ABI Veriti PCR儀售后維修與使用操作步驟:
ABI Veriti PCR儀操作步驟
1、打開PCR儀的熱蓋,插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。
2、打開PCR儀的電源,儀器程序開始初始化,需等待幾分鐘。
3、初始化完成后,顯示主菜單:
4、點(diǎn)“Browse/New Methods”,進(jìn)入PCR程序列表:
5、可以直接點(diǎn)一個(gè)PCR程序,選擇“Start Run”運(yùn)行;點(diǎn)右邊的符號(hào),可以選 擇不同的文件夾。如要新建一個(gè)PCR程序,點(diǎn)“New”,出現(xiàn)PCR程序:
6、添加一段程序:點(diǎn)中上方的“Stage”位置,該位置變紅;再點(diǎn)“Add”,軟件將加入一段新的程序。
7、修改循環(huán)數(shù)、溫度、時(shí)間:點(diǎn)中循環(huán)次數(shù)、溫度或時(shí)間位置,下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點(diǎn)數(shù)字鍵,出現(xiàn)合適數(shù)字后,點(diǎn)“Done”確定。
8、增加一個(gè)步驟:點(diǎn)“Step”位置,該位置變紅;再點(diǎn)“Add”,軟件將加入一個(gè)新的步驟。
9、刪除一個(gè)步驟:點(diǎn)“Step”位置,在點(diǎn)“Delete”,軟件將該步驟刪除。
10、建立梯度模式:
1)點(diǎn)中一個(gè)步驟,再點(diǎn)“Option”鍵,出現(xiàn)選項(xiàng)如下
2)點(diǎn)“VeriFlex step”,出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:
輸入6個(gè)梯度溫度,溫度下方的“1-2”是指對(duì)應(yīng)的1、2兩行加熱孔,全部輸好后,點(diǎn)“Done”確定。注意:相鄰的兩個(gè)梯度溫度之差不能超過5℃!
11、建立漸變模式:
1)點(diǎn)中一個(gè)步驟,再點(diǎn)“Option”鍵,出現(xiàn)選項(xiàng)如下
2)點(diǎn)“Auto Delta”,出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口。
點(diǎn)“Staring Cycle”,輸入起始循環(huán)數(shù);點(diǎn)“Delta Temperature”,輸入溫度變化值;點(diǎn)“Delta Time”,輸入時(shí)間變化值。漸變模式適用于touchdown PCR,可以提高PCR反應(yīng)的特異性。例:輸入起始循環(huán)數(shù)為2,溫度變化值為+0.5℃,時(shí)間變化值為+5s,則表示從第2個(gè)循環(huán)開始,每循環(huán)一次升溫0.5℃,時(shí)間增加5S.
12、增加暫停步驟:
1)點(diǎn)中一個(gè)步驟,再點(diǎn)“Option”鍵,出現(xiàn)選項(xiàng)如下
2)點(diǎn)“Pause”,出現(xiàn)如下窗口。
輸入暫停的起始位置,暫停間隔和暫停時(shí)間,點(diǎn)“Done”確定。上圖表示每隔10個(gè)循環(huán)暫停10s,在10個(gè)循環(huán)的第1個(gè)循環(huán)之前暫停。
13、編輯PCR程序完成后,點(diǎn)“Save”保存。
點(diǎn)“Run Method”,輸入PCR程序名稱;點(diǎn) ,選擇保存PCR程序的文件夾(如 果要保存在USB文件夾中,需要先插U盤)。再輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度(這兩項(xiàng)在運(yùn)行程序時(shí)可以修改)。點(diǎn)“SaveδExit”確定。
14、回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序。
15、點(diǎn)“Start Run”,出現(xiàn)運(yùn)行參數(shù)設(shè)置窗口
輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度,點(diǎn)“Start Run Now”開始運(yùn)行PCR程序。
16、儀器運(yùn)行選中的PCR程序,顯示運(yùn)行監(jiān)視窗口
A- 運(yùn)行狀態(tài)欄,顯示運(yùn)行溫度和剩余時(shí)間
B- 加熱警示標(biāo)記
C- 階段指示
D- 步驟溫度
E- 步驟時(shí)間
F- 步驟指示
G- 狀態(tài)報(bào)告,顯示日期、時(shí)間和儀器狀態(tài)
H- 延伸箭頭,點(diǎn)箭頭可以顯示更多的步驟
16、暫停運(yùn)行: 點(diǎn)“Pause Run”,儀器暫停,出現(xiàn)暫停選項(xiàng)欄
“Remaining Time”顯示暫停剩余時(shí)間,“Elapse Time”顯示已暫停時(shí)間。
如果需要修改暫停時(shí)間,點(diǎn) ,輸入時(shí)間值,點(diǎn)“Done”確定;點(diǎn)“Resume Run”, 結(jié)束暫停,繼續(xù)運(yùn)行PCR程序。
7、終止運(yùn)行:點(diǎn)“Stop”可以終止整個(gè)PCR程序。
18、反應(yīng)報(bào)告:
PCR程序結(jié)束后,儀器會(huì)自動(dòng)生成反應(yīng)報(bào)告,顯示當(dāng)次反應(yīng)的各項(xiàng)指數(shù)。該報(bào)告可以保存和打印。
19、PCR反應(yīng)結(jié)束后,打開熱蓋,取出樣品,關(guān)閉儀器電源。并開蓋放置,使熱蓋和加熱模塊正常降溫。
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