的分析員都會(huì)習(xí)慣于一些錯(cuò)誤的操作（師傅教錯(cuò)了嗎），經(jīng)常導(dǎo)致一些儀器故障。方便快捷的分析過(guò)程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些步驟，往往得不償失，哪些操作不能做？哪些懶兒不能偷？那些小概率的故障師傅沒(méi)教怎么辦？液相使用過(guò)程中有哪四大關(guān)鍵因素要注意？本文一一告訴你哦！流動(dòng)相不過(guò)濾因?yàn)閴m埃或其它任何雜質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾，而常用的方法是濾過(guò)，

液相色譜使用秘訣須謹(jǐn)記！2023/04/11: 液相色譜對(duì)于多數(shù)人來(lái)說(shuō)都是很好上手的儀器了，但是就算是用過(guò)幾年、經(jīng)驗(yàn)豐富的分析員都會(huì)習(xí)慣于一些錯(cuò)誤的操作（師傅教錯(cuò)了？），經(jīng)常導(dǎo)致一些儀器故障。方便快捷的分析過(guò)程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些步驟，往往得不償失，哪些操作不能做？哪些懶兒不能偷？那些小概率的故障師傅沒(méi)教怎么辦？液相使用過(guò)程中有哪四大關(guān)鍵因素要注意？本文一一告訴你哦！一、流動(dòng)相不過(guò)濾因?yàn)閴m?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾，而常用的方法是濾

如何排除色譜系統(tǒng)中的氣泡？2023/04/04: 液相色譜總有氣泡怎么辦？總結(jié)起來(lái)可以分類(lèi)7種原因，這里整理了7種故障原因及解決方法，一旦遇到這些故障可以對(duì)照進(jìn)行解決。情況一溶劑混合時(shí)，由于兩種液體熱力學(xué)體積的變化，會(huì)產(chǎn)生氣泡；混合時(shí)放熱或者吸熱易產(chǎn)生氣泡，比如：甲醇和水混合屬于放熱，乙腈和水混合屬于吸熱。通常用量筒混合后明顯看到體積的增減，而且有許多小氣泡產(chǎn)生，掛在瓶壁上，或者晃一下可以看到許多小氣泡存在液體中。解決辦法：對(duì)溶劑過(guò)濾，超聲脫氣（常用），尤其是乙腈和水混合后，超聲脫氣時(shí)間要長(zhǎng)一些，也可以通過(guò)其他方法脫氣，例如安裝在線(xiàn)脫氣機(jī)，充氮

分流進(jìn)樣 or 不分流進(jìn)樣？該如何選擇？2023/03/09: 分流/不分流進(jìn)樣口是毛細(xì)管柱氣相色譜法較常用的進(jìn)樣口，它既可用作分流進(jìn)樣，也可用作不分流進(jìn)樣。分流進(jìn)樣和不分流進(jìn)樣在進(jìn)樣口結(jié)構(gòu)、襯管結(jié)構(gòu)、操作參數(shù)的設(shè)置，以及對(duì)樣品的要求等都有區(qū)別。那么，究竟是選擇哪種進(jìn)樣方式呢？從結(jié)構(gòu)上看，分流/不分流進(jìn)樣口有明顯的不同：一是前者有分流氣出口及其控制裝置，除了進(jìn)樣口前有一個(gè)控制閥外，在分流氣路上還有一個(gè)柱前壓調(diào)節(jié)閥；二是使用的襯管結(jié)構(gòu)不同。不分流襯管為直通型，而分流襯管內(nèi)部多彎曲或內(nèi)部另有裝置。此外，分流進(jìn)樣和不分流進(jìn)樣在操作參數(shù)的設(shè)置，對(duì)樣品的要求以及襯管結(jié)

保留時(shí)間不穩(wěn)定漂移原因有很多2023/01/04: 保留時(shí)間是色譜法的常用術(shù)語(yǔ)，是指被分離樣品組分從進(jìn)樣開(kāi)始到柱后出現(xiàn)該組分濃度極大值時(shí)的時(shí)間，當(dāng)提到保留時(shí)間、死時(shí)間、調(diào)整保留時(shí)間時(shí)，你是否清楚？當(dāng)涉及液相、氣相中保留時(shí)間波動(dòng)時(shí)，你是否明白，本篇文章為你做出了概括！先區(qū)分幾個(gè)小概念保留時(shí)間(T)：從進(jìn)樣開(kāi)始到某個(gè)組分的色譜頂點(diǎn)的時(shí)間間隔稱(chēng)為該組分的保留時(shí)間。即從進(jìn)樣到柱后某組分出現(xiàn)濃度極大時(shí)的時(shí)間間隔。死時(shí)間(t)：分配系數(shù)為0的組分的保留時(shí)間稱(chēng)為死時(shí)間。通常將空氣或者甲烷視為此種組分，用來(lái)測(cè)定死時(shí)間。調(diào)整保留時(shí)間（t）：某組分由于溶解（或者吸附

鬼峰產(chǎn)生的原因及解決辦法2022/12/08: 什么叫鬼峰？在做液相色譜反相系統(tǒng)梯度洗脫時(shí)，有時(shí)會(huì)遇到儀器不進(jìn)樣也有出峰的情況，這種峰影響定量結(jié)果，也可使分析工作無(wú)法進(jìn)行，由于它神出鬼沒(méi)的特質(zhì)，所以被稱(chēng)為鬼峰。那我們就來(lái)了解下，鬼峰出現(xiàn)的可能原因及排除方法。在懷疑峰型異常是不是鬼峰時(shí)，我們首先可以通過(guò)仔細(xì)核查操作條件是否與分析方法一致，儀器工作狀態(tài)是否正常來(lái)看有無(wú)操作失誤，確定不是上述失誤后，儀器不進(jìn)樣，或者進(jìn)流動(dòng)相，或者只運(yùn)行方法看基線(xiàn)中是否還存在莫名的色譜峰來(lái)判斷是否為鬼峰。從鬼峰出現(xiàn)的頻率來(lái)看，一般來(lái)說(shuō)，可以從兩個(gè)大方面進(jìn)行考慮：流動(dòng)相

色譜知識(shí)匯編整理（上篇）2022/11/16: 本文共分為了四個(gè)部分：色譜法總論、氣相色譜法、高效液相色譜、質(zhì)譜分析法，共涉及了104個(gè)色譜分析的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)。因文章內(nèi)容過(guò)長(zhǎng)，將分為兩期內(nèi)容供粉絲們查閱。色譜方法總論色譜分析法：色譜法是一種分離分析方法，它利用樣品中各組分與流動(dòng)相和固定相的作用力不同(吸附、分配、交換等性能上的差異)，先將它們分離，后按一定順序檢測(cè)各組分及其含量的方法。色譜法的分離原理：當(dāng)混合物隨流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱時(shí)，就會(huì)與柱中固定相發(fā)生作用(溶解、吸附等)，由于混合物中各組分物理化學(xué)性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相發(fā)生作用的大小、強(qiáng)

HPLC雜質(zhì)檢驗(yàn)方法的確定&驗(yàn)證&檢驗(yàn)！2022/10/11: 原料藥中的雜質(zhì)包括有機(jī)雜質(zhì)（工藝和藥物相關(guān)的）、無(wú)機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑。其中有機(jī)雜質(zhì)就是一般我們所指的有關(guān)物質(zhì)，是指在藥物生產(chǎn)過(guò)程/貯存中所引入/生成的起始物料、中間體、副產(chǎn)物、異構(gòu)體、降解物、催化劑等1；藥物制劑的有關(guān)物質(zhì)主要是指藥物自身的降解物以及藥物與輔料或包裝材料相容性產(chǎn)物等2。有關(guān)物質(zhì)可能會(huì)具有不確定的毒性，甚至潛在的致癌、致畸、致突變等性質(zhì)，因此需嚴(yán)格控制。國(guó)內(nèi)外藥典中很多品種有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法通過(guò)峰面積比較的方法來(lái)確定是否符合規(guī)定，這種方法忽略了供試品溶液和對(duì)照品溶液的實(shí)際濃度，是一種x

7步*了解氣相色譜2022/09/22: 對(duì)于一個(gè)未知樣品，首先要了解它的來(lái)源、性質(zhì)、分析目的；在此基礎(chǔ)上，對(duì)樣品可有初步估計(jì)；再結(jié)合已知純物質(zhì)或有關(guān)的色譜定性參考數(shù)據(jù)，用一定的方法進(jìn)行定性鑒定。如何玩轉(zhuǎn)GC法分析樣品？1，樣品的來(lái)源和預(yù)處理方法GC能直接分析的樣品通常是氣體或液體，固體樣品在分析前應(yīng)當(dāng)溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校疫€要保證樣品中不含GC不能分析的組分(如無(wú)機(jī)鹽)，可能會(huì)損壞色譜柱的組分。因此在接到一個(gè)未知樣品時(shí)，必須了解來(lái)源，從而估計(jì)樣品可能含有的組分，以及樣品的沸點(diǎn)范圍。如果樣品體系簡(jiǎn)單，試樣組分可汽化則可直接分析。如果樣

色譜分析方法偏離的限度：pH值&流速&柱溫&進(jìn)樣量2022/08/29: 摘要在色譜分析領(lǐng)域中，允許實(shí)驗(yàn)室出于提高檢測(cè)性能與效率的需要，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法或方法中規(guī)定的儀器操作條件進(jìn)行調(diào)整，但不能超出一定的規(guī)定。超出一定的調(diào)整都視為方法變動(dòng)。1、HPLC流動(dòng)相的pH值流動(dòng)相制備過(guò)程中，水溶性緩沖液pH值可在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值的±0.2pH單位范圍內(nèi)調(diào)整。2、HPLC緩沖液中鹽的濃度流動(dòng)相制備過(guò)程中，如果pH值變化滿(mǎn)足要求，則水溶性緩沖液中鹽濃度可在±10%范圍內(nèi)調(diào)整。3、HPLC流動(dòng)相中各組分的比例流動(dòng)相中組分的增減可以達(dá)到該組分在組成中所占比例的30%以上。流動(dòng)相中占較高比例的組分

新色譜柱柱活化方法及維護(hù)注意事項(xiàng)2022/06/30: 液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)（ODS）稱(chēng)為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱，GPC柱，聚合物填料柱等。色譜柱在使用前，最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報(bào)告中的條件進(jìn)行（出廠(chǎng)測(cè)試所使用的條件是最佳條件），只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。

原來(lái) C18 柱有這么多選擇技巧！2022/06/14: 在藥物分析中高效液相色譜法用得非常普遍,而色譜柱的選擇直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果與藥物的質(zhì)量控制。不同C18色譜柱的保留行為千差萬(wàn)別,選擇適宜的色譜柱對(duì)分析樣品至關(guān)重要。以C18色譜柱的內(nèi)部化學(xué)鍵合相為切入點(diǎn),介紹C18色譜柱的差異,并綜述在不同的pH環(huán)境、流動(dòng)相極性、藥物極性等條件下以及根據(jù)色譜柱的分類(lèi)系統(tǒng)選擇合適的鍵合相,為如何正確快速的選擇C18色譜柱提供參考。高效液相色譜（HPLC）法選擇性高、靈敏度高、分析速度快，而且大部分可以溶解的藥物能用該法分析，所以該技術(shù)已經(jīng)成為藥物分析的方法。色譜柱是高

液相色譜柱堵了不要慌！2022/05/10: 色譜柱堵了怎么辦？液相色譜儀的色譜柱在使用一段時(shí)間后，常會(huì)出現(xiàn)故障。液相色譜柱堵了，是很多分析朋友都遇到過(guò)的問(wèn)題。那么碰到液相色譜柱堵了，怎么辦呢？不要慌，下面小編帶您了解一下液相色譜柱堵了的原因，及其解決方法。1、色譜柱“堵”的表現(xiàn)“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，最主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來(lái)源就是細(xì)菌。2、色譜柱“堵”的原因分析原因1：配制流動(dòng)相時(shí)細(xì)菌污染首先我們要認(rèn)識(shí)到，一般的國(guó)產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過(guò)濾處理，直接使用沒(méi)有

如何延長(zhǎng)色譜柱使用壽命2022/04/14: 一、使用在線(xiàn)過(guò)濾器我深信在線(xiàn)過(guò)濾器是HPLC或UHPLC儀器上有經(jīng)濟(jì)效益的部件。在線(xiàn)過(guò)濾器放置在自動(dòng)進(jìn)樣器和色譜柱（或是保護(hù)柱）之間，常用的在線(xiàn)過(guò)濾器分為含有可替換篩板（0.5μm或0.2μm）的不銹鋼在線(xiàn)過(guò)濾器以及一次性的PEEK材質(zhì)的在線(xiàn)過(guò)濾器，一般必須選擇比柱篩板孔徑更小的篩板，這樣才能有效攔截可能堵塞色譜柱篩板的顆粒。一旦發(fā)現(xiàn)儀器的壓力開(kāi)始增加，可能在線(xiàn)過(guò)濾器篩板開(kāi)始堵塞了，我們必須在其被*堵塞前更新。在線(xiàn)過(guò)濾器的功能就如同使用濾膜一樣，但是不需要任何額外的工作。使用離心機(jī)處理樣品后，還

HPLC基線(xiàn)漂移的影響因素2022/04/06: 1.柱溫的影響柱溫的影響對(duì)于部分檢測(cè)器，尤其是示差折光檢測(cè)器或者高靈敏度的紫外檢測(cè)器，對(duì)于柱溫模塊的影響，通常導(dǎo)致的是基線(xiàn)有規(guī)律的上升和下降；處理方法中有一條，在進(jìn)入檢測(cè)器前加上換熱器，不過(guò)換熱器是個(gè)什么東東，貌似并沒(méi)有用過(guò)。2.流動(dòng)相不均勻這個(gè)原因?qū)е碌幕€(xiàn)漂移通常是不規(guī)則的，與前一條柱溫的影響不同，流動(dòng)相的污染或者不均勻會(huì)導(dǎo)致基線(xiàn)的升高，采用HPLC級(jí)別的溶劑或者高純度的鹽或添加劑，并對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣可以解決流動(dòng)相不均勻?qū)е碌幕€(xiàn)漂移問(wèn)題。3.檢測(cè)器流通池污染或有氣泡檢測(cè)器流通池的污染之前好

如何調(diào)整流動(dòng)相實(shí)現(xiàn)提升分離度與改善峰形2022/03/11: 昨天的分離度不太行呀，流動(dòng)相要再調(diào)調(diào)！”這話(huà)是不是很熟悉？調(diào)調(diào)？！咋調(diào)？如果你還不知道如何配制合適的流動(dòng)相瞅這里！秘訣1：由強(qiáng)到弱一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗(yàn)，這樣可以很快地得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。秘訣2：三倍規(guī)則每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個(gè)聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過(guò)程中，注意觀(guān)察各個(gè)峰的分離情況。秘訣3：粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)當(dāng)分離達(dá)到一定程度，應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%

液相色譜柱的活化和保養(yǎng)2022/02/18: 色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件，被測(cè)物質(zhì)能否被很好的分離和測(cè)定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng)，以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。01色譜柱的活化反相色譜柱：使用新的C18柱時(shí)，先用甲醇或乙腈沖洗20-30個(gè)柱體積，然后用甲醇/乙腈：水（50:50）沖洗10個(gè)柱體積，然后再用流動(dòng)相平衡10-30柱體積正相色譜柱：新柱用流動(dòng)相平衡20-30個(gè)柱體積離子色譜柱（SAX,SCX）：新柱先用甲醇或乙腈沖洗20個(gè)柱體積，然后轉(zhuǎn)換到流動(dòng)相平衡Thermo部分

液相色譜“雙峰”原因解析2021/11/29: 在HPLC分析中，在色譜柱正常，樣品濃度適宜，分析方法合適，色譜峰在出峰時(shí)間較短的條件下，峰型應(yīng)對(duì)稱(chēng)而尖銳。但在實(shí)際操作中，如果對(duì)樣品不了解，前處理不恰當(dāng)或者分析方法不合理等，會(huì)出現(xiàn)峰形不正常的情況，其中雙峰現(xiàn)象就是液相色譜中常見(jiàn)的問(wèn)題之一。色譜雙峰指的是明明是同一種物質(zhì)，但在色譜圖中卻呈現(xiàn)雙峰，讓實(shí)驗(yàn)人員誤認(rèn)為含有兩種物質(zhì)。出現(xiàn)色譜雙峰的原因一般有以下幾種：色譜柱如果在樣品分析時(shí)發(fā)現(xiàn)每個(gè)色譜峰都有雙峰出現(xiàn)，尤其在采用單一純物質(zhì)時(shí)，則可以確定是色譜柱出現(xiàn)問(wèn)題了，一般是柱頭受損或者柱頭固定相污染引

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