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GV3101 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品信息：
組成 BC308-01
GV3101 Electrocompetent cells 20×50μl
pCAMBIA2301 (10ng/μl) 1 支

儲(chǔ)存條件：-70℃保存，避免反復(fù)凍融。
基因型：C58 (rifR ) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (StrR /GentR ), Nopaline type
產(chǎn)品介紹：
GV3101菌株為農(nóng)桿菌C58型背景，核基因中含有抗性基因Rif。此菌株還攜帶一種自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能喪
失的質(zhì)粒(disarmed Ti plasmid)。GV3101菌株含有pMP90 (pTiC58DT-DNA)，該質(zhì)粒含有vir基因（vir基因是
TDNA 插入植物基因組所必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可
輔助植物雙元表達(dá)載體的T-DNA的轉(zhuǎn)移）。pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒還含有Str和Gent抗性基因，賦予
GV3101菌株和抗性。GV3101農(nóng)桿菌適用于擬南芥、煙草、玉米、土豆等植物的轉(zhuǎn)基因操
作。GV3101 電轉(zhuǎn) 感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化，經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率大于10 5 cfu/μg DNA。
操作方法：
1. 電極間距為0.1cm的電轉(zhuǎn)杯（Gene Pulser®/MicroPulser™ electroporation cuvettes）插入碎冰中，壓實(shí)冰
面，冰中靜置5分鐘，使電轉(zhuǎn)杯充分降溫。（電轉(zhuǎn)杯重復(fù)使用方法：每次用完后，用大量的自來水沖洗
干凈去掉菌液和DNA，用蒸餾水洗3遍，將其泡在75%乙醇中30分鐘，取出杯子，瀝干液體，放在超凈
臺(tái)中，使乙醇充分揮發(fā)，蓋上蓋子放干燥地方備用）
2. 取-70℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘，待其融化，加入10ng-1μg質(zhì)粒DNA（洗脫或溶解質(zhì)粒的
溶液中離子不能太高，可用雙蒸水稀釋：次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手
管底混勻，立即插入冰中，在超凈臺(tái)中用無菌吸頭將感受態(tài)-質(zhì)?；旌衔锟焖僖频诫姄舯?，蓋上
杯蓋，空管保留待用。
3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀，設(shè)置電擊參數(shù)：C=25μF，PC=200ohm，V=2.4KV（此參數(shù)為BioRad公司推薦，依據(jù)不同
電轉(zhuǎn)儀設(shè)置針對(duì)農(nóng)桿菌合適的電擊參數(shù)）。用紙巾擦掉電轉(zhuǎn)杯外部的水分，將電轉(zhuǎn)杯快速放入電轉(zhuǎn)槽
中進(jìn)行電擊步驟。電擊完成后，將電轉(zhuǎn)杯快速插入冰中，加入700μl無抗生素的LB 并轉(zhuǎn)移到原來保留
的感受態(tài)空管中，28℃，150-200rpm，振蕩培養(yǎng)2-3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取200μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊，取100μl的菌液涂布于含相應(yīng)抗生素
的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天（當(dāng)平板只含有50 μg/ml Kan 時(shí)，28℃培養(yǎng)48小時(shí)
即可；平板中同時(shí)加入50 μg/ml Kan，20μg/ml Rif時(shí)，需28℃培養(yǎng)60小時(shí)；如果使用的平板含有50 μg/ml
Rif則需要28℃培養(yǎng)72-90小時(shí)）。
注意事項(xiàng)：
1. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作，加入質(zhì)粒的體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10，質(zhì)粒不純或超大質(zhì)粒會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)化
效率急劇下降。
2. 平板上菌落過多時(shí)，菌落很小。為了獲得大的菌落，應(yīng)減少質(zhì)粒用量或減少涂布量，或?qū)⒕滢D(zhuǎn)移到
新平板上生長(zhǎng)。
3. 使用的工作濃度濃度不應(yīng)高于25 μg/ml，過高的濃度會(huì)降低生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。
4. 具有防止雜菌生長(zhǎng)篩選農(nóng)桿菌的作用；根據(jù)所用菌株抗性加入或可防止Ti質(zhì)
粒丟失，但不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作，所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)可不考慮添加或，
Ti質(zhì)粒丟失的概率極低（可忽略）。

E 、感受態(tài)細(xì)胞
E-1 、大腸桿菌克隆感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC101-01	0 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC101-02	0 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC102-01	DH5α 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC102-02	DH5α 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC103-01	JM109 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC103-02	JM109 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC104-01	XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC104-02	XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC105-01	Mach 1-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC105-02	Mach 1-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC117-01	Turbo 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×10	包
BC117-02	Turbo 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC118-01	Stable 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC106-01	DH10B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC106-02	DH10B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC107-01	OmniMAX2-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC107-02	OmniMAX2-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC108-01	Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC115-01	Stbl4 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC109-01	XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC110-01	JM110 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC111-01	DB3. 1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC112-01	DH10BAC 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC113-01	NEB 10-beta 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC114-01	BJ5183-AD- 1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
E-2 、大腸桿菌表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC201-01	BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC201-02	BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC202-01	BL21(DE3) pLysS 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC202-02	BL21(DE3) pLysS 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC203-01	M15 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC203-02	M15 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC204-01	Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC204-02	Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC205-01	OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC205-02	OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC206-01	T7 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC206-02	T7 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC207-01	T7pLysY 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC207-02	T7pLysY 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC208-01	Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC208-02	Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC209-01	Shuffle T7-B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC209-02	Shuffle T7-B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
E-3 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC401-01	NEB 10-beta 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC402-01	BJ5183 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC403-01	BJ5183-AD- 1 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC404-01	0 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC405-01	DH5α 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
E-4 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC301-01	LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC302-01	AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC303-01	EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC304-01	GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
E-5 、農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC305-01	LBA4404 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC306-01	AGL1 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受電轉(zhuǎn)態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC307-01	EHA105 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC308-01	GV3101 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包

南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞、外泌體、ELISA 試劑盒、抗體、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝、神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué)、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。
品牌優(yōu)勢(shì)
1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好；
2、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過 QA、QC 檢測(cè)才可出庫；
3、實(shí)力強(qiáng)大： 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心，動(dòng)物房；
4、技術(shù)支持：技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問題及時(shí)解答；
5、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí)，三個(gè)工作日順豐快遞；售后無憂，包退包換。
6、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：ELISA 試劑盒：人、大小鼠、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo)；
抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗 1 萬余種，二抗 100 多種；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。