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羥基磷灰石Ca10(PO4)6(OH)2被加工成高純度球狀顆粒，可作為層析填料使用。由于其結晶的化學結構、立體構造的特點，羥基磷灰石與抗體的Fab片段、Fc片段可發(fā)生相互作用。所以至今為止，羥基磷灰石在抗體及蛋白質(zhì)的純化、多聚體和殘留核酸的去除等工藝中，作為精細純化步驟的填料被廣泛使用。最近，由于其特殊的相互作用（金屬螯合、氫鍵等作用），羥基磷灰石作為陽離子交換型的混合模式填料，被人們重新認識。
羥基磷灰石由于在酸性溶液中化學穩(wěn)定性相對較差，所以使用條件上存在一定的限制。
● 羥基磷灰石的主要用途
· 分離抗體及蛋白質(zhì)的多聚體、異構體、分解物以及電荷異質(zhì)體等目標產(chǎn)品內(nèi)源性雜質(zhì)
· 分離DNA、HCP、病毒等來自生產(chǎn)工藝、混入的外源性雜質(zhì)/污染物
· 適用于最終（精純）步驟中的分離純化
● 在酸性條件下，與市售羥基磷灰石耐久性對比
在高吸附（高載量；下同）型羥基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型（B公司、Type I）和高耐久型（B公司、Type II；載量較低）羥基磷灰石填料裝填的層析柱中，連續(xù)用弱酸性蒸餾水通液時，層析柱的理論塔板數(shù)的變化如上圖所示。市售品在大約80～90小時通液后，理論塔板數(shù)下降10%以上。與之相比，Ca++Pure-HA的理論塔板數(shù)雖然也會緩慢減少，但在約160小時之前，理論塔板數(shù)仍保持在90%以上。也就是說，Ca++Pure-HA屬于高吸附型，且在酸性條件下的耐久性更好。另外，在更低的酸性條件（pH 6.5～3.5）下使用和需要酸洗時，可以推薦使用耐鹽性陽離子交換填料TOYOPEARL Sulfate-650F和陽離子交換型的混合模式填料TOYOPEARL MX-Trp-650M。
● 羥基磷灰石和混合模式填料（包括耐鹽性離子交換填料）的性能比較
分離模式 | TOYOPEARL | 羥基磷灰石 | ||
耐鹽性陰離子交換填料 | 耐鹽性陽離子交換填料 | 混合模式 | ||
產(chǎn)品名稱 | NH2-750F | Sulfate-650F | MX-Trp-650M | Ca++Pure-HA |
填料基質(zhì) | 親水性聚合物 | 羥基磷灰石 | ||
粒徑 | 45 μm | 45 μm | 75 μm | 39 μm |
官能團、配基 | 多胺基 | 硫酸基 | 色氨酸 | Ca2+, PO43-, OH- |
官能團、配基密度 | 0.07~0.13 eq/L | ≥0.53 eq/L | - | - |
靜態(tài)吸附載量 （SBC：人IgG） | ≥70 g/L | ≥114 g/L | ≥75 g/L | ≥20 g/L* (55 g/L) |
出廠溶劑 | 20%乙醇** | 20%乙醇、 0.2 mol/L醋酸鈉 | 20%乙醇 | 干燥凝膠 （或1 mol/L的NaOH溶液） |
保存溫度 | 室溫 | |||
特點 | · 即使在鹽濃度較高條件下，也具有較高載量 · 有較大的細孔徑，去除 · 流穿效果好 | · 多聚體分離效果更好 · 即使在鹽濃度較高條件下，也具有較高載量 · 也可用于肝素類親和分離 | · 高吸附載量，分離峰形 · 即使在鹽濃度較高條 · 二價特異性抗體、 | · 具有與市售品同等或更高的吸附載量 · 填料耐久性也更高 · 具有與市售品同等或更高的性能，但價格更便宜 （注意） 洗脫液使用磷酸鈣、KCl |
* 動態(tài)吸附量（DBC）：駐留時間是2分鐘；駐留時間5分鐘時，DBC是55 g/L-gel。
** TOYOPEARL NH2-750F需要使用0.1 mol/L HCl清洗，置換對離子后，才能保存在20%乙醇水溶液中。
● 羥基磷灰石和混合模式填料（包括耐鹽性離子交換填料）的產(chǎn)品一覽表
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 粒徑 （μm） | 包裝規(guī)格* | 備注 |
0045045 | Ca++Pure-HA | 39 | 50 g | 散裝填料（瓶） |
0045053 | Robocolumn Ca++Pure-HA, 8 × 200 μL | 39 | 200 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0045054 | Robocolumn Ca++Pure-HA, 8 × 600 μL | 39 | 600 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0023439 | TOYOPEARL NH2-750F | 45 | 250 mL | 散裝填料（瓶） |
0023443 | ToyoScreen NH2-750F | 45 | 1 mL × 6 | 預裝柱，需要使用ToyoScreen Holder（柱套） |
0023444 | ToyoScreen NH2-750F | 45 | 5 mL × 6 | 預裝柱，需要使用ToyoScreen Holder（柱套） |
0045021 | RoboColumn NH2-750F | 45 | 200 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0045022 | RoboColumn NH2-750F | 45 | 600 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0023468 | TOYOPEARL Sulfate-650F | 45 | 250 mL | 散裝填料（瓶） |
0023472 | ToyoScreen Sulfate-650F | 45 | 1 mL × 6 | 預裝柱，需要使用ToyoScreen Holder（柱套） |
0023473 | ToyoScreen Sulfate-650F | 45 | 5 mL × 6 | 預裝柱，需要使用ToyoScreen Holder（柱套） |
0045027 | RoboColumn Sulfate-650F | 45 | 200 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0045028 | RoboColumn Sulfate-650F | 45 | 600 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0022817 | TOYOPEARL MX-Trp-650M | 75 | 25 mL | 散裝填料（瓶） |
0022824 | ToyoScreen MX-Trp-650M | 75 | 1 mL × 6 | 預裝柱，需要使用ToyoScreen Holder（柱套） |
0022825 | ToyoScreen MX-Trp-650M | 75 | 5 mL × 6 | 預裝柱，需要使用ToyoScreen Holder（柱套） |
0045051 | RoboColumn MX-Trp-650M | 75 | 200 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0045052 | RoboColumn MX-Trp-650M | 75 | 600 μL × 8 | 96微孔板專用 |
0021400 | ToyoScreen Holder | - | - | 柱套、轉(zhuǎn)接頭（入口1 mL專用）、（入口5 mL專用）、轉(zhuǎn)接頭（出口）各1個、堵頭2個 |
* Ca++Pure-HA是干燥粉末品?？商峁┎煌w積包裝的產(chǎn)品。 ToyoScreen預裝柱可以直接連接HPLC系統(tǒng)。
Ca++Pure-HA是美國制造的產(chǎn)品，受美國相關出口法令的限制。
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