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低聚半乳糖(Galactooligosaccharides，GOS)是一種具有天然屬性的功能性低聚糖，其分子結(jié)構(gòu)一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接1~7 個(gè)半乳糖基，即Gal-(Gal)n-Glc/Gal(n 為0-6)。

低聚半乳糖是人體腸道中雙歧桿菌、嗜酸乳酸桿菌等有益菌的營(yíng)養(yǎng)源和增殖因子，可以改善人體腸道的消化吸收功能。新生兒的消化功能比較薄弱，所以嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營(yíng)養(yǎng)成分，不但能改善寶寶的消化功能，還能促進(jìn)寶寶體內(nèi)鈣的吸收，從而增強(qiáng)寶寶免疫力。

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部2008年第20號(hào)公告批準(zhǔn)低聚半乳糖為新資源食品，作為一種新的功能性食品，低聚半乳糖在我國(guó)將具有廣闊的市場(chǎng)前景。因此，關(guān)于低聚半乳糖的檢測(cè)需求也持續(xù)增長(zhǎng)。

低聚半乳糖極性強(qiáng)，并且是不同聚合度糖的混合物，這對(duì)色譜柱的保留和分離能力提出了挑戰(zhàn)，常規(guī)色譜柱一般難以實(shí)現(xiàn)；此外，低聚半乳糖無(wú)紫外吸收，示差檢測(cè)器可進(jìn)行測(cè)定，但靈敏度不高，因此對(duì)低聚半乳糖的高靈敏度檢測(cè)也是面臨的另一個(gè)難題。

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低聚半乳糖原料的測(cè)定

Determination of galactooligosaccharide

raw materials

2022年6月30日發(fā)布食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑 低聚半乳糖》，此標(biāo)準(zhǔn)2022年12月30日實(shí)施。標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)于低聚半乳糖含量的測(cè)定規(guī)定了兩種檢測(cè)方法，高效液相色譜雙柱法和高效離子交換色譜法，其中離子色譜法為仲裁法。

△Dionex™ ICS-6000多功能高壓離子色譜儀

FANG FA GAI SHU

方 法 概 述

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采用磷酸鹽緩沖液提取試樣中游離的低聚半乳糖和乳糖，采用半乳糖苷酶將提取液中低聚半乳糖和乳糖酶解，將提取的初始溶液和酶處理過(guò)的溶液分別用離子色譜儀測(cè)定。第一步測(cè)定初始溶液中游離的半乳糖和乳糖，第二步測(cè)定從低聚半乳糖和乳糖中釋放出來(lái)的半乳糖總量。利用乳糖和半乳糖的含量計(jì)算試樣中低聚半乳糖的含量。

LI ZI SE PU TIAO JIAN

離 子 色 譜 條 件

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由于前處理使用半乳糖苷酶將低聚半乳糖酶解為半乳糖和葡萄糖，因此采用對(duì)單雙糖具有優(yōu)秀分離能力的CarboPac PA20糖分析色譜柱，氫氧化鈉和醋酸鈉水溶液梯度洗脫，脈沖安培檢測(cè)器，進(jìn)樣量20μL，柱溫30℃，流速0.4 mL/min，金工作電極，Ag/AgCl參比電極，糖標(biāo)準(zhǔn)四電位波形進(jìn)行測(cè)定。離子色譜法對(duì)常見(jiàn)單雙糖的分離效果如圖2所示。僅需5~25 μL小體積進(jìn)樣即可檢測(cè)ng/L~mg/L級(jí)別單雙糖，無(wú)需衍生化，靈敏度高。

△IC-PAD測(cè)定常見(jiàn)單雙糖（點(diǎn)擊查看大圖）

1-巖藻糖；2-鼠李糖；3-阿拉伯糖；4-半乳糖；5-葡萄糖；6-蔗糖；7-木糖；8-果糖；9-乳糖

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乳粉中的低聚半乳糖

Galacto-oligosaccharides in milk powder

嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營(yíng)養(yǎng)成分，因此是奶粉中的必檢項(xiàng)目。關(guān)于奶粉中低聚半乳糖的測(cè)定目前尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái)。

賽默飛自主研發(fā)建立使用低聚半乳糖原料為對(duì)照品直接測(cè)定奶粉中低聚半乳糖的方法。利用不受奶粉本底干擾的色譜峰來(lái)定性定量，不受樣品中高含量乳糖的干擾，可準(zhǔn)確測(cè)定嬰幼兒奶粉中的低聚半乳糖。此方法無(wú)需酶解，降低成本，但對(duì)色譜柱分離能力和檢測(cè)器靈敏度要求較高，賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀，配置脈沖安培檢測(cè)器和Carbopac PA20色譜柱，可wan全滿(mǎn)足高靈敏度和分離度的要求。

△IC-PAD測(cè)定不同廠(chǎng)家的低聚半乳糖譜圖（點(diǎn)擊查看大圖）

#采用離子色譜法（IC）進(jìn)行低聚半乳糖的檢測(cè)具有多種優(yōu)勢(shì)：

1.專(zhuān)用糖分析色譜柱對(duì)糖類(lèi)物質(zhì)具有良好的保留和分離效果；

2.脈沖安培檢測(cè)器（PAD）對(duì)糖類(lèi)物質(zhì)具有特異性響應(yīng)和高靈敏度；

3.無(wú)需衍生即可直接檢測(cè)，重復(fù)性好；

4.單雙糖、低聚糖、多聚糖、糖醇、氨基糖、酸性糖均可進(jìn)行檢測(cè)。

離子色譜測(cè)定糖類(lèi)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)方法和推薦色譜柱持續(xù)更新中?。?！

（△點(diǎn)擊查看大圖）

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