超微量分光光度計主要是用在核酸的定量跟蛋白質(zhì)的直接定量等方面。
與傳統(tǒng)分光光度計相比,超微量分光光度計具備以下優(yōu)勢特點:
(1)所需樣品體積小,僅需0.5—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可,避免了因為比色皿清洗不凈帶來的交叉污染;
(3)一般具有多個光程(電機控制自動選擇),而傳統(tǒng)分光光度計的光程為10 mm,超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),使用壽命更長;
(5)不需要預(yù)熱,可隨時檢測,檢測時間短;
(6)顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實驗室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計小很多。
使用方法:
1、打開儀器電源開關(guān),開啟比色皿暗箱蓋,調(diào)節(jié)“0”電位器旋紐,使電表指針處于透光率(T)“0”位,預(yù)熱約20分鐘。
2、調(diào)節(jié)波長(λ)調(diào)節(jié)旋紐,選擇需用的單色光波長。
3、調(diào)節(jié)靈敏度開關(guān),選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度。再用調(diào)“0”旋紐復(fù)校電表透光率“0”位。
4、將比色皿暗箱蓋合上,將參比溶液(空白)推入光路,順時針旋轉(zhuǎn)“100%”電位器調(diào)節(jié)旋紐使電表指針處于透光率“100%”處。
5、按上述方式連續(xù)幾次調(diào)整透光率“0”及“100”,直至不變,即可進行測定工作。
6、將校準(zhǔn)溶液和待測溶液推入光路,讀取校準(zhǔn)溶液吸光度(A)值。
7、將待測溶液推入光路,讀取待測溶液吸光度值。
8、根據(jù)校準(zhǔn)溶液和待測溶液吸光度值及校準(zhǔn)溶液濃度計算待測物濃度。
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