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Glycated hemoglobin A1c ELISA KIT（ELISA試劑盒）

Glycated hemoglobin A1c ELISA KIT 即糖化血紅蛋白 A1c 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，以下是關(guān)于它的詳細介紹：

用途：主要用于體外定量檢測生物樣本中糖化血紅蛋白 A1c 的含量，通常用于科研領(lǐng)域，如糖尿病相關(guān)的基礎(chǔ)研究、藥物研發(fā)等，而不能直接用于臨床診斷。
適用樣本類型：常見的有血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液、分泌物等。

雙抗體夾心法：以兔糖化血紅蛋白 A1c ELISA 試劑盒為例，用純化的糖化血紅蛋白 A1c 抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入糖化血紅蛋白 A1c，再與 HRP 標記的糖化血紅蛋白 A1c 抗體結(jié)合，形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的糖化血紅蛋白 A1c 呈正相關(guān)，用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中糖化血紅蛋白 A1c 濃度。
競爭法：如 Abbexa 公司的人糖化血紅蛋白 A1c ELISA 試劑盒，是基于競爭酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。先將抗體預(yù)包被到 96 孔板上，加入標準品、測試樣品和生*素標記的試劑，生*素標記的糖化血紅蛋白 A1c 和未標記的糖化血紅蛋白 A1c 會在包被抗體上發(fā)生競爭抑制反應(yīng)，再加入 HRP 標記的試劑，孵育后洗去未結(jié)合的結(jié)合物，加入 TMB 底物進行顯色，顏色變化與糖化血紅蛋白 A1c 的量成反比，通過測定 OD 值計算糖化血紅蛋白 A1c 的濃度。

以常見的雙抗體夾心法為例：

試劑盒保存：應(yīng)按照說明書要求在 2-8℃條件下保存，避免冷凍和反復(fù)凍融，有效期一般為 6 個月左右。
操作規(guī)范：嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育，所有試劑在使用前需達到室溫 20-25℃。加樣要準確，使用加樣器并經(jīng)常校對其準確性，一次加樣時間最好控制在 5 分鐘內(nèi)。
避免污染：操作過程中要注意防止交叉污染，封板膜只限一次性使用，不同批號的試劑組分不得混用。
底物保存：底物顯色液應(yīng)避光保存，如發(fā)現(xiàn)底物液已經(jīng)變藍則不能使用。

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