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菌株一般使用方法2023/05/26
獲得菌株后，原則上應(yīng)盡早進(jìn)行活化和保存。若不能立即活化，應(yīng)按照說明書放入相應(yīng)的環(huán)境中進(jìn)行保存。若菌株為厭氧菌，請按厭氧菌培養(yǎng)要求在厭氧環(huán)境中操作。(1)若保存的菌株為凍干粉形式，可加入少量生理鹽水或非選擇性肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行溶解懸浮，用劃線或涂布方式接種至平板，或著吸取菌液至液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。(2)若保存的菌株為甘油凍存或液體保存形式，可在室溫速融后劃線或涂布接種至平板，或直接加入到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。(3)若保存的菌株為斜面或半固體形式，可直接挑取菌苔轉(zhuǎn)接至平板或液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)?；罨?
微生物培養(yǎng)基一般需要哪幾類營養(yǎng)物質(zhì)2023/05/18
為了區(qū)分大腸桿菌和其他菌落一般需要用哪種培養(yǎng)基，大腸桿菌會在該培養(yǎng)基上發(fā)生什么情況？為了區(qū)分大腸桿菌應(yīng)該用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，大腸桿菌會在其中程紫黑色，并且有金屬光澤。制備微生物培養(yǎng)基時(shí)，常用的提供生長因子的物質(zhì)。配制天然培養(yǎng)基時(shí)，可加入酵母膏、玉米漿、肝浸液、麥芽汁或動植物組織浸液。配制組合培養(yǎng)基時(shí)，可加入復(fù)合維生素溶液。磷酸鹽緩沖液（PBS）將8gLU化鈉、0.2gLU化鉀、1.44g磷酸氫二鈉和0.24g磷酸二氫鉀溶解于800ml蒸餾水中，用鹽酸調(diào)pH至7.4，加蒸餾水定容至1000ml，分裝
微生物發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基的主要組分及其作用2023/04/18
培養(yǎng)基的主要組成包括：碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子等。碳源是指能夠?yàn)榧?xì)胞提供碳素化合物的營養(yǎng)物質(zhì)。在一般情況下，碳源也是為細(xì)胞提供能量的能源。碳是構(gòu)成細(xì)胞的主要元素之一，也是所有酶的重要組成元素。所以碳源是酶的生物合成法生產(chǎn)中不可少的營養(yǎng)物質(zhì)。氮源是指能向細(xì)胞提供氮元素的營養(yǎng)物質(zhì)。氮元素是各種細(xì)胞中蛋白質(zhì)。核酸等組分的重要組成元素之一，也是各種酶分子的組成元素。氮源是細(xì)胞生長、繁殖和酶的生產(chǎn)的不可少的營養(yǎng)物質(zhì)。無機(jī)鹽的主要作用是提供細(xì)胞生命活動所必*各種無機(jī)元素，并對細(xì)胞內(nèi)外的PH、氧化還原電位
tsa培養(yǎng)基放置時(shí)間久了容易凝結(jié)水2023/04/13
購買的培養(yǎng)基是存在冷凝水的.原因很簡單,主要是溫差造成.首先培養(yǎng)基要保證板皿的持水性、新鮮度;因?yàn)榇鎯?物流環(huán)境的更變,溫差造成了水霧水珠,一般這種情況,擱置在同一環(huán)境中放置一段時(shí)間即可.同一倉庫,靠窗向陽和里面陰面都是不同的狀態(tài).所以,很多客戶就擔(dān)心了:培養(yǎng)皿在培養(yǎng)中發(fā)生水霧現(xiàn)象屬不屬于正?，F(xiàn)象即用型平皿拿出來都是水怎么辦成品培養(yǎng)基平皿皿蓋上有較多水珠還能用嗎培養(yǎng)基滅菌后有水珠怎么辦培養(yǎng)皿里有水珠怎么控制……因?yàn)榇蠹叶荚趽?dān)心水珠對于培養(yǎng)皿造成染菌問題.平板接觸碟產(chǎn)品圖片為了更好的解決這個(gè)問題,
細(xì)菌培養(yǎng)特性觀察2023/03/03
細(xì)菌培養(yǎng)特性觀察【材料】1、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌庖肉培養(yǎng)液的培養(yǎng)物。2、脆弱類桿菌血瓊脂平板(含膽汁)的培養(yǎng)物。3、產(chǎn)氣莢膜梭菌石蕊牛乳培養(yǎng)液和葡萄糖高層瓊脂培養(yǎng)液的培養(yǎng)物?！静僮鳌?、觀察庖肉培養(yǎng)液中破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌的生長特點(diǎn)。(1)破傷風(fēng)梭菌在皰肉培養(yǎng)液生長特點(diǎn)：肉湯混濁，肉渣不消化，微變黑，有輔敗性惡臭。(2)產(chǎn)氣莢膜梭菌在皰肉培養(yǎng)液上生長特點(diǎn)：肉渣不被消化，呈粉紅色，產(chǎn)生氣體。(3)肉毒梭菌在皰肉培養(yǎng)液上生長特點(diǎn)：消化肉渣變黑，有輔敗惡臭。2、觀察脆弱類桿
常規(guī)人/小鼠樣本處理的竅門2023/02/14
人樣本：?外周血、白膜層、動員外周血、骨髓、臍帶血抗凝血劑：?檸檬酸鈉,肝素,EDTA?EDTA只適合存放短于24小時(shí)的新鮮血液?血液于室溫下（不可冷藏）可存放多達(dá)3天。一些細(xì)胞離體后生命周期至多24小時(shí)（例如樹突狀細(xì)胞、漿細(xì)胞和粒細(xì)胞）小鼠樣本：?外周血、脾臟、骨髓抗凝劑：?脾臟和骨髓無需抗凝劑?檸檬酸鈉,肝素,EDTA三者均可用于血液?不推薦使用儲存超過24小時(shí)的小鼠樣本
人工甜味劑可以殺死耐抗生素細(xì)菌,有可能在某些情況下取代抗生素2022/11/30
在許多超市食品中發(fā)現(xiàn)的糖替代品已被證明可以殺死導(dǎo)致肺炎和敗血癥的耐抗生素細(xì)菌。在健怡飲料、酸奶和甜點(diǎn)等產(chǎn)品中使用的三種人造甜味劑顯著地阻止了耐多藥優(yōu)先病原體的生長。這些添加劑不僅能使引起幾種嚴(yán)重感染的細(xì)菌失效，還能降低細(xì)菌對常用抗生素的耐藥性，這意味著需要的抗生素更少。這一發(fā)現(xiàn)發(fā)表在《MolecularMedicine》雜志上，可能會對抗超級細(xì)菌的斗爭。倫敦布魯內(nèi)爾大學(xué)生物科學(xué)家RonanMcCarthy博士說:“所有的飲食和無糖食品中都含有人工甜味劑。我們發(fā)現(xiàn)，你在咖啡或‘無糖’蘇打水中添加的
枯草芽孢桿菌的作用機(jī)理2022/11/07
1.枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產(chǎn)生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)對致病菌或內(nèi)源性感染的條件致病菌有明顯的抑制作用。2.枯草芽孢桿菌迅速消耗腸道中的游離氧，造成腸道低氧，促進(jìn)有益厭氧菌生長，間接抑制其它致病菌生長。3.刺激動物(人體)免疫器官的生長發(fā)育，激活T、B淋巴細(xì)胞，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫功能，提高群體免疫力。4.枯草芽孢桿菌菌體自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，在消化道中與動物體(人體)內(nèi)的消化酶類一同發(fā)揮作用。
培養(yǎng)基促生長實(shí)驗(yàn)操作2022/02/17
制訂培養(yǎng)基靈敏度實(shí)驗(yàn)操作，是為了規(guī)范、統(tǒng)一培養(yǎng)基靈敏度檢測，確保微生物檢測準(zhǔn)確、安全進(jìn)行。范圍適用于所有配制好并滅菌的培養(yǎng)基。檢測人員負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的配制、滅菌、靈敏度實(shí)驗(yàn)。內(nèi)容使用的設(shè)備、器具生物安全柜、無菌培養(yǎng)皿、無菌刻度吸管或無菌注射器、無菌玻璃涂布器、酒精燈等使用的菌株EP檢測用ATCC的菌株:金黃色葡萄球菌StaphylococcusaureusATCC6538大腸埃希菌EscherichiacoliATCC8739銅綠假單胞菌PseudomonasaeruginosaATCC9027枯草
菌落總數(shù)的檢驗(yàn)方法2022/01/11
菌落總數(shù)的檢驗(yàn)方法一、菌落總數(shù)介紹：菌落是指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物，它是由數(shù)以萬計(jì)相同的細(xì)菌集合而成。當(dāng)樣品被稀釋到一定程度，與培養(yǎng)基混合，在一定培養(yǎng)條件下，每個(gè)能夠生長繁殖的細(xì)菌細(xì)胞都可以在平板上形成一個(gè)可見的菌落。菌落總數(shù)就是指在一定條件下（如需氧情況、營養(yǎng)條件、pH、培養(yǎng)溫度和時(shí)間等）每克（每毫升）檢樣所生長出來的細(xì)菌菌落總數(shù)。按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定，即在需氧情況下，37℃培養(yǎng)48h，能在普通營養(yǎng)瓊脂平板上生長的細(xì)菌菌落總數(shù)，所以厭氧或微需氧菌、有特殊營養(yǎng)要求的
血清的保存方法2021/06/03
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)：（1）生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預(yù)留體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃斐裳宄恋砦镲@著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作
即用型工作菌株與新鮮菌液的區(qū)別2021/05/13
新鮮菌液或者新鮮培養(yǎng)物一般指處于對數(shù)生長期的菌體（細(xì)菌培養(yǎng)18-24h，真菌2-3天，黑曲霉為孢子），處于對數(shù)生長期的菌的活力和特性普遍認(rèn)為是*。即用型菌株采用凍干工藝制備而成，在此過程中不可避免會對微生物造成某種程度的損傷，同時(shí)低溫保存過程使微生物處于休眠狀態(tài)，生理活動受到抑制，故其較新鮮培養(yǎng)物顯然是不同的。既然兩者并不相同，那具體該如何應(yīng)用？對比效果如何或者各自具備哪些優(yōu)勢呢？1.在各應(yīng)用中的情況在微生物檢驗(yàn)工作領(lǐng)域中，標(biāo)準(zhǔn)菌種主要應(yīng)用于以下幾方面：培養(yǎng)基適用性、方法適用性和陽性對照等。培養(yǎng)
脂肪氧化酶活性測定2020/08/28
一、蛋白質(zhì)鹽析分離的原理：蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增大而上升(鹽溶)，當(dāng)鹽濃度增大到一定數(shù)值時(shí)，其溶解度又逐漸下降直至蛋白質(zhì)析出。鹽析的發(fā)生是由于鹽濃度增大到一定數(shù)值時(shí)使水活性降低，導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，引起蛋白質(zhì)分子之間相互聚集并從溶液中析出，后經(jīng)離心機(jī)分離后獲得沉淀物和上清液。二、影響蛋白質(zhì)鹽析分離的因素：1、蛋白質(zhì)濃度：蛋白質(zhì)濃度過大，鹽析時(shí)發(fā)生共沉現(xiàn)象，分離效果不好。蛋白質(zhì)濃度太稀，耗鹽量過大，蛋白質(zhì)回收率低。一般蛋白質(zhì)濃度在2.5%～3.0%
細(xì)胞污染鑒定2020/06/28
一、肉眼觀察以下幾項(xiàng)：1.細(xì)胞瓶身：如果瓶身上沒有裂縫，正常；如果瓶身上有裂縫，則污染幾率非常大。2.培養(yǎng)基顏色：如果培養(yǎng)基顏色是紅色或者粉色，正常；如果是橙色，則可能是污染或者細(xì)胞過密；如果是黃色，則污染幾率非常大。3.培養(yǎng)基澄清度：如果培養(yǎng)基澄清，正常；如果有少許漂浮物，則可能是污染或者有細(xì)胞凋亡；如果培養(yǎng)基很渾濁，甚至出現(xiàn)絮狀物，則污染幾率非常大。二、進(jìn)行顯微鏡下觀察（通常觀察前需先靜置細(xì)胞1-2h）顯微鏡下可以清晰觀察到細(xì)胞是否有菌類污染，菌類污染通常分為桿菌、球菌和霉菌，為了方便大家分
siRNA，shRNA，dsRNA，miRNA間的區(qū)別2020/05/25
siRNA，shRNA，dsRNA，miRNA間的區(qū)別RNA干擾（RNAi），即用20多個(gè)核苷酸組成的短的雙鏈RNA（siRNA）代替?zhèn)鹘y(tǒng)反義核酸進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后基因沉默，已經(jīng)迅速而廣泛地應(yīng)用到基因功能，基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制研究等熱門領(lǐng)域，并為基因治療開辟了新的途徑。近兩年來，這方面的科學(xué)論文及報(bào)道爆炸性增長，幾乎每天都有新的結(jié)果涌現(xiàn)。這些論文中，出現(xiàn)了很多與RNA干擾相關(guān)的概念，意思很相近但并不*相同，這里列舉了幾個(gè)常見的RNA干擾相關(guān)的名詞及其簡單的解釋：1、miRNA：在遺傳學(xué)中，微RNA（micr
D-青霉胺，提高耐藥真菌對光譜抗真菌藥的敏感性2020/05/21
D-青霉胺，是青霉素的降解產(chǎn)物，可作為原料藥，也可作為中間體，進(jìn)一步深加工成青霉胺衍生物。D-青霉胺具有強(qiáng)大的螯合銅、鋅、汞等金屬離子的能力，臨床上廣泛地應(yīng)用于因先天性銅代謝障礙而導(dǎo)致的Wilson病(肝豆?fàn)詈俗冃?。此外，對嚴(yán)重活動性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、慢性活動性肝炎、關(guān)節(jié)炎綜合征等疾病也有明顯療效。D-青霉胺沒有抗菌特性，但相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，其可聯(lián)合三唑類藥物應(yīng)用于制備抑制耐藥型白色念珠菌產(chǎn)品。白色念珠菌是一種重要的條件致病真菌，在人類中廣泛傳播，通常會引起急性、亞急性或慢性感染，也是現(xiàn)在醫(yī)院獲得性感
初學(xué)者：RNA提取原理2020/05/11
RNA提取原理RNA提取時(shí)，加lv仿后分三層：水相(含rna,可能還有少量DNA），中間白色薄層（應(yīng)該是蛋白和DNA），下層有機(jī)相（lv仿和蛋白等）lv仿是分子量比較大的有機(jī)溶劑，在提取RNA時(shí)，lv仿可以有效的使有機(jī)相和無機(jī)相迅速分離。DNA提取過程有機(jī)相中主要是酚和蛋白結(jié)合，從而使得蛋白和DNA脫離，DNA進(jìn)入水相。但是在RNA的提取過程就要避免蛋白和DNA脫離，否則DNA會釋放到水相。不管有酚也好，沒有酚也好，lv仿本身也對蛋白有變性作用，劇烈的震蕩，很容易使得DNA的親水基團(tuán)，與水相接觸
科研新手必看！RNA甲基化整體水平鑒定的方法匯總2020/04/03
RNA甲基化（RNAmethylation）是一類表觀遺傳修飾，在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的超過100種不同的RNA化學(xué)修飾中，主要有6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine,m6A）、5-甲基胞嘧啶（C5-methylcytidine,m5C）和1-甲基腺嘌呤（N1-methyladenosine,m1A）。RNA甲基化在調(diào)控基因表達(dá)、編輯、穩(wěn)定性及降解等方面扮演重要角色。早在20世紀(jì)70年代，人們已經(jīng)在真核生物的mRNA和lncRNA中發(fā)現(xiàn)了m6A修飾。但受制于技術(shù)的局限性，無法開展m6A檢測尤
用于RNAi的慢病毒包裝簡要程序2020/03/18
慢病毒包裝簡要程序：以六孔板中的1孔為例，每個(gè)樣品需要1×10∧6個(gè)293FT細(xì)胞。1、取1.5ml滅菌EP管，加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達(dá)質(zhì)粒以及250μl的無血清OptiMEM。輕柔混勻，室溫孵育5min。2、取1.5ml滅菌EP管，取9μl脂質(zhì)體2000l溶于250μl無血清Opti-MEMI培養(yǎng)基中。輕柔混勻，室溫孵育5min。3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min4、用胰酶消化并記數(shù)293FT細(xì)胞。用含血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。5、在六孔板中每孔，加
細(xì)胞自噬的研究方法介紹2020/02/20
一、自噬誘導(dǎo)劑(1)BredeldinA/Thapsigargin/Tunicamycin：模擬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(2)Carbamazepine/L-690，330/LithiumChloride（氯化鋰）：IMPase抑制劑（即Inositolmonophosphatase，肌醇單磷酸酶）(3)Earle's平衡鹽溶液：制造饑餓(4)N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：ClassIPI3KPathway抑制劑(5)Rapamycin：mTOR抑制劑(6)Xesto
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