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黃芪甲苷原料藥的制備方法2011/05/20
1)提?。阂渣S芪為原料,用水、低級醇或含水低級醇提取,濾過,得到黃芪提取液,其中低級醇的碳數(shù)為C1~C5,濃度為X,0%<X≤100%;2)濃縮:將所得提取液進行濃縮,得到60℃下相對密度為1.05~1.40的濃縮液;3)堿處理:調(diào)整濃縮液相對密度為60℃下1.05~1.20,加堿調(diào)溶液pH值為8~14或大于14,常溫放置12~48小時或于40~100℃加熱處理0.5~24小時;4)分離黃芪甲苷:將所得堿處理溶液,將其用酸調(diào)節(jié)pH值至5~9,再用有機溶劑萃取,分取有機溶液層;所述萃取用有機溶劑為
試管的主要用途及注意事項2011/05/18
試管的主要用途及注意事項主要用途:(1)盛取液體或固體試劑;(2)加熱少量固體或液體;(3)制取少量氣體反應(yīng)器;(4)收集少量氣體用;(5)溶解少量氣體、液體或固體的溶質(zhì)。使用注意事項:(1)盛取液體時容積不超過其容積的1/3;(2)加熱使用試管夾、試管口不能對著人。加熱盛有固體的試管時,管口稍向下傾斜約45°;(3)受熱要均勻,以免暴沸或試管炸裂;(4)加熱后不能驟冷,防止破裂。(5)加熱時要預(yù)熱,防止試管驟熱而爆裂。(6)加熱時要保持試管外壁沒有水珠,防止受熱不均勻而爆裂。
原代組織細胞的解離2011/05/17
膠原酶1.用滅菌的解剖刀或剪刀將組織切成3-4mm大小碎塊。用Hanks平衡鹽溶液(HBSS)將組織碎塊清洗數(shù)次。2.加入膠原酶(50-200單位/ml膠原酶HBSS)。3.在37℃下孵育4-18小時。加入3mMCaCl2可以提高解離效率。4.用滅菌的不銹鋼網(wǎng)或尼龍網(wǎng)過濾細胞懸浮液,將離散的細胞和組織片段與大塊的組織碎片分離。如需進一步解離,可向組織片段中加入新鮮的膠原酶。5.通過離心HBSS清洗細胞懸浮液數(shù)次。6.用培養(yǎng)基重懸細胞。計算細胞個數(shù),然后接種細胞進行培養(yǎng)。分散酶1.用滅菌的解剖刀或
自由基的產(chǎn)生方法2011/05/16
自由基的產(chǎn)生方法自由基,化學上也稱為“游離基”,是含有一個不成對電子的原子團。由于原子形成分子時,化學鍵中電子必須成對出現(xiàn),因此自由基就到處奪取其他物質(zhì)的一個電子,使自己形成穩(wěn)定的物質(zhì)。在化學中,這種現(xiàn)象稱為“氧化”。我們生物體系主要遇到的是氧自由基,例如超氧陰離子自由基、羥自由基、脂氧自由基、二氧化氮和一氧化氮自由基。加上過氧化氫、單線態(tài)氧和臭氧,通稱活性氧。體內(nèi)活性氧自由基具有一定的功能,如免疫和信號傳導過程。但過多的活性氧自由基就會有破壞行為,導致人體正常細胞和組織的損壞,從而引起多種疾病
真空干燥箱使用安全知識2011/05/13
真空干燥箱使用安全知識1.真空箱應(yīng)在相對濕度≤85%RH,周圍無腐蝕性氣體、無強烈震動源及強電磁場存在的環(huán)境中使用。2.真空箱工作室無防爆、防腐蝕等處理,不得放易然、易爆、易產(chǎn)生腐蝕性氣體的物品進行干燥。3.真空泵不能長時期工作,因此當真空度達到干燥物品要求時,應(yīng)先關(guān)閉真空閥,再關(guān)閉真空泵電源,待真空度小于干燥物品要求時,再打開真空閥及真空泵電源,繼續(xù)抽真空,這樣可延長真空泵使用壽命。4.干燥的物品如潮濕,則在真空箱與真空泵之間加入過濾器,防止潮濕氣體進入真空泵,造成真空泵故障。5.干燥的物品如
糖無氧酵解的具體問題2011/05/12
糖無氧酵解的具體問題1.概念:在無氧情況下,葡萄糖分解生成乳酸的過程。2.反應(yīng)過程糖酵解分三個階段(1)*階段:引發(fā)階段。由葡萄糖生成1,6-果糖二磷酸①葡萄糖的磷酸化、異構(gòu)化、再磷酸化生成1,6-果糖二磷酸:葡萄糖磷酸化成為葡萄糖-6-磷酸,由己糖激酶催化。為不可逆的磷酸化反應(yīng),酵解過程關(guān)鍵步驟之一,是葡萄糖進入任何代謝途徑的起始反應(yīng),消耗1分子ATP。②葡萄糖-6-磷酸轉(zhuǎn)化為果糖-6-磷酸,磷酸己糖異構(gòu)酶催化;③果糖-6-磷酸磷酸化,轉(zhuǎn)變?yōu)橛?磷酸果糖激酶催化,消耗1分子ATP,是第二個不可
冰醋酸使用安全2011/05/11
冰醋酸使用安全1、毒性屬低毒類,可經(jīng)消化道、呼吸道、皮膚吸收,對眼、皮膚和上呼吸道有刺激作用。2、短期過量暴露的影響吸入:吸入較高濃度的乙酸氣溶膠,可出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難、咽部刺激、咽干、鼻分泌物增加、鼻出血、頭疼等刺激性癥狀。眼睛接觸:引起眼瞼水腫、結(jié)膜充血。皮膚接觸:輕者出現(xiàn)紅斑,重者出現(xiàn)化學灼傷,有水泡和疼痛。3、長期暴露的影響長期吸入乙酸蒸氣或氣溶膠可對人體產(chǎn)生慢性作用,出現(xiàn)咳嗽、咳痰、胸部緊迫感及鼻卡他鼻竇炎等癥狀。個別的接觸者引起哮喘發(fā)作,局部皮膚發(fā)黑和角化、鼻黏膜和牙齒的腐蝕斑和貧血
關(guān)于阿莫西林2011/05/10
關(guān)于阿莫西林阿莫西林(Amoxicillin),又名安莫西林或安默西林,是一種zui常用的青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素,為一種白色粉末,半衰期約為61.3分鐘。在酸性條件下穩(wěn)定,胃腸道吸收率達90。阿莫西林殺菌作用強,穿透細胞壁的能力也強。是目前應(yīng)用較為廣泛的口服青霉素之一,其制劑有膠囊、片劑、顆粒劑、分散片等等。青霉素過敏及青霉素皮膚試驗陽性患者禁用。阿莫西林為半合成廣譜青霉素類藥,抗菌譜及抗菌活性與氨芐西林基本相同,但其耐酸性較氨芐西林強,其殺菌作用較后者強而迅速,但不能用于腦膜炎的治療。
瓊脂糖的優(yōu)點2011/05/09
目前多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳,其優(yōu)點如下。(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進行電泳。(2)瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻,含水量大(約占98%~99%),近似自由電泳,樣品擴散較自由電流,對樣品吸附極微,因此電泳圖譜清晰,分辨率高,重復性好。(3)瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結(jié)果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。(4)電泳后區(qū)帶易染色,樣品極易洗脫,便于定量測定。制成干膜可長期保存。目前,常用瓊脂糖作為電泳支持物,分離蛋白質(zhì)和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相結(jié)合,
劉氏染液介紹2011/05/05
劉氏染色液在臨床上的應(yīng)用非常廣泛,除了主要作為血球形成分類染色之外,亦可用于骨髓抹片、瘧疾和血液寄出蟲之快速染色;也可以當作組組學抹片的簡易染色。操作所須時間極短,只要2分種即可完成所有。細胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程,此過程既有物理吸附作用,又有化學親和作用。·步驟簡單,易操作·染色效果優(yōu)于瑞氏染液(Wright'sstain),顏色鮮明,判讀容易標準染法1.加LiuASolution(約1-2ml)染色30秒后。2.再將LiuBSolution滴加于A液上面(滴加之量約
細胞的復蘇實驗2011/05/04
細胞的復蘇實驗一.實驗前準備:1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。二.取出凍存管:1.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。三.迅速解凍:1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。四.平衡離
抗血清的原理2011/05/03
抗血清的原理原理:抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng),一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenicdeterminant),另一方面取決于機體的免疫狀態(tài),當具備以上兩個條件后,抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)??乖姆N類繁多,包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一
血氣分析酸堿失衡的判斷2011/04/29
血氣分析酸堿失衡的判斷酸堿平衡紊亂的診斷可分為兩步:*步:初步觀察pH、PCO2:以及酸堿指標來判斷歸于代謝性酸中毒、代謝性堿中毒、呼吸性酸中毒及呼吸性堿中毒4種中的哪一種基本的紊亂類型,進而判斷機體的代償情況。應(yīng)將酸堿紊亂的時間因素考慮在內(nèi)。通氣換氣來代償代謝性紊亂幾乎是立刻就開始的,并在12h達到峰值。腎臟對通氣障礙的代償則需等到第二天才顯現(xiàn)出來,并于6天左右完成。第二步:酸堿平衡紊亂的病因診斷,應(yīng)包含:①病人的一般體征、病史、神志、水平衡狀態(tài)和目前的用藥情況。②電解質(zhì)情況,尤其是鉀離子、氯
試劑盒簡介2011/04/28
試劑盒簡介試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中山羊內(nèi)啡肽(EP)水平。用純化的山羊內(nèi)啡肽(EP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)啡肽(EP),再與HRP標記的內(nèi)啡肽(EP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)啡肽(EP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中山羊內(nèi)啡肽(EP)濃度。樣本處理及要求:1.血清:室
白細胞介素的概念以及發(fā)現(xiàn)過程和用途2011/04/27
白細胞介素的概念以及發(fā)現(xiàn)過程和用途由于zui初是由白細胞產(chǎn)生又在白細胞間發(fā)揮作用,所以由此得名,現(xiàn)仍一直沿用。白細胞介素interleukin縮寫為IL。關(guān)于免疫反應(yīng)的表達和調(diào)節(jié),有來源于淋巴細胞或巨噬細胞等許多因子參與。來源于淋巴細胞的有淋巴細胞活素,來源于巨噬細胞的總稱為monokine,其中的各個因子的生物活性各有不同(例如巨噬細胞活化,促進T細胞繁殖等),因子自身的物理化學性質(zhì)多不清楚。1979年這方面的研究團體提出了在淋巴細胞活素及巨噬細胞因子(monoki-ne)中,已作為一種分子提
培養(yǎng)基的分類方式2011/04/26
培養(yǎng)基的分類方式一.按成分的不同分1.天然培養(yǎng)基主要成分是復雜的天然有機物質(zhì),如馬鈴薯、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等。這些復雜天然有機物質(zhì)的成分不*了解,每次所用的原料,其中各成分的數(shù)量也不恒定。這類培養(yǎng)基是實驗室常用的培養(yǎng)基,例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基等。2.合成培養(yǎng)基用化學成分*了解的純試劑配制而成的培養(yǎng)基,如高氏1號培養(yǎng)基,查氏培養(yǎng)基等。一般用于營養(yǎng)代謝、分類鑒定、菌種選育、遺傳分析等。二.按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分1.固定培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑即為固體培養(yǎng)基。實驗用的凝固劑
血清前白蛋白的臨床應(yīng)用2011/04/25
血清前白蛋白的臨床應(yīng)用近來BECKMAN公司新生產(chǎn)的PAB(Prealbumin)前白蛋白試劑在全自動生化分析儀上試運行。此試劑盒采用免疫透射比濁法,測定準確,速度快,血清前白蛋白在臨床上有較廣泛的應(yīng)用,適合于開展常規(guī)項目。1血清前白蛋白(Prealbumin)是評價和監(jiān)測患者營養(yǎng)狀態(tài)的金標準,可早期認識營養(yǎng)缺乏,幫助患者盡快康復,降低并發(fā)癥。前白蛋白在肝臟和胃腸黏膜細胞產(chǎn)生,可代表臟器蛋白質(zhì)狀況,半衰期短(2d),排除迅速,對營養(yǎng)狀況的急性改變很敏感。處于營養(yǎng)不良危險狀態(tài)的人員應(yīng)該監(jiān)測前白蛋白
改良Lowry法蛋白定量試劑盒2011/04/22
改良Lowry法蛋白定量試劑盒許多年來Lowry法是zui常用也是被引用次數(shù)zui多的蛋白質(zhì)定量方法。其原理是在堿性條件和福林酚Folin-CiocalteuReagent存在下,銅離子與蛋白質(zhì)形成可溶性蘭色復合物,在750nm有zui大光吸收值。Lowry法的優(yōu)點是靈敏度高,對脂質(zhì)、SDS等干擾物質(zhì)不甚敏感。經(jīng)典Lowry法的主要缺點是,每次蛋白定量之前必須用兩種不同的試劑A和B(ReagentAandB)新鮮配制堿性銅試劑(ReagentC)。堿性銅試劑(ReagentC)不穩(wěn)定因而必須每天
一抗的選擇2011/04/21
一抗的選擇檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:1.分析試驗應(yīng)用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過適用于何種分析類型,如:可以應(yīng)用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種分析試驗驗證,如果抗體不適用某些分析試驗,則會在抗體說明書上標注出來不適于某分析試驗。2.樣本的物種應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋
細胞培養(yǎng)基分類2011/04/20
細胞培養(yǎng)基分類培養(yǎng)是既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基的種類很多,按其物質(zhì)狀態(tài)分為半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類;按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。1、天然培養(yǎng)基:使用zui普遍的天然培養(yǎng)基是血清,基本以小牛血清zui普遍。血清由于含有多種細胞生長因子、促貼附因子及其多活性物質(zhì)。與合志培養(yǎng)基合用,能使細胞碩利增殖生長。常見使用zui為5-20%。2、合成培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)細胞所需物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴格配制而成的。內(nèi)含碳水化合物、氨
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