伯樂電泳儀使用方法
1. 準備工作
材料準備:
準備好凝膠材料(瓊脂糖或聚丙烯酰胺)。
準備電泳緩沖液(如TBE或TAE)。
準備待分析的樣品(DNA、RNA或蛋白質(zhì))。
2. 制備凝膠
溶解凝膠材料:
根據(jù)需要稱取適量的瓊脂糖或聚丙烯酰胺。
將其加入緩沖液中,加熱至溶解。
倒入模具:
將溶解后的凝膠倒入電泳模具,插入梳子以形成樣品孔,待凝膠固化。
3. 裝配電泳儀
去除梳子:
凝膠固化后小心取出梳子,形成樣品孔。
放置凝膠:
將凝膠放入電泳槽中,確保其與緩沖液接觸。
加入緩沖液:
在凝膠上方和槽內(nèi)加入適量的電泳緩沖液,確保樣品孔被覆蓋。
4. 加樣
準備樣品:
將樣品與上樣緩沖液混合,準備加樣。
加樣:
使用移液器將樣品小心地加入到樣品孔中,避免樣品混入相鄰孔。
5. 運行電泳
連接電源:
確保電源與電泳儀連接正確。
設(shè)置電壓:
根據(jù)實驗需求設(shè)置適合的電壓(一般為80-150 V)。
啟動電泳:
打開電源,觀察電泳過程中的樣品遷移情況。
6. 觀察與終止電泳
監(jiān)測樣品的遷移,適時記錄電泳時間。
電泳結(jié)束后,關(guān)閉電源,小心取出凝膠。
7. 后處理
染色:
根據(jù)需要使用染色液(如EB或SYBR)染色樣品。
成像:
使用成像設(shè)備記錄電泳結(jié)果。
注意事項
安全性:
確保電源線無損壞,避免接觸水分,操作時注意電氣安全。
樣品量:
加樣時避免過量,以免影響分離效果。
緩沖液:
確保緩沖液配比正確,以保證分離效果的可靠性。
電泳時間與電壓:
根據(jù)樣品類型和凝膠厚度選擇合適的電泳時間和電壓,避免過度電泳導致樣品擴散。
觀察進度:
在電泳過程中,適時觀察樣品的遷移情況,確保實驗進展符合預(yù)期。
凝膠處理:
在取出凝膠時小心,避免損壞凝膠結(jié)構(gòu)。
遵循以上使用方法和注意事項,可以有效提高電泳實驗的成功率和結(jié)果的可靠性。
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