【醫(yī)學(xué)前沿】生物力學(xué)研究案例分享
在生物醫(yī)療行業(yè),Instron 的 ElectroPuls 動(dòng)靜態(tài)力學(xué)試驗(yàn)設(shè)備擁有廣泛的客戶群體,在生物力學(xué)測(cè)試和研究中擁有豐富的測(cè)試經(jīng)驗(yàn)。本文將引用客戶測(cè)試案例,對(duì)動(dòng)物骨骼、骨科手術(shù)、血管組織及韌帶力學(xué)研究進(jìn)行分享。
*溫馨提示:本文涉及真實(shí)試驗(yàn)場(chǎng)景,圖片可能引起不適,請(qǐng)謹(jǐn)慎點(diǎn)開(kāi)!
動(dòng)物骨骼測(cè)試
骨質(zhì)疏松是一種全身的代謝性骨骼疾病,表現(xiàn)為骨骼的密度和質(zhì)量下降,導(dǎo)致骨骼脆弱,容易發(fā)生骨折。隨著科學(xué)的發(fā)展和人類的進(jìn)步,人均壽命不斷延長(zhǎng),老年人口迅速增加,骨質(zhì)疏松的發(fā)病率也隨之迅速增加,成為全球性的健康問(wèn)題。如何研究及有效治療骨質(zhì)疏松癥已成為人們廣泛關(guān)注的重要課題。
小鼠骨生物力學(xué)測(cè)試以彎曲試驗(yàn)最為適用,常用的為3點(diǎn)彎曲試驗(yàn),用于測(cè)定骨組織在外力作用下的力學(xué)特征和骨在受力后的生物學(xué)效應(yīng)。此外,也可以通過(guò)活體測(cè)試研究藥物對(duì)骨骼生長(zhǎng)的影響。
對(duì)大鼠或小鼠骨骼的彎曲試驗(yàn)有助于研究骨骼的強(qiáng)度和結(jié)構(gòu)完整性
將大鼠麻醉后,安裝并對(duì)脛骨循環(huán)加載,研究力學(xué)刺激/藥物對(duì)骨骼愈合或生長(zhǎng)等的影響。
不同內(nèi)植物修復(fù)單側(cè)不穩(wěn)定骨盆后環(huán)損傷的
有限元及生物力學(xué)分析
骨盆穩(wěn)定性主要由骨盆后環(huán)及骶髂關(guān)節(jié)決定,近年來(lái),車禍等高能量沖擊帶來(lái)的骨盆后環(huán)損傷及骶髂關(guān)節(jié)脫位病例逐年遞增。對(duì)此,手術(shù)治療是合適的方法。目前臨床中存在多種內(nèi)植物修復(fù)方式,但哪種治療方式具有更好的生物力學(xué)性能仍存在一定爭(zhēng)議。
本研究采用有限元仿真和力學(xué)測(cè)試結(jié)合的方式,構(gòu)建不同內(nèi)植物修復(fù)單側(cè)不穩(wěn)定骨盆后環(huán)損傷模型并進(jìn)行對(duì)比,對(duì)變形位移和剛度差異采用獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)進(jìn)行分析。
采用 E10000 設(shè)備及定制夾具,骨盆標(biāo)本牙托粉包埋,以 20mm/min 速率壓縮至 500N,記錄下骶骨整體位移變化。
圖注:圖A為正常骨盆模型;B為單側(cè)后環(huán)損傷骨盆模型;C為前路雙鋼板修復(fù)模型;D為后路橋接鋼板模型;E為拉力釘修復(fù)模型;F為后路橋接鋼板模型的X射線片;G為前路雙鋼板修復(fù)模型的X射線片;H為拉力釘修復(fù)模型的X射線片
力學(xué)試驗(yàn)結(jié)果
圖注:圖 A 為各模型剛度;B 為各模型壓力變形。NP 為正常骨盆模型:UIP 為單側(cè)后環(huán)損傷骨盆模型;ADP 為前路雙鋼板修復(fù)模型;PBP 為后路橋接鋼板模型;TNP 為拉力釘修復(fù)模型
振動(dòng)鉆孔與常規(guī)鉆孔
對(duì)皮質(zhì)骨產(chǎn)生微裂紋的實(shí)驗(yàn)研究
骨鉆孔在骨科手術(shù)中應(yīng)用廣泛。鉆孔過(guò)程總會(huì)產(chǎn)生微裂紋,造成疲勞損傷和應(yīng)力斷裂。通過(guò)振動(dòng)和常規(guī)方法鉆取新鮮的牛皮質(zhì)骨,經(jīng)掃描電鏡觀察鉆孔部位和骨碎片。比較兩種方式,結(jié)果發(fā)現(xiàn)振動(dòng)鉆孔在骨科手術(shù)中可減少對(duì)骨的微損傷,從而降低應(yīng)力性骨折的發(fā)生率,有助于術(shù)后恢復(fù)。
圖左:精密切割機(jī)
圖右:鉆孔試樣
振動(dòng)與常規(guī)鉆井的實(shí)驗(yàn)布置
體外鉆孔操作使用 ElectroPuls E10000 完成,可在保持勻速運(yùn)動(dòng)(V=40mm/min)的同時(shí)提供振動(dòng)。常規(guī)和振動(dòng)鉆取方法分別設(shè)置不同的參數(shù)(頻率:5~20Hz, 100~500μm)。選擇產(chǎn)生合適溫度的條件(A=500μm, f=20Hz),通過(guò)掃描電鏡觀察并比較常規(guī)組和振動(dòng)組皮質(zhì)骨鉆孔部位和骨碎片。
聚集的平滑肌細(xì)胞合成工程血管組織
研究目的為開(kāi)發(fā)一種系統(tǒng),能夠從聚集的細(xì)胞及細(xì)胞衍生的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)快速生成工程化組織結(jié)構(gòu)并對(duì)其進(jìn)行以評(píng)估。將大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞注入環(huán)狀瓊脂糖孔(內(nèi)徑分別為 2,4 和 6mm),靜培養(yǎng)兩周后,細(xì)胞聚集形成較厚的組織環(huán)(8天 0.76 mm;14天 0.94 mm)。組織環(huán)強(qiáng)度和剛度值優(yōu)于同等時(shí)間培養(yǎng)的工程組織結(jié)構(gòu)。組織環(huán)的強(qiáng)度(100~500 kPa)和模量(0.5~2 MPa)隨組織環(huán)尺寸增大而增大,隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而減小。
最后,組織環(huán)在硅芯軸上培養(yǎng)7天融合形成管狀結(jié)構(gòu)。這種系統(tǒng)為細(xì)胞源性組織的優(yōu)化和功能評(píng)估提供了一種多功能的新工具,并為創(chuàng)建組織工程血管移植物提供了一種新方法。
將大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞注入環(huán)狀瓊脂糖孔內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),細(xì)胞聚集形成較厚的組織環(huán)。側(cè)視圖(d)和俯視圖(g)顯示培養(yǎng)8天后,在瓊脂糖柱周圍形成一個(gè)4毫米內(nèi)徑的組織環(huán)。
使用 E1000 對(duì)組織環(huán)進(jìn)行力學(xué)性能評(píng)估。將組織環(huán)用兩個(gè)不銹鋼銷釘(夾具)進(jìn)行固定,并浸沒(méi)于 PBS 溶液中。一個(gè)夾具連接到機(jī)器作動(dòng)缸一端,另一個(gè)連接 1N 載荷傳感器。載荷(F)和位移(⊿L數(shù)據(jù))以 10Hz 頻率連續(xù)采集。
對(duì)組織環(huán)施加 5mN 的拉伸力,記錄此時(shí)的標(biāo)距(L g)。然后在 5mN 至 50kPa 工程應(yīng)力范圍內(nèi)對(duì)組織環(huán)進(jìn)行8周期的預(yù)循環(huán)加載,然后以 10mm/min 的速率拉伸至斷裂。
上圖為典型的應(yīng)力應(yīng)變曲線,顯示的是 4mm 的組織環(huán)培養(yǎng)8天后的應(yīng)力應(yīng)變數(shù)據(jù),通過(guò)數(shù)據(jù)分析獲得最大拉伸強(qiáng)度(UTS)、斷裂應(yīng)變、最大切模量(MTM)以及斷裂韌性(Toughness)。
組織環(huán)融合形成管狀。 組織環(huán)培養(yǎng) 7d 后轉(zhuǎn)移到外徑 1.9 mm 的硅膠芯軸(a)上,二者緊密貼合(b)。后將試管再培養(yǎng)7天,共14天(c),在移除硅膠芯軸后獲得管狀組織(d)。
大鼠內(nèi)側(cè)副韌帶進(jìn)行性損傷力學(xué)性能表征
膝蓋是人體最復(fù)雜的關(guān)節(jié),由肌肉、骨骼和韌帶系統(tǒng)組成,在日常和運(yùn)動(dòng)中承受重復(fù)性負(fù)荷。當(dāng)這種負(fù)荷過(guò)大時(shí),會(huì)對(duì)膝關(guān)節(jié)造成損傷,導(dǎo)致生活質(zhì)量下降。內(nèi)側(cè)副韌帶(MCL)是已知膝關(guān)節(jié)常見(jiàn)損傷的四大韌帶之一。膝關(guān)節(jié)損傷的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)隨著老年人和慢性脫水的個(gè)體而增加。
本研究采用一種新的力學(xué)試驗(yàn)方案,通過(guò)拉伸試驗(yàn)逐步誘導(dǎo)大鼠 MCL 損傷并對(duì)損傷進(jìn)行量化分析。
左:正常含水韌帶
右:浸潤(rùn)在 25% 蔗糖 PBS 溶液中更為透明的脫水韌帶
典型的脛骨-MCL-尺骨復(fù)合體(FMTC)作為試驗(yàn)樣品
韌帶試樣(FMTC)的股骨和脛骨端通過(guò)牙骨水泥包埋固定在軟管接頭,軟管接頭連接到拉伸夾具,并置于水浴槽中。使用 ElectroPuls E1000 配置 50N 載荷傳感器進(jìn)行測(cè)試。
試樣安裝如下圖:
先對(duì)試樣施加 0.1N 預(yù)加載消除樣品松弛性,并定義此時(shí)的位移為零。以 1Hz 的頻率施加最大振幅為 0.3mm 的半三角波形;回復(fù)到 0.1N 并保持 10min。以 0.1mmm/s 的速度拉伸韌帶到 d1=0.4mm,回復(fù)到 0.1N 保持 10min,繼續(xù)拉伸到 d2=0.6mm,d3=0.8mm,d4=1.0mm,持續(xù)以 dk+1-dk=0.2mm 直至樣品斷裂。每次拉伸后均回復(fù)到 0.1N 保持 10min。
通過(guò)位移-載荷曲線以及切剛度和弦剛度等數(shù)據(jù)來(lái)分析韌帶的進(jìn)行性損傷。
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