優(yōu)質(zhì)生鮮奶的分為特優(yōu)級(jí)、優(yōu)級(jí)、良級(jí)和合格級(jí)四個(gè)等級(jí),而分級(jí)的依據(jù)主要是檢測判斷鮮奶是否品質(zhì)高的4個(gè)核心指標(biāo)數(shù)值,即乳脂率、乳蛋白率、菌落總數(shù)和體細(xì)胞數(shù)。在奶業(yè)發(fā)達(dá)國家的標(biāo)準(zhǔn)里,上述四個(gè)核心指標(biāo)的數(shù)值基本要達(dá)到牛奶中的乳脂肪含量不低于3.3%,乳蛋白含量不低于3.0%,體細(xì)胞數(shù)不超過75萬個(gè)/ML,菌落總數(shù)不超過10萬CFU/ML。以下是使用恒溫恒濕培養(yǎng)箱測定純牛奶菌落總數(shù)的一般步驟:
1. 取樣:取10ml純牛奶置盛有90ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1-2分鐘,制成1:10的樣品勻液。
2. 配制濃度梯度:用1ml無菌吸管或移液槍吸取1:10樣品勻液1ml,沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面),用漩渦震蕩器混合均勻,制成10-2的樣品勻液。按上述操作程序,制備10-3、10-4系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1ml無菌吸管或吸頭。
3. 接種:取一定量的稀釋液,使用無菌技術(shù)將其接種到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上。常見的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂或平板計(jì)數(shù)瓊脂。
4. 培養(yǎng):將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱中,設(shè)置適宜的溫度和濕度條件。一般培養(yǎng)溫度為 37°C,培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)培養(yǎng)基和檢測要求而定,通常為 24-48 小時(shí)。
5. 計(jì)數(shù):培養(yǎng)結(jié)束后,觀察培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)量??梢允褂糜?jì)數(shù)器或手動(dòng)計(jì)數(shù)方法,記錄每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)。
6. 計(jì)算:根據(jù)記錄的菌落數(shù),計(jì)算出原始樣品中的菌落總數(shù)。通常使用菌落計(jì)數(shù)公式進(jìn)行計(jì)算,如平板計(jì)數(shù)法或稀釋倍數(shù)法。
7. 結(jié)果報(bào)告:將計(jì)算得到的菌落總數(shù)報(bào)告為每毫升或每克樣品中的菌落數(shù)量。
需要注意的是,在進(jìn)行菌落總數(shù)測定時(shí),要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,以避免外部污染對結(jié)果的影響。此外,恒溫恒濕培養(yǎng)箱的條件應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行設(shè)置和控制,以確保培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。
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