一、實(shí)驗(yàn)方案
1.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
以透過豬皮進(jìn)入擴(kuò)散池內(nèi)的透明質(zhì)酸含量為指標(biāo),基于豬皮擴(kuò)散模型,評(píng)價(jià)玻尿酸水感細(xì)致面膜單獨(dú)使用和搭配富氫干膜布使用時(shí)透明質(zhì)酸鈉的透皮功效。
1.2 待測(cè)樣本信息
玻尿酸水感細(xì)致面膜、富氫干膜布。
1.3 待測(cè)指標(biāo)
以透明質(zhì)酸原料中的透明質(zhì)酸鈉為測(cè)試指標(biāo),其在玻尿酸水感細(xì)致面膜內(nèi)含量為 0.03%。
1.4 主要試劑及設(shè)備
待測(cè)樣、生理鹽水。
豬皮(乳豬背部皮膚),剝離豬皮并剪成小圓片,用游標(biāo)卡尺測(cè)量厚度,選 擇厚度在 0.5~0.6 mm 之間的豬皮。藥物透皮擴(kuò)散試驗(yàn)儀、1525μ 型高效液相色譜儀。
1.5實(shí)驗(yàn)分組
組別 | 類型 | 培養(yǎng)條件 | 檢測(cè)方法 |
1 | 玻尿酸水感細(xì)致面膜 | 37℃恒溫水浴 | HPLC法 |
2 | 玻尿酸水感細(xì)致面膜+富氫干膜布 | 37℃恒溫水浴 | HPLC法 |
二、測(cè)試方法
2.1 透明質(zhì)酸鈉透皮擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)
用移液槍吸取 6.5mL 生理鹽水加入擴(kuò)散室中,放置豬皮并用夾子夾好立式擴(kuò)散池,將面膜裁剪合適大小后平鋪于豬皮上,用保鮮膜封住擴(kuò)散池,放入 37℃恒溫水浴中,磁力攪拌速度為 300rpm。放置 15 min 后,用移液槍吸取 0.3 mL擴(kuò)散室內(nèi)溶液,待留存此溶液后補(bǔ)充加入 0.3 mL 生理鹽水。再次放入恒溫水浴中,30 min、1h、2h 后做相同取樣操作。
2.2 高效液相色譜測(cè)定含量
將取樣留存的溶液透過 0.45μm 的濾膜,用微量進(jìn)樣針吸取10μL 打入液相色譜中,待樣品峰被洗脫后計(jì)算峰面積。以峰面積與原液面積比標(biāo)定擴(kuò)散池中透明質(zhì)酸鈉濃度(原液透明質(zhì)酸鈉濃度已知)。
固定相: C18 柱(4.6×250mm,5μm)
流動(dòng)相:乙腈:水=90:10
流速:1mL/min
柱溫:25℃
檢測(cè)波長:194nm
四、測(cè)試結(jié)論
玻尿酸水感細(xì)致面膜搭配富氫干膜布使用時(shí)透明質(zhì)酸鈉的透皮速率顯著 高于玻尿酸水感細(xì)致面膜單獨(dú)使用,初始透皮速率(15min 內(nèi))是玻尿酸水感細(xì)致面膜單獨(dú)使用的約 2.8 倍,120min 透皮率可達(dá)到 27.1%。
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