隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)與科研技術(shù)的提高,我們的色譜技術(shù)也在不斷的進(jìn)步中,制備色譜技術(shù)也得以大力發(fā)展,現(xiàn)已逐漸走出實(shí)驗(yàn)室,廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥等分離純化領(lǐng)域的工業(yè)生產(chǎn)。
制備色譜概述
制備色譜源于從混合物中分離得到化合物純品,是一個(gè)分離、純化及富集的過(guò)程,已成為分離科學(xué)中較有效的分離技術(shù)之一。廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥等分離純化領(lǐng)域的工業(yè)生產(chǎn),我們稱之為工業(yè)制備色譜(IndustrialPreparationChromatography,簡(jiǎn)稱IPC)。
制備色譜的目的
在說(shuō)色譜制備之前,我們要先了解一下分析色譜,分析色譜的目的是分析出混合物中一個(gè)(或者幾個(gè))純物質(zhì)的含量。而制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。工業(yè)制備色譜產(chǎn)品的主要用途是完成工業(yè)級(jí)樣品的純化、分離及富集。
制備色譜的結(jié)構(gòu)組成
制備色譜一般由一臺(tái)可以連續(xù)輸送液體的恒流泵、紫外檢測(cè)儀與色譜柱構(gòu)成,其中重要的部件是價(jià)格不一,款式多樣的色譜柱,這也是影響終制備效果的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)。柱子有多種類型,不僅材質(zhì)不一,填料也有很多學(xué)問(wèn),下面簡(jiǎn)要的說(shuō)說(shuō)關(guān)于柱子的一些情況:
各種規(guī)格的玻璃柱子在實(shí)驗(yàn)室里頭很容易得到,而且價(jià)格低廉,但玻璃柱子致命的弱點(diǎn)是它能承受的壓力很小,且非常容易破碎。當(dāng)由于壓力太小而導(dǎo)致流動(dòng)相流速很慢的時(shí)候,高位液面或加高壓空氣(或者氮?dú)?的采用是一個(gè)簡(jiǎn)單的解決辦法。在底下加真空,也能在一定程度上解決這個(gè)問(wèn)題。
不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能,但其價(jià)格相對(duì)很貴。如果,只有很小的分離任務(wù)且經(jīng)費(fèi)也允許,市面上直徑為1cm的小型制備柱就是首要選擇。
有機(jī)玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕,相對(duì)不銹鋼柱子而言,它是半透明的,可以看到液體的運(yùn)行狀態(tài),對(duì)有色的物質(zhì)其特點(diǎn)就更為突出。
硅膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹(shù)脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。有不少文獻(xiàn)報(bào)道,對(duì)填料可以進(jìn)行一下處理提高了分離效果,如,對(duì)硅膠進(jìn)行的硝酸銀(或緩沖液)處理。
制備色譜的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)
根據(jù)制備色譜型號(hào)的不同,特點(diǎn)會(huì)有些許的差異
1.分離過(guò)程壓力恒定,柱床穩(wěn)定,重現(xiàn)性好
2.中壓制備,流速快,快速制備大量純品
3.流量及壓力設(shè)定可記憶,便于實(shí)驗(yàn)操作
4.柱效高,不拖尾,可根據(jù)分離度過(guò)載上樣
5.排氣裝置設(shè)計(jì),有效除去輸送液體中的氣泡
6.數(shù)顯控制流速,流速精確恒定
隨著更高的標(biāo)準(zhǔn)要求,制備色譜的發(fā)展趨勢(shì)將會(huì)是儀器一體化,操作自動(dòng)化、耗品標(biāo)準(zhǔn)化以及滿足高通量純化要求。如果需要進(jìn)行分離提純工作,那么不妨選擇制備色譜系統(tǒng)。
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