qPCR方法與細(xì)菌培養(yǎng)法在無(wú)乳鏈球菌和金黃葡萄球菌檢測(cè)的比較
無(wú)乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus)被認(rèn)為是奶牛乳腺炎的重要傳染性病原,然而這兩種病原最近都從奶牛乳房外和環(huán)境中分離出來(lái),表明除乳房以外的其他部位可能有這兩種病原傳播并導(dǎo)致乳房?jī)?nèi)感染。可以使用檢測(cè)乳房外部位病原的診斷方法,但診斷方法仍需要驗(yàn)證。本研究的目的是評(píng)價(jià)丹麥 Mastit4 qPCR檢測(cè)試劑盒和細(xì)菌培養(yǎng) (BC) 方法在來(lái)自牛奶和乳頭皮膚樣本中檢測(cè)無(wú)乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus)中的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)比較。從具有自動(dòng)擠奶系統(tǒng)的8個(gè)無(wú)乳鏈球菌陽(yáng)性的丹麥奶牛場(chǎng)中隨機(jī)選擇了 30-40 頭體細(xì)胞計(jì)數(shù)高的奶牛,從右后方 (n = 287) 收集乳頭皮膚樣品和無(wú)菌牛奶樣品用于細(xì)菌培養(yǎng)和 qPCR 檢測(cè)分析,靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)采用貝葉斯統(tǒng)計(jì)分析來(lái)評(píng)價(jià)。對(duì)于牛奶樣品,無(wú)乳鏈球菌 qPCR檢測(cè)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.97 和 0.99,而細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.41 和 1.00。 金黃色葡萄球菌的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為0.95 和 0.99,而傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.54 和 0.77。對(duì)于乳頭皮膚樣本,無(wú)乳鏈球菌 qPCR檢測(cè)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.97 和 0.96,而傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.33 和 1.00。金黃色葡萄球菌的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為0.94 和 0.98,而傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.44 和 0.74??傊?,用于檢測(cè)無(wú)乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus)qPCR試劑盒靈敏度(Se)比細(xì)菌培養(yǎng)方法要高,這表明 qPCR方法是一種有價(jià)值的方法,可用于檢測(cè)牛奶樣品中的這兩種病原。細(xì)菌培養(yǎng)法與 qPCR方法相比,細(xì)菌培養(yǎng)法在檢測(cè)乳頭皮膚上的無(wú)乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus)方面的性能較差,這表明在將這兩種方法作為乳頭皮膚定植菌的常規(guī)檢測(cè)方法時(shí),應(yīng)考慮兩種方法的目標(biāo)條件的差異。細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)的低靈敏度可能會(huì)妨礙使用細(xì)菌培養(yǎng)進(jìn)行皮膚檢測(cè),而 qPCR方法更適合這項(xiàng)檢測(cè)。
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