手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
近些年微生物技術發(fā)展迅猛，在發(fā)酵制藥生產(chǎn)中發(fā)揮的作用也越來越大，而且對全丨世界范圍內(nèi)的醫(yī)療事業(yè)和環(huán)境保護都有著積極意義，成為一種安全有效地生產(chǎn)價格低廉、純凈的生物制藥的新途徑。
發(fā)酵完成后，發(fā)酵產(chǎn)物存在于發(fā)酵液中，包括菌體細胞、蛋白、糖、水等，提取產(chǎn)物成了一項非常重要的任務，下面分享一下提取發(fā)酵液中產(chǎn)物的一點經(jīng)驗。
1樣品處理：
1. 發(fā)酵液調(diào)酸，析出大部分蛋白（產(chǎn)物不怕酸的前提下，也可其他方法除蛋白）
2. 離心，過濾，除掉大部分菌體細胞和蛋白
2樣品分析條件：
色譜柱：
Phenomenex Luna C18（2） 5μm 100? 4.6×150mm
流動相：A：水（0.1%TFA）
B：乙腈
流速：1mL/min
波長：215nm
3樣品制備條件：
儀器：
博納艾杰爾科技Cheetah 制備純化系統(tǒng)
色譜柱：Flash AQ C18 20-35μm 100? 80g 一支
流動相：A：水（0.1%TFA）
B：乙腈
流速：50mL/min
波長：215nm，235nm
上樣量：1.3L（3.73g）
總結
1.發(fā)酵液中成分復雜，容易污染制備色譜柱，因此，我們選擇Flash 大顆粒填料制備柱
2. 提前除去大部分蛋白，以免進樣后析出，堵塞柱篩板
3.發(fā)酵液為水樣，直接上樣會造成C18填料疏水塌陷，出現(xiàn)不保留，因此我們選擇AQ C18親水Flash柱，可純水相洗脫，直接泵抽上樣，只要目標產(chǎn)物有保留，上樣體積可達6倍柱體積以上
相關產(chǎn)品
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的，應在授權范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心