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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
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ELISA試劑盒抗原抗體反應(yīng)2023/06/20
1可逆性Ag·Ab的解離程度與K值有關(guān)。高親和力抗體的抗原結(jié)合點與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合,兩者結(jié)合牢固,不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性,因此可用親和層析法來提純抗原或抗體。在抗血清中,特異性的IgG抗體僅占總IgG中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體,稱為親和層析純抗體,應(yīng)用于免疫測定中可得到更好的效果。2合適比例在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復(fù)合物(沉淀)的量見圖1-4。曲線的高峰部分是抗原抗體比例合適的范圍,稱為等價帶(zoneofequiva
PCR實驗出現(xiàn)凝膠涂布貨片狀條帶彌散的原因2023/06/13
PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR),一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,PCR的大特點,是能將微量的DNA大幅增加。PCR的原理:PCR的基本過程類似于DNA的天然復(fù)制,特異性依賴于與靶序列兩端互補的Oligo引物。整個過程由變性-退火-延伸3個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。PCR實驗中擴增產(chǎn)物在凝膠中涂布或成片狀條帶彌散的原因如下:(1)酶量過高。減少酶量;酶的質(zhì)量差,調(diào)換另一來源的酶。(2)dNTP濃度過高。
常溫細胞處理方式2023/06/06
細胞(Cells)是由英國科學(xué)家羅伯特·胡克(RobertHooke,1635~1703)于1665年發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)時他用自制的光學(xué)顯微鏡觀察軟木塞的薄切片,放大后發(fā)現(xiàn)一格一格的小空間,[1]就以英文的cell命名之,而這個英文單字的意義本身就有小房間一格一格的用法,所以并非另創(chuàng)的字匯。當(dāng)收到了常溫的細胞,正確的處理方式應(yīng)該是怎樣的。一、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。二、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量叢瓶壁脫落;先
ELISA試劑盒實驗廢液的正確處理方法2023/05/30
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒實驗之后,為達到對環(huán)境的維護,研域生物特別告訴您:實驗廢液的正確處理方法。1.存放廢液的專用桶必須遠離電源、氣源、火源,采取嚴(yán)格的安全措施。2.必須倒入專用的收集桶內(nèi),嚴(yán)禁倒入下水道。3.凡存放廢液的桶上必須用標(biāo)簽紙標(biāo)明所存廢液的主要成分名稱。4.嚴(yán)禁將化學(xué)試劑瓶
血清對細胞的作用2023/05/23
血清對于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長和增殖的大多數(shù)細胞系來說是需要的,因為大多數(shù)單獨的培養(yǎng)基并不能提供細胞生長所需要的全部營養(yǎng)。血清是非常復(fù)雜的混合物,成分多樣,對細胞生長具有促進作用。1.提供基本營養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)。2.提供激素和各種生長因子,如胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)、成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結(jié)合蛋白,可攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素
細胞培養(yǎng)的小技巧2023/05/16
細胞培養(yǎng)的小技巧1.切記,細胞培養(yǎng)基的儲存條件是2-8攝氏度。如果細胞培養(yǎng)基不小心被凍,您應(yīng)該融化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生,培養(yǎng)基可以正常使用,如果出現(xiàn)沉淀,只能丟棄這些培養(yǎng)基。2.貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基,可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時,碳酸氫納導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口,在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘,來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。3.當(dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時,降低至少在有血清培養(yǎng)基
試劑盒的準(zhǔn)備、樣品收集、處理及保存方法2023/05/09
一.樣品收集及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液--1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿---將組織加入適量生理鹽水搗碎,1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存----如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-80℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血
血清的主要成分2023/04/27
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和生長因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作
決定ELISA實驗成敗的關(guān)鍵-洗滌2023/04/20
很多人做ELISA實驗,覺得真簡單,無非就是加樣,保溫,洗滌等操作步驟??墒菍嶒灲Y(jié)果經(jīng)常不盡人意。今天小編就給大家總結(jié)一下ELISA實驗洗滌要點,掌握這些,實驗Soeasy!洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)聚,但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯待塑料對蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在ELISA測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。在標(biāo)本和結(jié)
elisa試劑盒的實驗操作的注意事項2023/04/13
實驗操作控制:1、嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。2、加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗。3、封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。4、用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后*在吸水紙上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。5、合理安
ELISA檢測方法的三大特點2023/04/06
ELISA檢測是一種免疫檢測方法,通常用于測量生物樣品中的抗體或抗原,包括蛋白質(zhì)或糖蛋白。像其他免疫檢測法一樣,它們依靠抗體與目標(biāo)的結(jié)合來促進檢測。通常情況下,ELISA檢測是在96孔板中進行的,這種形式使其適合于一次篩選許多樣品。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、細胞裂解液、唾液、組織裂解液和尿液都是用于這些檢測的常見樣品類型,但理論上大多數(shù)液體樣品類型都可以使用。上海研域主要供應(yīng)各種elisa試劑盒,對于有關(guān)ELISA實驗試劑的溫度與條件還需要按照說明書來進行。下面是研域生物技術(shù)為大家介紹ELIS
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)操作步驟2023/03/30
ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中為廣泛為靈敏的技術(shù)手段。下面小編簡單介紹一下酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)操作步驟。詳細步驟如下:1.用靶蛋白(稀釋于50mM碳酸鹽緩沖液PH9.0)包被反應(yīng)板。濃度應(yīng)該做滴度來獲得。但對于純化的抗原在1μg/ml濃度,每孔50μl一般情況下足夠。用薄膜覆蓋4oC孵育過夜。2.移去抗原溶液。加入封閉液200μl/孔(PBScontaining1%BSAand0.02%azide)以封閉非特異蛋白的結(jié)合。室溫下卵育1–2小時,或4oC過夜。3.移去封
ELISA試劑盒發(fā)展表現(xiàn)2023/03/23
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。近年來,EIA技術(shù)取得了顯著的發(fā)展,主要表現(xiàn)在以下方面:1.繼單克隆抗體后的第三代抗體基因工程抗體的應(yīng)用,明顯地提高了檢測的特異性,基本消除了抗原、抗體間的非特異xingjiao叉反應(yīng),保證了分析的準(zhǔn)確性。2.分析方式的改進與多樣化提高了試驗的敏感性(1)除早期的競爭法,間接法外,又發(fā)展了雙抗原夾心法測抗體,偶聯(lián)酶標(biāo)記法測抗原,橋聯(lián)酶免疫分析,酶放大免疫分析技術(shù)等。(
ELISA的移液和洗滌技術(shù)2023/03/16
免疫檢測法的精確性表現(xiàn)為單次實驗孔間(批內(nèi))的重復(fù)性和多次實驗之間(批間)的重復(fù)性。CV值高則表明精確度低,通常由以下兩個原因造成:移液技術(shù)和洗滌技術(shù)。移液技術(shù)1.移液時,槍頭應(yīng)對準(zhǔn)孔中央,避免接觸孔壁及底部。2.移液后輕輕晃動混勻試劑。3.如果您的樣品具有黏性,請預(yù)先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出。4.移液不充分或移液體積不均,說明移液器需要校正。必要時請檢查移液器并重新校正。5.加樣時,不同的試劑標(biāo)準(zhǔn)品和樣本間都要確保更換槍頭,避免交叉污染。6.確保使用合適的
ELISA產(chǎn)品相關(guān)要素2023/03/08
小伙伴們?yōu)镋LISA實驗選購試劑盒時,是不是有很多問號?選什么物種?什么指標(biāo)?什么檢測限?怎樣的精密度,稀釋線性,特異性是優(yōu)秀的?今天小編整理了ELISA產(chǎn)品相關(guān)要素,助您五分鐘掌握如何選到適合自己實驗的試劑盒。ELISA產(chǎn)品選擇要素1、根據(jù)實驗物種及待檢樣品性質(zhì)來選擇種屬:人、小鼠、大鼠、雞、牛、猴等;樣本類型:血清、血漿、組織培養(yǎng)上清、組織或細胞裂解物。2、根據(jù)樣品中檢測物水平選擇寬動力學(xué)檢測范圍:對樣品種待測物水平?jīng)]有任何參考數(shù)據(jù);高靈敏度試劑盒:待檢物含量很低。3、根據(jù)樣本可獲得性來選擇
ELISA試劑常見類型-雙抗夾心法,你要的都在這里!2023/02/24
ELISA是以體外抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原抗體特異性反應(yīng)與酶的高效催化作用相結(jié)合的一種檢測方法,靈敏度可達皮克(pg/mL)水平。它是目前商業(yè)應(yīng)用為成熟的免疫分析方法之一,在醫(yī)學(xué)實驗、臨床診斷、生物制藥方面的運用也極為廣泛。目前,常見的ELISA類型有四種:雙抗夾心法、直接法、間接法和競爭法。其中,雙抗夾心法是為常用的一種,分雙抗體夾心和雙抗原夾心。研域?qū)⒁噪p抗體夾心法為例,和大家分享相關(guān)知識~實驗原理雙抗體夾心法,其基本原理是將定量的包被抗體以物理吸附的方法固定于微孔板表面,然后加入待檢標(biāo)本
ELISA試劑新品免疫,腫瘤,心血管病相關(guān)指標(biāo)又雙叒增加啦!2023/02/16
1、指標(biāo)簡述顆粒酶B是絲氨酸蛋白酶顆粒酶家族的一員,專門存在于細胞毒性T淋巴細胞(CTL)和自然殺傷細胞(NK)的顆粒中。顆粒酶B利用Caspase3、Caspase8和Bid等底物在顆粒介導(dǎo)的細胞凋亡中發(fā)揮重要作用。作為人類基因組中確定的五種顆粒酶(A、B、H、K和M)之一,顆粒酶B(32kDa)的生物學(xué)功能及其在健康和疾病方面的用途得到了研究。GranzymeB的蛋白酶活性受到SerpinB9/蛋白酶抑制劑9的嚴(yán)格控制。人類GranzymeB的氨基酸序列分別與犬類、大鼠和小鼠相同,分別為71
研域生物就流式細胞詳細介紹2023/02/08
流式細胞術(shù)在過去30年里得到迅速發(fā)展,在免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細菌學(xué)、病毒學(xué)、癌癥生物學(xué)和傳染病學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。比如,流式細胞術(shù)對研究免疫系統(tǒng)狀態(tài)及其對傳染病和癌癥的反應(yīng)非常重要,它可以表征來自血液和骨髓的混合細胞群,以及由淋巴結(jié)、脾、粘膜組織、實體腫瘤等固體組織分解成的單個細胞。除了分析細胞外,流式細胞術(shù)另一個主要應(yīng)用是對細胞進行分選,以滿足使用者進一步的分析需求。本文將主要以細胞生物學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)為例,介紹流式細胞術(shù)在實際中的應(yīng)用。細胞生物學(xué)與免疫學(xué)免疫分型:免疫分型在流式細胞術(shù)
研域生物ELISA試劑通關(guān)樣本篇血清血漿2023/02/02
血清和血漿的區(qū)別血清:血液凝固析出的淡透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。其周圍所析出之淡透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。血漿:相當(dāng)于結(jié)締組織的細胞間質(zhì)。是血液的重要組成分,呈淡液體(因含有膽紅素)。血漿的化學(xué)成分中,水分占90~92%,溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血清與血漿從表面上看似乎沒有什么不同,但其內(nèi)在的主要區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原,是未經(jīng)抗凝處
關(guān)于ELISA試驗檢測結(jié)果應(yīng)具備的三條件2023/01/11
1、標(biāo)本因素血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,嚴(yán)格遵照劃定操縱,必能得出正確的結(jié)果。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定需用稀的血清,可在
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