手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
| 一、Fluo-3AM的理化性質(zhì) 顏色及形狀：橘紅色液體 純度：，大于95%（液相） 溶解性：溶于DMSO 吸收波長/發(fā)射波長：506nm /526nm（低/高鈣） 消散系數(shù)：86000/Mcm（506nm） 保存與使用：粉狀的FLUO-3AM應保存于-20度以上。建議使用DMSO作為溶媒。在溶解前，F(xiàn)LUO-3AM和DMSO均須放置至室溫。溶解過程可能會比較慢。用無水的DMSO溶解的FLUO-3AM長期保存，應嚴格密封，并保存于-20度。使用前，將保存液放置至室溫后再打開?？杀苊釧M探針在長期的保存過程中水解。 二、Fluo-3AM的工作原理 FLUO-3廣泛用于長波長的熒光鈣指示劑。其在506NM處被吸收，可以被氬離子激光的488nm激發(fā)光激發(fā)，便于檢測。FLUO-3在沒有同鈣結(jié)合的情況下，無熒光產(chǎn)生。但是，在與鈣結(jié)合后，熒光（526nm）增強至少40倍。Fluo-3 AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM的熒光非常弱，其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。Fluo-3 AM進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細胞內(nèi)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合，結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強的熒光，zui大激發(fā)波長為506nm，zui大發(fā)射波長為526nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm左右，發(fā)射波長為525-530nm。 三、Fluo-3AM的應用 1、過程概述 用于細胞內(nèi)鈣離子檢測時，F(xiàn)luo-3 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM的適當溶液和細胞一起在20-37℃孵育15-60分鐘進行熒光探針裝載，隨后適當洗滌，洗滌后可以考慮適當再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細胞內(nèi)*轉(zhuǎn)變成Fluo-3。然后在流式細胞儀上進行檢測。 2、Fluo-3AM使用液的配置 100ug的Fluo-3AM，分子量是1219.9。按實際需要的摩爾濃度折算，無水DMSO溶解。一般配置成1~5mM的DMSO儲存液。如出現(xiàn)難溶現(xiàn)象，可以用20%的F127的DMSO溶液助溶。 四、注意事項： 1、熒光染料有淬滅問題，應盡量避光保存； 2、實驗時注意個人防護，戴手套、口罩； 五、應用舉例 （一）配置與貯存 1、基本信息 分子量：1129.9 包裝單位重量：0.1mg 貯存濃度：5000μM/L 使用終濃度：5μM/L 2、貯存液的配制（5000μM/L） 按照說明書，計算0.1mg 的摩爾數(shù)為0.089μM ，則需加DMSO18uL，微量加樣器反復吹打混勻后分裝，按說明書要求避光-20度冰凍保存。 （二）應用 每毫升細胞懸液中加入1 uL，則Fluo-3AM的使用終濃度為5μM/L 訂購信息：
|
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的，應在授權范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心