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更新時間:2021-10-29 11:26:45瀏覽次數(shù):1439次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
Emfret Analytics 專注于生物醫(yī)學(xué)研究中單克隆抗體的生產(chǎn)、表征、衍生化和供應(yīng)。

Emfret Analytics GmbH(成立于 2002 年)專注于生物醫(yī)學(xué)研究(即血管生物學(xué))中單克隆抗體的生產(chǎn)、表征、衍生化和供應(yīng)。


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免疫組化(用丙酮固定的冰凍切片)

請注意:不建議對(對)甲醛固定的樣品進(jìn)行免疫染色,因?yàn)樵谶@些條件下,大多數(shù)大鼠抗體在小鼠組織上只能產(chǎn)生較差的結(jié)果。


  1. 將冷凍組織的切片安裝在載玻片上,并在 4°C 的冰冷 100% 丙酮中固定 20 分鐘。在室溫下干燥樣品過夜。

  2. 為了盡量減少試劑體積,可以用防水筆在載玻片上的組織部分周圍畫一個疏水環(huán)。在接下來的所有程序中,這個被包圍的區(qū)域不應(yīng)干涸。因此,建議在潮濕的盒子中進(jìn)行孵化步驟。

  3. 在 PBS 中孵育幻燈片 20 分鐘。

  4. 當(dāng)使用過氧化物酶偶聯(lián)的二抗時,在室溫下用 0.03% H2O2 孵育載玻片 10 分鐘以抑制內(nèi)源性過氧化物酶活性。在 PBS 中沖洗載玻片 3 次,每次 5 分鐘。

  5. 將玻片在室溫下在封閉溶液(來自待使用的二抗宿主物種的血清)中孵育 1 小時,在 PBS 中稀釋 1:10 或 1:100。

  6. 用封閉溶液中的一抗 (2-10 µg/ml) 覆蓋載玻片,并在室溫下孵育 2 小時。

  7. 從載玻片上吸干多余的液體,并在 PBS 中沖洗 3 次,每次沖洗 5 分鐘。

  8. 根據(jù)制造商的說明,用在封閉溶液中稀釋的熒光團(tuán)或過氧化物酶偶聯(lián)的二抗(例如親和純化的驢抗大鼠 IgG-FITC 或 -HRP,Jackson ImmunoResearch,West Grove,PA)覆蓋載玻片。在 RT 中孵育 1 小時。

  9. 從載玻片上吸干多余的液體,并在 PBS 中沖洗 3 次,每次沖洗 5 分鐘。

  10. a) 熒光染色的樣品可以通過熒光顯微鏡直接分析。

  11. b) 為了觀察過氧化物酶標(biāo)記的結(jié)構(gòu),用新鮮制備的 3-氨基-9-乙基咔唑 (AEC) 底物蓋住載玻片并孵育直至在顯微鏡下可見紅色染色,時間可在 5 到 30 分鐘之間變化。在橙色背景染色發(fā)生之前用去離子水沖洗停止反應(yīng)。對于復(fù)染,用蘇木精孵育樣品 30-240 秒,并用流動的溫水沖洗載玻片 20 分鐘。使用包埋水溶液(例如 Aquatex、Merck)安裝切片。


    上海乾思生物科技中心成立于2018年,總部位于上海,是一家專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的銷售型企業(yè)。

    產(chǎn)品領(lǐng)域:分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療等領(lǐng)域。

    主營產(chǎn)品:細(xì)胞和菌株、胎牛血清、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。

    我們與全球上千家生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系,可以在第一時間為用戶提供前沿的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù)。專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠?yàn)閺V大用戶提供強(qiáng)大的技術(shù)支持。本著為所有的客戶提供更高品質(zhì)、更低價格、更快供貨、更優(yōu)服務(wù)的執(zhí)著精神,專心、專注的經(jīng)營方式和誠實(shí)做人、踏實(shí)做事的企業(yè)理念,我們一定會贏得更多客戶的親睞!


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