諾博萊德 全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）樣本裂解

NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）

產(chǎn)品貨號(hào)：BC1598

產(chǎn)品名稱：全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）

產(chǎn)品規(guī)格：50T / 100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）

規(guī)格：50T ; 100T

儲(chǔ)存條件：-20℃，avoid light，at least 1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）產(chǎn)品介紹：

全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為強(qiáng)烈，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成：

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
2)稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒(méi)有明顯的組織塊，這個(gè)過(guò)程注意冰上操作；
3)將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 ℃ 12000g離心30min；
4)吸取上清至新的管中；
5)進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
（提取好的蛋白建議保存于-80 ℃，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
1)裂解液的用量：10⁷個(gè)細(xì)胞需要裂解液1ml；
2)貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計(jì)算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
3)懸浮細(xì)胞：4 ℃ 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
4)裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 ℃ 12000g離心30min；
5)將上清移入新的EP管中；進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
（提取好的蛋白建議保存于-80 ℃，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)

注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)過(guò)程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過(guò)程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因?yàn)镻MSF在水溶液中會(huì)快速降解；

諾博萊德 全蛋白提取試劑盒（強(qiáng)）樣本裂解