MALDI-TOF-MS:什么是基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)?
質(zhì)譜(MS)是用于分子分析的強(qiáng)大工具。分子在磁場(chǎng)中被電離,使它們向檢測(cè)器板加速并碰撞。分子的加速度取決于其質(zhì)量和電荷。如果知道電荷,則可以通過與其加速度相對(duì)應(yīng)的檢測(cè)器信號(hào)來確定質(zhì)量。分子電離的z簡(jiǎn)單方法是電子撞擊,其中高能電子與分子碰撞以產(chǎn)生帶電物質(zhì)。該方法的缺點(diǎn)是靶分子發(fā)生碎裂(鍵斷裂)的可能性很高。盡管這種碎片化對(duì)研究較小的有機(jī)分子可能是有益的,但由于這些碎片可以診斷某些官能團(tuán),因此這種碎片化所引起的光譜復(fù)雜性對(duì)于較大,更復(fù)雜的分析物將很快變得不堪重負(fù)。對(duì)于大的生物分子,例如糖蛋白或糖脂,需要一種具有最小片段化的較溫和的電離方法。基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)是實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的方法。將分析物的溶液嵌入(溶解并干燥)在基質(zhì)上,該基質(zhì)被仔細(xì)清潔的金屬板稱為MALDI板。基質(zhì)通常由含有共軛電子和至少一個(gè)酸性質(zhì)子的有機(jī)分子組成(對(duì)于酸敏感性樣品,也可以使用堿性基質(zhì)分子)。在此分析物-基質(zhì)混合物上照射強(qiáng)大的激光會(huì)引起解吸,使分析物從被基質(zhì)分子層包圍的表面釋放出來。一旦解吸,基質(zhì)分子將通過質(zhì)子化或去質(zhì)子化,根據(jù)基質(zhì)成分在分析物上產(chǎn)生電荷?,F(xiàn)在帶電的分析物將受到質(zhì)譜儀內(nèi)存在的磁場(chǎng)的影響,并朝著檢測(cè)器板加速。
基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry),MALDI是軟電離的原理,一般用來分析生物大分子,比如細(xì)菌、病毒、蛋白質(zhì)、DNA、糖化血紅蛋白等,也可以用來做病理切片的質(zhì)譜成像。
完成MALDI-TOF-MS的步驟都需要人工干預(yù),并且可能非常耗時(shí)。對(duì)于MALDI點(diǎn)樣,樣品的鍍層是一項(xiàng)微妙而費(fèi)力的工作,需要跟蹤板上的分析物和基質(zhì)混合物。由于這些原因,許多實(shí)驗(yàn)室都轉(zhuǎn)向自動(dòng)化液體處理工作站,以自動(dòng)化其樣品制備來進(jìn)行質(zhì)譜分析。這些系統(tǒng)增加了工作流程和通量,提高了整體實(shí)驗(yàn)室效率和樣品周轉(zhuǎn)時(shí)間。如果您想進(jìn)一步了解這些液體處理工作站如何簡(jiǎn)化您的流程,請(qǐng)與我們的Aurora團(tuán)隊(duì)聯(lián)系。
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