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天津譜祥偉業(yè)科技有限公司
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液相色譜使用的注意點2025/02/11
液相色譜對于多數人來說都是很好上手的儀器了,但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員都會習慣于一些錯誤的操作,經常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過程固然重要,但是為了多做樣品而忽略了一些該有的步驟,往往得不償失,哪些操作不能做?哪些懶兒不能偷?那些小概率的故障師傅沒教怎么辦?液相使用過程中有哪四大關鍵因素要注意?一、流動相不過濾因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore
做好這7步,掌握氣相色譜!2024/12/10
氣相色譜的優(yōu)點是能對多種組分的混合物進行分離分析(這是光譜、質譜法所不能的)。但由于能用于色譜分析的物質很多,不同組分在同一固定相上色譜峰出現時間可能相同,僅憑色譜峰對未知物定性有一定困難。對于一個未知樣品,首先要了解它的來源、性質、分析目的;在此基礎上,對樣品可有初步估計;再結合已知純物質或有關的色譜定性參考數據,用一定的方法進行定性鑒定。樣品的來源和預處理方法GC能直接分析的樣品通常是氣體或液體,固體樣品在分析前應當溶解在適當的溶劑中,而且還要保證樣品中不含GC不能分析的組分(如無機鹽),可
C18的由來2024/10/31
“C18,指的是十八烷基硅烷鍵合相,這是色譜中廣泛使用的一種反相色譜柱固定相。C18的由來可以追溯到色譜學的早期發(fā)展,特別是反相色譜技術的誕生?!盋18固定相的開發(fā)源于對色譜分離技術的需求和改進。在色譜學的早期階段(Tsvet設計的試驗),疏水性化合物首先從色譜柱中洗脫,然后是極性化合物。這一洗脫順序被稱為正相色譜法(NPC)。然而,隨著科學家們對色譜技術的不斷探索和創(chuàng)新,反相色譜法(RPC)應運而生,它提供了一種相反的洗脫順序,即離子型和強極性化合物首先被洗脫,而疏水性更強的化合物隨后被洗脫,
高效液相色譜這些問題 中招沒?2024/10/22
高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法,這些方法在使用的過程中往往會遇到諸如鬼峰、基線漂移、拖尾、分叉峰、保留時間漂移、柱壓過高等系列問題,如何解決這些問題呢?1.用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移,有時發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?關于漂移問題:①溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定;②流動相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應等;③柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡;關
堵和漏——液相色譜的兩大“病癥”,咋解決?2024/09/14
液相色譜儀是屬于易學難用的儀器,特別講究“正確使用”和經驗。液相工作者接觸多的是流動相,流動相也是造成液相色譜各種問題的主要源頭。液相色最常見的故障一是堵,二是漏。下面就這兩分別展開討論(流動相以甲醇為例,色譜柱以C18為例)。一·為何會堵“堵”的表現現象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,主要原因就是流動相里有雜質,雜質的主要來源就是細菌。首先我們要認識到,一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理,直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質,也能在液相流路系統(tǒng)前
21條黃金圣律:讓你更懂液相流動相2024/08/02
流動相是影響液相色譜的關鍵因素。一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機溶劑或它們的混合液,但是如何配制。選擇配制的方法不同,分析結果特別是保留時間,是會有顯著差別的。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機溶劑或它們的混合液,水性溶劑也常用于緩沖液。常因資料上表示的內容和實際的配制方法不同,而產生流動相的差異,影響了色譜圖和分析結果。一般來說,溶劑的混合按體積比(V/V)或重量比(W/W)進行。溶液
液相色譜方法優(yōu)化——色譜柱的優(yōu)化2024/07/25
液相方法優(yōu)化中的色譜柱的優(yōu)化就是色譜柱的選型。選型的原則無非就是根據分析物的性質、流動相的條件、初步分離的結果等來選擇合適的色譜柱。強極性樣品對于強極性的樣品,C18色譜柱保留弱,可以選擇碳含量更高的C18;或者選用親水的AQC18,用純水相洗脫,會增強保留;再或者選用HILIC模式色譜柱。弱極性樣品對于弱極性的樣品,C18色譜柱保留很強或常規(guī)有機相洗脫不下來,可以嘗試碳含量更低的色譜柱,或者苯己基,C8,C4等。易污染樣品對于中藥類或生物類樣品,色譜柱容易被污染,可以嘗試大孔徑填料色譜柱更耐污
液相色譜柱填料是如何影響柱能的?2024/07/02
液相液相色譜柱的性能主要取決于填料的性質和類型。填料的大小、形狀、鍵合相、含碳量等均能影響液相色譜柱的性能,這對我們使用及選擇色譜柱都是非常有幫助的。常見的液相色譜柱填料有C1、C3、C4、C8、C18、C30、氨基、氰基、硅膠色譜柱等。常見色譜柱中的填料分類:1,反相(與離子對)方法C18(十八烷基或ODS):普適性好;保留性強,用途廣C8(辛基):與C18相似,但保留值稍小C3,C4:保留值小;大多用于肽類與蛋白質C1【三甲基硅烷(TMS)】:保留值最小;最不穩(wěn)定苯基,苯乙基:保留值適中;選
液相色譜常見問題解析之色譜柱壽命短2024/06/20
“在HPLC日常分析工作中,有幾個常見的問題一直困擾著我:色譜柱壽命太短;峰拖尾;保留時間重現性差;分不開;保留弱等?!庇龅揭陨蠁栴}該怎么去排查與優(yōu)化呢?我們今天看一下色譜柱壽命短的問題。我們分析原因無非是:樣品臟、沒有色譜柱保護措施、色譜條件比較嚴。01—樣品前處理我們要了解樣品的來源,比如天然產物提取物、生物樣品、發(fā)酵產物、合成產物等。如果是天然產物提取物,我們要做的前處理工作是根據目標物的性質,富集目標物,并除去色素等污染色譜柱的成分;如果是生物樣品,來源可能是生物組織、血液等,需要去除磷
色譜柱安裝、啟用和維護這樣做2024/05/30
色譜柱是液相色譜儀的最核心部件,價格相對昂貴,如避免強烈的碰撞和震動,不要讓柱床變干,避免在嚴寒環(huán)境受凍等。液相色譜柱的基本結構,是由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成。01柱頭類型和不銹鋼毛細管接頭的匹配色譜柱是消耗品,不是儀器原配的情況很多。如果接頭和柱頭深度不匹配將會產生漏液或者死體積過大的現象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內留有空隙而產生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。02溶劑的匹配轉換色譜柱內保存溶劑和儀器系統(tǒng)內存留溶劑,如果和流動相不匹配,使用前需進行
C18色譜柱的差異與選擇指南2024/04/16
高效液相色譜(HPLC)法選擇性高、靈敏度高、分析速度快,而且大部分可以溶解的藥物能用該法分析,所以該技術已經成為藥物分析的選擇。色譜柱是高效液相分離系統(tǒng)的中重要的環(huán)節(jié),業(yè)內常把色譜柱比喻為液相色譜的心臟,因為色譜柱的類型決定了色譜系統(tǒng)的性質,色譜柱的粒徑和長度影響了分析時間和分析效率。氨基柱、苯基柱、氰基柱等正相色譜柱和C18、C8等反相色譜柱是藥物分析與評價工作中常見的兩類色譜柱。以碳十八硅烷化學鍵合硅膠固定相(C18或ODS)的反相色譜出色地完成了液相色譜分析任務,而且與其他色譜相比,C1
提高氣相色譜靈敏度這樣做2024/03/22
目前,對提高檢測靈敏度的研究主要集中在樣品的柱前處理上,如,冷柱頭進樣技術、吹掃捕集、萃取、熱脫附進樣技術等。如何得到更高靈敏度的氣相色譜呢?主要是使用溶劑濃縮的方法,溶劑濃縮的目的是不使用分流進樣仍然可以得到尖銳的峰形,惟有如此,才能獲得更好的靈敏度以及更好的分離度。溶劑濃縮由兩種方法產生:第一種是在不分流進樣和直接進樣時使用:這種方法需要調節(jié)柱溫箱,與前者不同的地方是溶劑和分析化合物必須同時在進樣時在較冷的色譜柱上冷卻凝結;這些凝結的樣品在色譜柱表面形成“樣品泛濫帶”(floodedzone
液相色譜和氣相色譜主要相同點和差異2024/03/21
色譜法是一種常見的分離技術,其原理是利用欲分離組分在兩相間具備不同的分配系數,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中的不同物質以不同速度沿固定相移動,最終達到分離的效果。按兩相的物理狀態(tài),可以分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC),在現代樣品分析中,氣相色譜和液相色譜都是普遍采用的分析方法,但兩者也存在許多不同之處,具備不同的特性,這些特性也決定了它們不同的應用范圍。一、GC與LC的主要差異1.流動相區(qū)別GC:流動相為惰性氣體,流動相與組分無親合作用力,只與固定相有相互作用。LC:流動
為什么要進行色譜柱平衡2024/03/01
一、為什么需要進行柱平衡?·置換色譜柱內儲存的溶劑·在流動相和固定相之間建立平衡·濕潤固定相以實現分析物的分配·產生可靠的結果。二、色譜柱沒有平衡好會產生何種影響?·基線波動·保留時間變化·峰形變形·分離度變差·響應異?!ぎa生鬼峰。三、哪些因素影響色譜柱平衡?-固定相性質:具有龐大基團或空間位阻的固定相(例如苯基柱)可能需要更長的柱平衡時間。-表面積:具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。-孔徑大?。壕哂休^寬孔徑(因此表面積較低)的固定相有利于更快的柱平衡。-流動相組成:具有較高濃度的緩沖鹽
液相色譜柱堵了怎么辦?2024/01/09
色譜柱堵了怎么辦?液相色譜儀的色譜柱在使用一段時間后,常會出現故障。液相色譜柱堵了,是很多分析朋友都遇到過的問題。那么碰到液相色譜柱堵了,怎么辦呢?不要慌,下面小析姐帶您了解一下液相色譜柱堵了的原因,及其解決方法~1、色譜柱“堵”的表現“堵”的表現現象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,主要原因就是流動相里有雜質,雜質的主要來源就是細菌。2、色譜柱“堵”的原因分析原因1:配制流動相時細菌污染首先我們要認識到,一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理,直接使用沒有
液相色譜使用6大要點需謹記!2023/10/25
1由強到弱一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。2三倍規(guī)則每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規(guī)則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中,注意觀察各個峰的分離情況。3粗調轉微調當分離達到一定程度,應將有機溶劑10%的改變量調整為5%,并據此規(guī)則逐漸降低調整率,直至各組分的分離情況不再改變。1、流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容
如何提高色譜柱柱效?2023/10/10
使用氣相或液相的時候,小伙伴們有木有遇到這樣的情況,色譜圖的峰高和以往相比明顯降低了,甚至成數量級的減??;同時還伴有許多雜峰、鬼峰。那么是什么原因導致這個現象呢?據小析姐了解這多半是柱效降低的原因,今天就和小伙伴們聊一聊如何來改善色譜柱柱效的問題?色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標,混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關。在一定的色譜操作條件下,色譜柱的柱效可用理論塔板數或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數愈多,或塔板高度愈
液相色譜柱的6大經典問題!2023/08/31
使用過液相的小伙伴應該都問過這樣的問題吧:不同的實驗應該選擇什么規(guī)格的色譜柱?如何提高色譜柱的分離?等等,今天就一起看看下面這些問題你都遇到過幾個?1.什么是反相柱、正相柱?“反相”和“正相”的概念是液相色譜法早期提出的概念,當時鍵合相色譜柱尚未出現,固定相被涂覆在載體表面,極易流失,為此科學家對流動相使用給出了合理的建議:流動相極性與固定液極性應具有較大差別,以減少固定液流失。固定相極性弱于流動相時的液相色譜法被稱為反相色譜法,固定相極性強于流動相時的液相色譜法被稱為正相色譜法。盡管目前鍵合相
色譜配件耗材使用20問!2023/08/25
色譜配件耗材使用20問!·色譜是我們實驗室的重要一員,色譜耗材雖然很不起眼,但是也同樣起著至關重要的作用,耗材選的對,維護的好,才能保證實驗結果的穩(wěn)定可靠。本文匯總了20個色譜耗材的常見問題,希望能對大家有所幫助?!?、氣相色譜中的幾個概念氣相色譜:以氣體為流動相,依據組分與固定相之間分配吸附等作用力的差異而實現復雜樣品分離的一種分離技術。分離對象是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定,沸點一般不超過500度的樣品。氣體:載氣——用于傳送樣品通過整個系統(tǒng)的氣體。檢測器氣體——某些檢測器所需的支持氣體,如,FID。樣
如何有效解決HPLC漏氣/液問題?2023/08/10
漏氣,漏液是從內部向外漏,而漏氣則是外部了的氣體進入液相色譜儀的流路內部形成氣泡。下面按流路的方向逐個部件分析產生氣泡的原因和相應解決方法。1過濾頭做油液時,在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產生,這時考慮的是流動相有沒有脫氣(需要特別提醒即使是有了真空脫氣機也是要先超聲脫氣的,起碼可以減少脫氣機的工作壓力并提高工作效率),如果已脫氣,則要注意過濾頭的污染也會造成這種現象。處理方法比較簡單,擰下過濾頭在稀硝酸中浸泡,超聲半小時,洗凈后裝回去即可。2透明流路管指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管路。
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