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上海嘉鵬
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蛋白質(zhì)提取過程中常用蛋白酶和磷酸酶抑制介紹2016/04/01
在與蛋白相關(guān)的檢測中,zui關(guān)鍵的一步便是蛋白質(zhì)的提取。在提取的過程中,我們要經(jīng)常加入蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)的降解。另外在磷酸化蛋白的研究過程中,磷酸酶抑制劑也是*的。本文詳細(xì)總結(jié)了常用的蛋白酶抑制劑PMSF、Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin胃蛋白酶抑制劑、EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制劑NaF氟化鈉、Na3VO4原礬酸鈉、Beta-glycerophosphate甘油磷酸鈉、Na2P2O4焦磷酸鈉等的溶液配制、貯存液與工作液濃度及保存條件。一、蛋白酶抑
數(shù)顯蠕動泵的自動控制工作原理介紹2016/03/29
數(shù)顯蠕動泵,是一種新型的工業(yè)用泵,它是現(xiàn)代工業(yè)發(fā)展的產(chǎn)物,廣泛應(yīng)用于制藥、食品、化工等行業(yè),輸送一些帶有敏感性的、粘稠的、強(qiáng)腐蝕性的、具有磨削作用的、純度要求高的、以及含有一定顆粒狀物料的介質(zhì)。數(shù)顯蠕動泵的特點(diǎn):輸送的介質(zhì)不與泵體接觸,這樣有利于輸送一些對金屬腐蝕性較強(qiáng)的介質(zhì),例如:各種酸、堿溶液,或者一些含氯離子的鹽溶液。數(shù)顯蠕動泵的工作原理很簡單,數(shù)顯蠕動泵的結(jié)構(gòu):由蠕動泵驅(qū)動器,蠕動泵泵頭,和蠕動泵軟管三個部分構(gòu)成,是一種可控制流速的液體輸送裝置。其工作原理就是擠壓夾擠一根充滿流體的軟管,
PCR新手指南:Z佳復(fù)性溫度的選擇標(biāo)準(zhǔn)2016/03/28
PCR新手指南:*復(fù)性溫度的選擇標(biāo)準(zhǔn)*復(fù)性溫度的選擇標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可擴(kuò)增范圍的中間溫度。在使用溫度梯度的方法尋找*復(fù)性溫度時(shí),新手往往會選擇擴(kuò)增產(chǎn)物zui多的溫度條件,然而在此后的非梯度擴(kuò)增時(shí)擴(kuò)增效果又不太理想。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的主要原因是*復(fù)性溫度的選擇標(biāo)準(zhǔn)不對。本人10多年前做過數(shù)千個基因的擴(kuò)增,通過溫度梯度實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),能擴(kuò)增出來的溫度范圍一般在3-30度。選擇的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可擴(kuò)增范圍的中間溫度。因?yàn)椋?、擴(kuò)增產(chǎn)物量的影響因素很多,有些是隨機(jī)的。從定量PCR的平臺期高低的不規(guī)律可以看出來。2、不同儀器、
蛋白質(zhì)、多肽液相色譜純化方法簡介2016/03/24
修飾肽純化的一般目標(biāo)和方法首先,自然來源或者重組表達(dá)的蛋白質(zhì)經(jīng)過一些粗提的步驟(例如:勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩(wěn)定的可以用于色譜分離的樣品。然后進(jìn)行捕獲色譜(capturechromatography),主要目標(biāo)是濃縮和去除大量的容易去除的雜質(zhì),此步zui關(guān)心的是流速和載量,常采用高載量、快流速凝膠。經(jīng)過濃縮的部分純化的樣品進(jìn)行中級色譜(intermediatechromatography),目的是去除較難去除的雜質(zhì),此步zui關(guān)心的是分辨率,常采用高分辨率的細(xì)顆粒凝膠。zui后為了得到符
凝膠成像系統(tǒng)應(yīng)用分析詳細(xì)介紹2016/03/24
凝膠成像系統(tǒng)即對DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色(如eb、考馬氏亮藍(lán)、銀染、sybrgreen)及微孔板、平皿等非化學(xué)發(fā)光成像檢測分析。凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規(guī)研究。凝膠成像系統(tǒng)應(yīng)用范圍總體上來說凝膠成像系統(tǒng)可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。(1)分子量定量對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNAMarker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得
蛋白質(zhì)(protein)概述2016/03/23
蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物,舊稱“朊”。蛋白質(zhì)這一概念zui早是由瑞典化學(xué)家永斯·貝采利烏斯于1838年提出,但當(dāng)時(shí)人們對于蛋白質(zhì)在機(jī)體中的核心作用并不了解。1926年,詹姆斯·B·薩姆納揭示尿素酶是蛋白質(zhì),證明了酶是蛋白質(zhì)。*個被測序的抗原肽蛋白質(zhì)是胰島素,由弗雷德里克·桑格完成,他也因此獲得1958年度的諾貝爾化學(xué)獎。首先被解析的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)包括血紅蛋白和肌紅蛋白的結(jié)構(gòu),所用方法為X射線晶體學(xué);該工作由馬克斯·佩魯茨和約翰·肯德魯于1958年分別完成,他們也因此獲得1962年度的諾貝爾化學(xué)獎
蠕動泵、恒流泵及軟管泵的七大類應(yīng)用領(lǐng)域介紹2016/03/22
蠕動泵的原理簡介:蠕動泵由于輸出的流量非常穩(wěn)定因此又叫恒流泵,由于蠕動泵是靠擠壓軟管而達(dá)到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動泵的機(jī)械原理十分簡單。它是由轉(zhuǎn)輪擠壓著泵管并轉(zhuǎn)動從而推動管內(nèi)的流體向前移動從而產(chǎn)生流體流動的,就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣,隨著手指的移動,管內(nèi)形成負(fù)壓,液體隨之流動。蠕動泵這種產(chǎn)品由于具有恒流泵功能和潔凈操控方便等多種功能,因此在各種行業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用。生物醫(yī)藥溶劑、酸、堿、植物提煉液、軟膏、血漿石油、化工酸、堿、溶劑、懸浮物、分散體系、原油、稠油、油脂、
凝膠成像CCD結(jié)構(gòu)分解2016/03/18
其實(shí)每個公司生產(chǎn)的凝膠成像從結(jié)構(gòu)上看都是差不多的,都可以用于DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色(如EB、考馬氏亮藍(lán)、銀染)等非化學(xué)發(fā)光成像檢測分析,主要區(qū)分看凝膠成像的靈敏度與分辯率,要想拍出的圖像質(zhì)量好主要是取決于CCD的尺寸、像素,還有成像的一個軟件功能。凝膠成像CCD結(jié)構(gòu)分解——上海嘉鵬凝膠成像廠家詳細(xì)為你解答:*層“增光鏡頭”我們知道,數(shù)碼相機(jī)成像的關(guān)鍵是在于其感光層,為了擴(kuò)展CCD的采光率,必須擴(kuò)展單一像素的受光面積。但是提高采光率的辦法也容易使畫質(zhì)下降。這一層“微型鏡頭”就等于
蠕動泵的局限性簡介2016/03/17
蠕動泵都有哪些局限性?1.壓力局限:用柔性管,會使承受壓力受到限制.2.泵在運(yùn)作時(shí)會產(chǎn)生一個脈沖流,解決方法是:使用脈沖抑制器脈沖抑制器是一個簡單的定位容器,工作原理是由于空氣比液體更具有可壓縮性,脈沖流進(jìn)入容器、液體上的氣袋下陷吸收脈沖進(jìn)而平緩的流出脈沖抑制器3.蠕動泵通過調(diào)整轉(zhuǎn)速和改變泵管內(nèi)徑來達(dá)到流量的變化,蠕動泵的流量范圍比較窄。上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測
旋渦混合器的介紹2016/03/16
旋渦混合器具有結(jié)構(gòu)簡單可靠,儀器體積小,耗電省,噪音低等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物化學(xué),基因工程,醫(yī)學(xué)等實(shí)驗(yàn)需要。對液體、液固、固固(粉末)混合,它能將你所需混合的任何液體、粉末以高速漩渦形式快速混合,混合速度快、均勻、*。所有混合器機(jī)體均采用增強(qiáng)型工程塑料成型技術(shù),機(jī)體無油漆噴涂,耐酸堿,耐碰撞,工作臺面全部為耐磨天然橡膠,改變原海綿臺面易破損的缺點(diǎn),儀器集成了連續(xù)、調(diào)速、點(diǎn)振、平板型、碗型等所有功能。旋渦混合器廣泛用于環(huán)境監(jiān)測、醫(yī)療衛(wèi)生、石油化工、食品、冶金等各類大專院校、科研和生產(chǎn)企業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、
蠕動泵在色譜分析中壓力顯示值忽高忽低無規(guī)律?2016/03/15
蠕動泵引起這種現(xiàn)象的主要原因是系統(tǒng)內(nèi)存在氣泡。此時(shí)需要仔細(xì)檢查輸液管與泵頭下閥是否擰緊,四氟管有無裂紋等,因?yàn)橐后w在流動時(shí),在流經(jīng)處產(chǎn)生微小的負(fù)壓,空氣會進(jìn)入系統(tǒng)。當(dāng)檢查完確認(rèn)以后,將放空閥逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)一圈左右后,用手按住運(yùn)行鍵,此時(shí),泵以zui高的流速從排空閥流出,氣泡隨之流出。當(dāng)泵頭經(jīng)過清洗后,或者更換流動相時(shí),必須要經(jīng)過這一相操作。此法效果不佳時(shí),可以將主泵頭上閥的壓帽松開一點(diǎn)(約三分之一圈左右)存在單向閥內(nèi)的氣泡就可以排除。當(dāng)儀器是新購買或較長時(shí)間沒有使用,有時(shí)也會出現(xiàn)此類現(xiàn)象,當(dāng)確認(rèn)輸液
PCR新手指南:快速PCR技術(shù)與快速PCR儀的區(qū)別2016/03/15
在PCR儀上完成一個PCR反應(yīng)所需要的時(shí)間決定于以下幾個因素:1、模塊升溫和降溫時(shí)間2、模塊與PCR管內(nèi)溫度平衡時(shí)間3、延伸時(shí)間4、循環(huán)次數(shù)下面就以上幾點(diǎn)做一點(diǎn)分析,以便大家了解快速PCR技術(shù)與快速PCR儀的區(qū)別。1、模塊升溫和降溫度時(shí)間PCR儀一般會標(biāo)明升溫速度和降溫速度,但標(biāo)的大多是zui大變溫速度,也就是說是瞬間達(dá)到的速度。而與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的平均升降溫速度只有極少量廠家標(biāo)明。以平均2度和4度(能做到平均升降溫4度的儀器極少)來計(jì)算,從95度降到55度,分別是20秒和10秒,每一個循環(huán)差20秒鐘
萬州區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測中心開展食用菌熒光增白劑檢測建設(shè)2016/03/14
針對存在個別蘑菇生產(chǎn)、經(jīng)營者在生產(chǎn)和銷售過程中,違法使用熒光增白劑,嚴(yán)重影響了蘑菇食用安全,造成不良社會影響,區(qū)農(nóng)委根據(jù)渝農(nóng)發(fā)〔2010〕443號《重慶市農(nóng)業(yè)委員會關(guān)于開展蘑菇質(zhì)量安全專項(xiàng)治理行動的緊急通知》文件要求積極開展專項(xiàng)整治工作。一方面組織了由農(nóng)業(yè)行政執(zhí)法大隊(duì)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測中心、多經(jīng)站組成的檢查組,于12月22日針對五橋街道民安社區(qū)、雙河口石梁村、高峰鎮(zhèn)趙家村、高粱鎮(zhèn)茨坪村等生產(chǎn)基地,全面開展蘑菇生產(chǎn)拉網(wǎng)式檢查、質(zhì)量安全監(jiān)督抽查、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法等法律法規(guī)宣傳培訓(xùn)等蘑菇質(zhì)量安全
購買蠕動泵的要點(diǎn)有哪些?2016/03/14
一:蠕動泵的通道數(shù)一般的蠕動泵只配有一個泵頭,那么也有兩個泵頭的,可以根據(jù)自己的需求來進(jìn)行選擇,有兩個的,有四個的,但是要注意只要不超過驅(qū)動器的zui大扭矩就是可以的。二:控制精度作為液體輸送的一種儀器對于一些領(lǐng)域就對于蠕動泵的控制精度有一定的要求,對于流量的精度控制與泵的電機(jī)有著直接關(guān)系的,所以我們在選擇時(shí)要看電機(jī)了,蠕動泵的驅(qū)動器步進(jìn)電機(jī)轉(zhuǎn)速越精度越高,流量的控制也就更加的。三:控制方式現(xiàn)在的蠕動泵操作可以說非常的簡單,泵的前面有一個顯示器各種的數(shù)據(jù)都會顯示在上面,并且蠕動泵還實(shí)現(xiàn)了通過一些
淺談凝膠成像分析系統(tǒng)組成及各部件性能2016/03/11
凝膠成像系統(tǒng)的基本骨包含:CCD相機(jī),暗室和分析軟件。不過其功能不僅于對瓊脂糠凝膠進(jìn)行成像,現(xiàn)在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發(fā)熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應(yīng)用。在WesternBlot方面,高性能的CCD分子成像系統(tǒng)能與膠片媲美。CCD是電荷耦合器件(ChargeCoupledDevice)的英文名稱縮寫,是一種光電轉(zhuǎn)換器件。是凝膠圖像系統(tǒng)的核心部件。絕大多數(shù)對數(shù)碼相機(jī)都有一定的了解,不少人還是這方面的專家。有人把數(shù)碼相機(jī)的像素看得很重,但比較之后發(fā)現(xiàn),有些400萬、500萬像素的相
熒光定量PCR常用術(shù)語2016/03/11
基線:基線是早期循環(huán)的噪點(diǎn)水平,通常在第3和第15循環(huán)之間測量,這是因?yàn)樵诖似陂g還檢測不到擴(kuò)增產(chǎn)物引起的熒光值增加。用于計(jì)算基線的循環(huán)數(shù)量是可以改變的,如果使用高模板量或者靶標(biāo)基因的表達(dá)水平高則循環(huán)數(shù)量需要減少。設(shè)置基線需要查看線性度擴(kuò)增曲線的熒光數(shù)據(jù)。設(shè)置基線,使得擴(kuò)增曲線的增長所開始的循環(huán)圈數(shù)大于基線循環(huán)zui高圈數(shù)。對每個靶標(biāo)序列都需要單獨(dú)設(shè)置基線。早期循環(huán)檢測到的平均熒光值需要從擴(kuò)增產(chǎn)物中獲得的熒光值中減去。各種real-timePCR軟件的版本允許單個樣品自動優(yōu)化基線設(shè)置。本底:是指反
凝膠成像切膠操作時(shí)注意事項(xiàng)2016/03/10
1.電泳的buffer和gel都是新制的,切膠的臺子清理干凈,刀片洗凈滅菌,總之一句話就是保證切下的帶沒有外源dna污染。2.切膠是要把整個目的片斷所在位置的膠全部回收。為了減少膠的體積,可以用相對比較薄的膠來做,只要夠點(diǎn)樣即可,也可采用薄而寬的梳子來跑膠。3.關(guān)于防護(hù),在一般有機(jī)玻璃后就足夠了,戴上防護(hù)面具以保護(hù)眼睛,如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者對于膠有特殊要求,例如要求不含EB,可以采用點(diǎn)marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來確定目的條帶在膠上的位置進(jìn)行切膠。4.按
核酸探針標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)過程2016/03/09
實(shí)驗(yàn)原理分子生物研究中,zui常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因植物拷貝數(shù)的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機(jī)引物合成法。切口平移法(nicktranslation)當(dāng)雙鏈DNA分子的一條鏈上產(chǎn)生切口時(shí),E.coliDNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時(shí)該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時(shí)又在切口的3'端補(bǔ)上核苷酸,從而使切口沿著DNA鏈移動,用放射性核苷酸代替原先無放
對液相色譜儀的色譜工作站硬件有哪些要求2016/03/09
色譜工作站是色譜信號的一種收集,處理和傳輸裝置,它由軟件和硬件兩部分組成,實(shí)現(xiàn)采集、處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和操控色譜分析儀器的功能。色譜工作站只要會操作WINDOWS就會使用,更適合國人習(xí)慣的,功能強(qiáng)大的液相色譜儀工作站軟件。色譜工作站有什么功能?對于硬件的要求有哪些?對液相色譜儀色譜工作站硬件的要求主要有以下五點(diǎn):1.對工作站可靠性的要求。目前很多國產(chǎn)色譜工作站硬件在電路設(shè)計(jì)和元器件選用上存在缺陷,造成硬件的穩(wěn)定性差。有部分硬件在保修期內(nèi)反復(fù)出問題,極大的損壞了品牌形象。2.對量程范圍的要求。在制備色譜
PCR引物設(shè)計(jì)原則簡介2016/03/08
實(shí)驗(yàn)步驟首先引物與模板的序列要緊密互補(bǔ),其次引物不能在模板的非目的位點(diǎn)引發(fā)DNA聚合反應(yīng)(即錯配),再次引物與引物之間避免形成穩(wěn)定的二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu)。引物設(shè)計(jì)應(yīng)注意如下要點(diǎn):1.引物的長度一般為15-30bp,常用的是18-27bp。2.引物序列在模板內(nèi)應(yīng)當(dāng)沒有相似性較高,尤其是3’端相似性較高的序列,否則容易導(dǎo)致錯配。引物3’端出現(xiàn)3個以上的連續(xù)堿基,如GGG或CCC,也會使錯誤引發(fā)機(jī)率增加。3.引物3’端的末位堿基對Taq酶的DNA合成效率有較大的影響。不同的末位堿基在錯配位置導(dǎo)致不同的擴(kuò)增
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