TMB底物顯色試劑盒(可溶型)說明書
Soluble TMB Kit
目錄號:K0050
保存條件:2-8℃保存。
組分說明
Cat No. K0050
Volume 100 ml
TMB 5 ml
TMB-顯色液 100 ml
產品簡介
TMB (3', 3', 5', 5', -四甲基聯(lián)苯胺)是辣根過氧化物酶(HRP)的顯色底物,是目
前HRP系統(tǒng)ELISA實驗的常用顯色試劑。TMB顯色底物工作液在HRP的催化下,形成藍色的陽離子產物,在370 nm和652 nm處有主要吸收峰。加酸終止反應后,藍色轉變為黃色,可以在450 nm波長下測定。本試劑盒使用方便,靈敏度高,效果穩(wěn)定,顏色產物為可溶性,適用于ELISA,不推薦用于IHC實驗。
本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途
注意事項
1.顯色工作液應即用即配,放置超過10 min會影響顯色效果。
2.TMB顏色底物顯色后,隨著時間的延長,顏色會逐漸消退,因此顯色并終止反應后
應盡快讀值,否則會影響檢測的準確性。
3.以96孔酶標板每孔用量100 μl顯色工作液計算,5 ml 20×TMB Kit 可完成1000孔樣品的檢測。
4.本產品僅限于科研,不能用于人體實驗或人體治療。
操作步驟
1.TMB顯色工作液配制:
根據(jù)實驗需用量,將TMB和TMB-顯色液以1:19的比例均勻混合,即配制成為TMB顯色工作液。
2.顯色:
1)經HRP標記物孵育并充分洗滌后,酶標板每孔中加100 μl TMB顯色工作液。
2)室溫避光孵育25-30分鐘,反應產物呈藍色。
3)每孔加50 μl 0.5M H2SO4 終止顯色,此時藍色產物變?yōu)榱咙S色。
4)將酶標板置于酶標儀中,450 nm波長下讀取數(shù)據(jù)。
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