吸煙和二手煙對身體傷害極大！危害包括增加肺癌的發(fā)病率、導致不孕或胎兒畸形、容易骨質(zhì)疏松等。

2020年，中國疾病預防控制中心，對北京、上海、深圳等六城市的餐飲場所工作人員進行了大規(guī)模的研究調(diào)查，經(jīng)檢測即使是已出臺全面無煙立法城市，可替寧檢出率34.12%，三羥基可替寧檢出率16.32%；未出臺全面無煙立法城市，相應指標更高，可替寧檢出率68.04%，三羥基可替寧檢出率41.94%。

（數(shù)據(jù)來源：中華預防醫(yī)學雜志，年,卷(期)：2021,55(12)）

如此高的檢出率！煙草煙霧暴露，成為一個不容忽視的重要社會問題。

尼古丁是煙草中含量最高的生物堿，在人體內(nèi)半衰期較短，其70%～80%代謝產(chǎn)物為可替寧。當接觸煙草煙霧后，在人體的不同生物樣本基質(zhì)中均可檢測出可替寧。可替寧在人體中可進一步代謝為3-羥基可替寧，因此，可替寧和3-羥基可替寧可作為煙草煙霧暴露的生物標志物。

為了您和家人身體健康，遠離吸煙和二手煙。

血漿中可替寧和 3-羥基可替寧的測定

納鷗科技助力尼古丁代謝產(chǎn)物在人體內(nèi)的檢測，本應用在檢測血漿中可替寧和羥基可替寧的基礎上，對樣本前處理流程、液相色譜分離條件進行了優(yōu)化，建立了檢測血漿中可替寧和羥基可替寧的檢測方法。

一、摘要:

目的  建立血漿中可替寧和 3-羥基可替寧的固體介質(zhì)液液萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時測定法。

方法  在血漿樣品中加入同位素內(nèi)標和氫氧化鉀后,使用 96孔SLE液液萃取板凈化,凈化液經(jīng)異丙醇二氯甲烷溶液洗脫、氮氣吹干,純水復溶,使用Anavo XP C18色譜柱(100 mmⅹ2.1 mm,1.7 µm)，以 0.1%氨水溶液-乙腈為流動相進行梯度洗脫,使用多反應監(jiān)測模式采集數(shù)據(jù)。

結果  可替寧和羥基可替寧在0.1~300 ng/ml線性范圍內(nèi)方法線性良好（r＞0.999）,可替寧方法定量下限為0.03 ng/ml,三羥基可替寧方法定量下限為0.02 ng/ml?？商鎸幍募訕嘶厥章蕿?5.0%~99.4%,RSD為2.1%~3.3%。三羥基可替寧的加標回收率為95.8%~97.4%，RSD為2.1%~4.2%。結論  該方法取樣量少、操作簡便、方法精密度高,適合大規(guī)模樣品的篩查檢測工作。

二、測定原理

可替寧、3-羥基可替寧通過同位素稀釋高效液相色譜質(zhì)譜方法測量。向血漿（清）樣品中加入甲基-D3-可替寧、反式3-羥基可替寧-D3作為內(nèi)標，樣品堿化然后加入到液體提取盤（SLE)中。分析物被混合的異丙醇和二氯甲烷提取，濃縮，剩余物復溶后進樣到C18色譜柱上，洗脫液洗脫，LC-MS測定。

可替寧的母離子為m/z 177，子離子為m/z 80，3-羥基可替寧的母離子為m/z 193，子離子為m/z 80。內(nèi)標和離子對配合各自的監(jiān)控化合物。以標準系列峰面積與內(nèi)標峰面積之比和可替寧、3-羥基可替寧濃度，做工作曲線。

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜

Anavo 96孔板正壓固相萃取裝置（PN：AN25D021）

Anavo 96孔板氮吹儀（PN:AN25D020）

Anavo SLE+ 400mg 96孔板(PN: AN25H007)

Anavo 2m深孔96孔板收集盤（PN: AN25J017）

Anavo XP雜化硅膠UHPLC C18色譜柱（PN：AN80A006）

12通道300µL移液器

漩渦振蕩器

冰醋酸、醋酸銨、氫氧化鉀：優(yōu)級純

異丙醇、甲醇、二氯甲烷：色譜純

電噴霧離子源（ESI）；正離子掃描，噴霧電壓：4500 V；離子源溫度：550 ℃，碰撞氣壓力：中性碰撞氣；氣簾氣壓力：0.24 MPa；霧化氣壓力（GS1）和輔助加熱器壓力（GS2）：0.38 MPa。多反應監(jiān)測（MRM）模式采集。其他質(zhì)譜參數(shù)見表2。

3-羥基可替寧色譜圖

配套關鍵耗材