AAT Bioquest1312 Buccutite™ Rapid PE Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*

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美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest1312 Buccutite™ Rapid PE Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：1312

產(chǎn)品名稱：Buccuite™快速PE抗體標(biāo)記試劑盒*用于標(biāo)記每個(gè)反應(yīng)25 ug抗體的微型優(yōu)化*

英文名稱：Buccutite™ Rapid PE Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*

產(chǎn)品規(guī)格：2 Labelings

AAT Buccuite™快速PE抗體標(biāo)記試劑盒

產(chǎn)品說(shuō)明：

R-藻紅蛋白（PE）是一種橙色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)為565nm，發(fā)射波長(zhǎng)為575nm。亞洲空運(yùn)中心生物探索提供這款Buccutite™快速標(biāo)記試劑盒，以促進(jìn)PE偶聯(lián)抗體和其他蛋白質(zhì)，如鏈霉親和素和其他二級(jí)試劑。Buccutite™ PE 偶聯(lián)試劑盒提供了一種穩(wěn)健而方便的抗體與 PE 偶聯(lián)的方法。該試劑盒包括預(yù)活化的PE和反應(yīng)緩沖液。整個(gè)過(guò)程只需要兩次簡(jiǎn)單的混合，無(wú)需進(jìn)一步純化。偶聯(lián)抗體可用于流式細(xì)胞術(shù)、WB、ELISA 和 IHC 應(yīng)用。該試劑盒足以進(jìn)行 2 次標(biāo)記反應(yīng)，每次最多 25 ug 抗體?？紤]到PE的大尺寸（240kDa），標(biāo)記反應(yīng)中使用的抗體量必須始終小于PE的量。任何新抗體試劑的最佳比例必須通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定，但每 25 ug PE 含有 50 ug IgG 抗體通?？商峁┳罴呀Y(jié)果。我們的試劑盒提供預(yù)活化的 PE，以促進(jìn) PE 與抗體和其他蛋白質(zhì)（如鏈霉親和素和其他二級(jí)試劑）的偶聯(lián)。我們的預(yù)活化 PE 可隨時(shí)偶聯(lián)，與傳統(tǒng)繁瑣的基于 SMCC 的偶聯(lián)化學(xué)相比，可提供更高的產(chǎn)量。此外，我們的預(yù)活化 PE 通過(guò)蛋白質(zhì)中豐富的氨基與蛋白質(zhì)偶聯(lián)，而 SMCC 化學(xué)針對(duì)必須通過(guò)還原抗體再生的硫醇基團(tuán)。

組件

組分 A：頰鐵礦™ FOL 活化聚乙烯 2瓶

組件 B：頰鐵礦™ MTA 1瓶

組分C：反應(yīng)緩沖液 1 瓶 （20 μL）

示例協(xié)議

一目了然

協(xié)議摘要

1. 將 1.25 μL 反應(yīng)緩沖液（組分 C）加入抗體 （25 μL） 中

2. 加入 2.5 μL 頰鐵礦™ MTA 工作溶液

3. 在室溫下孵育 30 - 60 分鐘

4. 與 50 μL 頰銅礦™ FOL 活化 PE 工作溶液混合

5. 在室溫下孵育60分鐘

重要提示 收到后，將試劑盒儲(chǔ)存在4°C。 如果儲(chǔ)存得當(dāng)，試劑盒應(yīng)穩(wěn)定保存六個(gè)月?；蛘?，組分A和B可以儲(chǔ)存在-20°C。 不要冷凍反應(yīng)緩沖液（組分C）。在打開之前加熱所有組分并短暫離心小瓶，并在開始偶聯(lián)之前立即準(zhǔn)備所需的溶液。以下SOP是標(biāo)記山羊抗小鼠IgG抗體的示例。

工作溶液的制備

1.抗體工作溶液

要標(biāo)記 25 μg 抗體（假設(shè)目標(biāo)抗體濃度為 1 mg/mL），請(qǐng)將 1.25 μL（占總反應(yīng)體積的 5%）反應(yīng)緩沖液（組分 C）與 25 μL 目標(biāo)抗體溶液混合。

注意 如果您有不同的濃度，請(qǐng)相應(yīng)地調(diào)整抗體體積，使~25 μg抗體可用于標(biāo)記反應(yīng)。

注意抗體應(yīng)溶解在1X磷酸鹽緩沖鹽水（PBS），pH 7.2-7.4中;如果將抗體溶解在甘an酸緩沖液中，則必須用1X PBS，pH 7.2-7.4進(jìn)行透析，或使用Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜，10 kDa（墨鏡#UFC501008來(lái)自密理博）去除廣泛用于抗體沉淀的游離胺或銨鹽（如**銨和乙**）。

注意 不純抗體或用牛血清白蛋白 （BSA） 或明膠穩(wěn)定的抗體不會(huì)很好地標(biāo)記。

注意 如果抗體濃度低于 1 mg/mL，抗體 – 頰鐵礦™ MTA 反應(yīng)效率會(huì)顯著降低。為了獲得最佳標(biāo)記效率，建議最終抗體濃度范圍為1-10 mg/mL。

2. 頰鈦MTA ™工作解決方案

將 10 μL DMSO（未提供）加入小瓶中的頰鐵礦 ™ MTA（組分 B）。

3. 頰鈦礦 ™ FOL 活化聚乙烯工作液

添加 50 μL ddH₂O放入小瓶中，加入頰鐵礦™ FOL活化PE（組分A）。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

運(yùn)行抗體-頰鐵礦™ MTA反應(yīng)

1. 將 2.5 μL Buccutite ™ MTA 工作溶液加入抗體工作溶液中，并通過(guò)反復(fù)移液幾次或渦旋小瓶幾秒鐘將它們充分混合。

2. 將抗體-頰石™ MTA反應(yīng)混合物在室溫下保持30-60分鐘。

注意 如果需要，抗體-頰鈦礦™ MTA反應(yīng)混合物可以旋轉(zhuǎn)或搖動(dòng)更長(zhǎng)的時(shí)間。

進(jìn)行抗體-PE 偶聯(lián)

1. 加入 50 μL 含有抗體頰鞘石 MTA 溶液的頰鐵礦™™ FOL 活化 PE 工作溶液，通過(guò)重復(fù)移液幾次或渦旋小瓶幾秒鐘充分混合。

2. 孵育 1 至 2 小時(shí)。

3. 抗體-PE 偶聯(lián)物現(xiàn)已準(zhǔn)備就緒。

注意 為了立即使用，抗體-PE 偶聯(lián)物需要用您選擇的緩沖液稀釋。

注意 對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，抗體-PE 偶聯(lián)物溶液需要濃縮或冷凍干燥。

抗體-PE偶聯(lián)物的儲(chǔ)存

抗體偶聯(lián)物應(yīng)在載體蛋白（例如 0.1% 牛血清白蛋白）和 0.02-0.05% 疊***存在下儲(chǔ)存。Ab-PE偶聯(lián)物溶液可在4 °C下保存兩個(gè)月，無(wú)明顯變化，避光保存。

AAT Buccuite™快速PE抗體標(biāo)記試劑盒

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