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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
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特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基2011/04/12
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)AIMV(12005)培養(yǎng)基(SFM)。L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)
神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)總結(jié)2011/04/12
培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如MEM)和添加劑(如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長因子)組成,培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn),其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等?;A(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。MEM/F12這兩種培養(yǎng)
牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用及產(chǎn)生的常見問題(1)2011/04/12
現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程,這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切的關(guān)系,特別是在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多都是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實現(xiàn)的,基因工程乙肝疫苗大多是以CHO細(xì)胞作為載體;基因工程抗體藥物的制備也離不開細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞工程領(lǐng)域更離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),雜交瘤單克隆抗體的研究制備*是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實現(xiàn)的,發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)。總之,細(xì)胞培養(yǎng)在整個生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。細(xì)胞培養(yǎng)的
成功植入胰腺干細(xì)胞的步驟2011/04/11
成功植入胰腺干細(xì)胞的步驟1、細(xì)胞的制備;細(xì)胞的來源:采用流產(chǎn)人胚胎(5-7月胎齡)胰腺組織,于解剖顯微鏡下去除周圍的脂肪和結(jié)締組織。輕輕地分離并切碎胰腺,膠原酶370C震胰蕩消化30分鐘,然后加冷牛血清和Hanks液保護(hù)細(xì)胞并終止消化。此方法不但可以分離外分泌腺,還可以降低免疫原性從而減少免疫排斥反應(yīng)。1500轉(zhuǎn)離心10分后棄上清,用生長液保存具有生理功能的細(xì)胞備用,達(dá)到細(xì)胞量再行植入。2、胰腺干細(xì)胞的制備:由于胚胎數(shù)量不足,往往不能滿足胰島細(xì)胞種植的需要,就須在體外進(jìn)行擴(kuò)增,達(dá)到種植的細(xì)胞量。
小鼠胚胎與成體肝臟中干細(xì)胞變化探討的結(jié)果2011/04/11
小鼠胚胎與成體肝臟中干細(xì)胞變化探討的結(jié)果各組分離的細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)均有集落形成,肝干細(xì)胞的表面標(biāo)記提示形成的集落具有肝干細(xì)胞特性。其中以第15天胚胎肝臟分離所獲的細(xì)胞數(shù)和培養(yǎng)形成的集落數(shù)zui多、生長狀態(tài)。15d后觀察的各項指標(biāo)漸減,細(xì)胞生長狀態(tài)漸差。結(jié)論早期胚胎肝臟中大部分是具有干細(xì)胞特性的細(xì)胞,隨胎齡增加,有干細(xì)胞特性的細(xì)胞逐漸減少,直至出生第5天僅有少數(shù)保持未分化狀態(tài)的細(xì)胞存留在肝臟內(nèi)。
蛋白質(zhì)定義及概述2011/03/23
蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物,舊稱“朊(ruǎn)”。氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個氨基酸殘基(-R)不等;各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的氨基酸序列是由對應(yīng)基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種基本氨基酸,在蛋白質(zhì)中,某些氨基酸殘基還可以被翻譯后修飾而發(fā)生化學(xué)結(jié)構(gòu)的變化,從而對蛋白質(zhì)進(jìn)行激活或調(diào)控。多個蛋白質(zhì)可以一起,往往是通過結(jié)合在一起形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)復(fù)合物,折疊或螺旋構(gòu)成一定的空間結(jié)構(gòu)
抗生素檢測2011/03/22
β-內(nèi)酰胺類抗生素快速檢測試紙條基于膠體金免疫層析技術(shù),用于快速篩查β-內(nèi)酰胺類抗生素超標(biāo)的牛奶。將檢測液加入試紙卡上的樣品孔,檢測液中的β-內(nèi)酰胺類抗生素與膠體金墊上的金標(biāo)抗體結(jié)合形成復(fù)合物,若β-內(nèi)酰胺類抗生素在檢測液中濃度低于4ng/mL,未結(jié)合的金標(biāo)抗體流到T區(qū)時,被固定在膜上的β-內(nèi)酰胺類抗生素-BAS偶聯(lián)物結(jié)合,逐漸凝集成一條可見的T線;若β-內(nèi)酰胺類抗生素濃度高于4ng/mL,金標(biāo)抗體全部形成復(fù)合物,不會再與T線處的β-內(nèi)酰胺類抗生素-BAS偶聯(lián)物結(jié)合,從而也就不顯示T線。未固定的
免疫熒光技術(shù)特點2011/03/22
該技術(shù)的主要特點是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完*,結(jié)果判定的客觀性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同,還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產(chǎn)的TDM用試劑盒,有相當(dāng)一部分即屬于此類,并且還有TDM熒光偏振免疫分析用的自動分析儀生產(chǎn)。由于一般熒光測定中的本底較高等問題,熒光免疫技術(shù)用于定量測定有一定困難。近年來發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測定,與酶免疫測定和放射免疫分析一樣,在
維生素H2011/03/17
1936年,兩位德國科學(xué)家Kogl和Tonnis從煮熟的鴨蛋黃中分離提取出一種結(jié)晶物質(zhì),是酵母生長所必需維生素H的,稱之為“生物素”。生物素廠泛存在于自然界的各種生物中,是人類和動物維持健康*的要素,并因而得名。因其在食物中的分布很廣,幾乎每種食物中都含有少量的生物素,加之人體每日的所需量又很少,所以,人們一般都不缺乏這種維生素。分子式:C10H16N2O3S相對分子量:244.3,熔點:39~48‘C性狀與穩(wěn)定性:為無色長針狀結(jié)晶,具有尿素與噻吩相結(jié)合的駢環(huán),并帶有戊酸側(cè)鏈;極微溶于水和乙醇,
使用無血清培養(yǎng)基2011/03/14
在即將出版的3月份的《生物技術(shù)趨勢》(TrendsinBiotechnology)雜志中,來自責(zé)任醫(yī)藥醫(yī)師協(xié)會(PhysiciansCommitteeforResponsibleMedicine)的科學(xué)家和醫(yī)生倡導(dǎo)大家都使用無血清的培養(yǎng)基在實驗室中培養(yǎng)細(xì)胞。平時科研人員所使用的胎牛血清是通過穿刺胎牛心臟獲得的,在這個過程中通常不采用任何麻醉劑。zui近,隨著科技不斷進(jìn)步人類細(xì)胞可以在沒有動物血清的培養(yǎng)基中生長,這讓科學(xué)家和研究人員在做細(xì)胞培養(yǎng)的時候可以更加安全,同時也更加人道。文章的作者M(jìn)egh
抗人大腸桿菌免疫雞蛋黃抗體的研究2011/03/09
高免蛋黃抗體具有生產(chǎn)過程簡單、效率高等特點,已越來越多地應(yīng)用于人類許多疾病的預(yù)防和治療以及生物學(xué)的高度特異性檢測等領(lǐng)域中,并取得顯著成效。本文主要研究了以人致病性大腸桿菌為抗原,免疫母雞,研究獲得含有價蛋黃抗體的雞蛋的*條件;建立快速、準(zhǔn)確、定量的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定蛋黃抗體(IgY)效價的技術(shù);研究抗人大腸桿菌IgY分離純化條件及其理化、生化特性;研究食品加工過程中的各種因素對大腸桿菌特異IgY生物活性的影響;探討抗人大腸桿菌免疫雞蛋抗體的功能及其機(jī)理;評估蛋黃抗體的安全性。主要
作物種質(zhì)資源的利用現(xiàn)狀2011/03/04
20世紀(jì)50年代初期,我國農(nóng)作物遺傳育種研究規(guī)模小、數(shù)量少,但到80年代初期,主要農(nóng)作物已基本上實現(xiàn)良種化。五十多年來,我國培育的主要農(nóng)作物品種超過6000個,經(jīng)歷了6-7次大規(guī)模品種更換。每一次品種更換都使作物產(chǎn)量提高約10%,很大地促進(jìn)了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。進(jìn)入80年代以后,特別是加入WTO以來,隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整,作物育種方向從以往單純強(qiáng)調(diào)產(chǎn)量為主,轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)量、品質(zhì)和抗逆性的協(xié)調(diào)發(fā)展,培育了許多高產(chǎn)抗逆的農(nóng)作物新品種,支持了我國農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展和種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的技術(shù)需求。(一)地方品
人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒說明書2011/01/14
預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中白介素23(IL-23)含量。實驗原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗IL-23抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗IL-23抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的IL-23呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板:一塊(96孔)2
人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒說明書2011/01/14
人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒僅供體外研究使用!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中INH-B含量。實驗原理用純化的INH-B抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的INH-B抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的INH-B呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)
拉沙熱實驗室診斷與結(jié)果分析2011/01/14
拉沙熱(Lassafever)是由Lassa病毒弓起的傳染病,傳染性強(qiáng),臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、嘔吐、腹瀉,嚴(yán)重咽峽炎,淋巴結(jié)腫大,心肌炎和黏膜出血。該病潛伏期7~10d,zui短至1d,zui長至24d。拉沙病毒為一種多形體的RNA病毒,歸為沙粒病毒屬。拉沙病毒侵人人體后在上咽部繁殖,人血而致多器官受累,尤以肝臟為著。該病主要病理學(xué)損害為充血水腫、毛細(xì)血管出血和灶性壞死。肝臟病損的輕重與病毒數(shù)量相關(guān)。多乳鼠是本病的儲存宿主。帶病毒的鼠尿或患者尿污染食物可經(jīng)消化道傳播;直接接觸可經(jīng)皮膚黏膜傳播;患者有呼
小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒說明書2011/01/14
小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒僅供體外研究使用預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定小鼠組織勻漿、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液或其它相關(guān)生物液體中8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)含量。概述DNA鏈上的堿基鳥嘌呤C-8位易受到羥自由基及單線態(tài)氧的攻擊而發(fā)生羥化,生成加合物8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)。8-OHdG是DNA氧化損傷的特異產(chǎn)物,是*的內(nèi)源性及外源性因素對DNA氧化損傷的生物標(biāo)志物。8-OHdG是DNA氧化損傷的主要產(chǎn)
常用生化試劑作用2011/01/14
1.蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白。再尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mMTris-HCl(pH7.5),10mMCaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸鈉.溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀3.IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等.IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,
雞群均勻有效抗體產(chǎn)生的保證2011/01/14
當(dāng)今養(yǎng)雞業(yè)中,免疫接種已成為有效控制傳染性疾病和保障雞群健康的一種*的措施;免疫后能否產(chǎn)生均勻有效的抗體是衡量免疫效果的標(biāo)準(zhǔn)。雞病專業(yè)網(wǎng)jbzyw.com一、均勻有效抗體的概念:它是指免疫后的雞群個體間所產(chǎn)生抗體的有效性和均勻度,即抗體值在保護(hù)范圍內(nèi),抗體均勻度在85﹪以上,離散度在4以內(nèi)。雞病專業(yè)網(wǎng)jbzyw.com二、均勻有效抗體的重要性:雞病專業(yè)網(wǎng)jbzyw.com由養(yǎng)殖本身的群體性決定。集約化、規(guī)?;酿B(yǎng)殖本身具有很強(qiáng)的群體性。免疫后的雞群如果沒有產(chǎn)生均勻有效的抗體,那么抗體值低的雞只對
燈黃注射液對腦缺血模型動物的保護(hù)作用2011/01/14
燈黃注射液對腦缺血模型動物的保護(hù)作用評價燈黃注射液對腦缺血模型動物的保護(hù)作用。方法:以犬大腦中動脈結(jié)扎和大鼠頸內(nèi)動脈注射血栓復(fù)制局部腦缺血動物模型,測定犬血清堿性磷酸酶(AKP),肌酸激酶(CK)值,計算缺血區(qū)比例,對局部腦缺血大鼠進(jìn)行神經(jīng)癥狀和行為學(xué)的評分,計算腦梗死區(qū)百分比。以沙土鼠頸動脈結(jié)扎法復(fù)制動物全腦缺血模型,測定大腦皮層含水量,觀察海馬損傷程度并測定腦勻漿丙二醛(MDA),谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)及乳酸脫氫酶(LDH)的含量。結(jié)果:燈黃注射液可明顯降低犬結(jié)扎大腦中動脈后的A
PCR-RFLP-SSCP及測序用于霍亂弧菌ctx-AB基因多態(tài)2011/01/14
建立PCR-RFLP-SSCP及測序方法,用于分析霍亂弧菌腸毒素AB(ctx-AB)基因多態(tài)性。針對ctx-AB基因設(shè)計引物,擴(kuò)增片段為528bp,包括ctx-B編碼基因375bp,引物序列為5′-GGTGTAAAATTCCTTGACG-3′和5′-GGTTCGATGATGAGAAGC-3′。PCR產(chǎn)物經(jīng)RsaⅠ酶切為317bp和211bp2個片段。對酶切產(chǎn)物進(jìn)行單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)分析,銀染色法顯示結(jié)果。對不同SSCP類型測序,利用PCR方法直接對PCR產(chǎn)物測序?;魜y弧菌O1群古典型(C
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