近紅外
快速檢測藥物原料與中間體
近紅外應(yīng)用
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簡介
維生素 C 也被稱為抗壞血酸,是一種對人體至關(guān)重要的營養(yǎng)物質(zhì),不僅支持免疫系統(tǒng)的正常運(yùn)作,還幫助傷口愈合并促進(jìn)鐵的吸收。雖然許多水果和蔬菜,如柑橘類果實(shí)、草莓和西蘭花,都是維生素 C 的天然來源,但目前已經(jīng)開發(fā)出了將這種重要維生素在實(shí)驗(yàn)室中大規(guī)模生產(chǎn)的方法。本文將介紹兩種主要的維生素 C 工業(yè)制備方法——傳統(tǒng)的雷施勒法和改良的雙階段發(fā)酵法。
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雷施勒法:經(jīng)典方法的現(xiàn)代應(yīng)用
1930 年代,瑞士化學(xué)家 Tadeus Reichstein 開發(fā)了一種結(jié)合有機(jī)化學(xué)合成和微生物工程的方法來生產(chǎn)維生素 C。這個過程始于一種稱為山梨醇的糖醇,通過以下步驟轉(zhuǎn)化為維生素 C:首先在微生物的幫助下,山梨醇被轉(zhuǎn)化為山梨酸,然后山梨酸經(jīng)過一系列化學(xué)反應(yīng),最終轉(zhuǎn)化為2-酮-L-古龍酸(2-KLG),最后通過催化加氫,2-KLG 被還原成為抗壞血酸。這種方法不僅高效,而且能夠以相對低成本在全球范圍內(nèi)生產(chǎn)和供應(yīng)維生素 C,滿足各種商業(yè)和健康需求。
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雙階段發(fā)酵法:生物技術(shù)的力量
隨著科技進(jìn)步,雙階段發(fā)酵法應(yīng)運(yùn)而生,這是一種更環(huán)保且依賴生物過程的生產(chǎn)方法。這種技術(shù)利用兩種不同的微生物,將山梨醇轉(zhuǎn)化為維生素 C:山梨醇通過特定的細(xì)菌轉(zhuǎn)化為山梨酸,再利用另一種微生物通過發(fā)酵過程將山梨酸轉(zhuǎn)化為 2-KLG,最后 2-KLG 經(jīng)由化學(xué)或生物催化劑還原成維生素 C。這種方法強(qiáng)調(diào)了生物轉(zhuǎn)化的效率和環(huán)保性,減少了對傳統(tǒng)化學(xué)試劑的依賴,同時保持了高產(chǎn)率和產(chǎn)品質(zhì)量。
無論哪種制備方式,山梨醇和古龍酸都是重要的原料及中間產(chǎn)物,因此對其含量的準(zhǔn)確測定關(guān)系到最終產(chǎn)品的收率和質(zhì)量。原料山梨醇因體系簡單,僅需測定其水分就能推斷出山梨醇的含量,而中間體古龍酸就需要對水分和有效成分含量同步檢測。常規(guī)測定中間產(chǎn)物中古龍酸含量的方法有高效液相色譜、紫外可見分光、比色法以及酶聯(lián)免疫吸附測定等方法,但以上常規(guī)方法均需要對樣品進(jìn)行處理且需消耗一定試劑或耗材,同時伴隨長短不一的等待時間。近紅外光譜法能夠?qū)ν环N樣品的多個指標(biāo)同時進(jìn)行快速測定,既不需要復(fù)雜的前處理步驟,又不用漫長的等待流程。下面就介紹使用步琦近紅外光譜儀測定山梨醇和古龍酸的案例。
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實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
分別準(zhǔn)備山梨醇樣品 60 個和古龍酸樣品 59 個,已知山梨醇樣品水分和古龍酸樣品中水分和古龍酸含量,并用 BUCHI ProxiMate 測量上述樣品的近紅外光譜,隨后使用軟件 AutoCal 自動建模,所得模型如下:
▲ 圖1 山梨醇水分模型
▲ 圖2 古龍酸水分模型
▲ 圖3 古龍酸含量模型
上述模型評價指標(biāo)如下表:
山梨醇 | 古龍酸 | ||
屬性 | 水分 | 水分 | 古龍酸 |
范圍 | 25.6-27.7 | 1.66-6.36 | 85.65-94.17 |
SEC | 0.360 | 0.090 | 0.441 |
SECV | 0.448 | 0.117 | 0.587 |
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結(jié)論
▲ BUCHI ProxiMate 近紅外光譜儀
上述案例中使用的是BUCHI 的 ProxiMate 近紅外光譜儀,具有 IP69 的高防護(hù)等級及 FDA 認(rèn)證的外殼設(shè)計,能夠勝任各種復(fù)雜條件下的測量工作,固定陣列光柵也無懼振動環(huán)境的干擾,上下兩種照射方式及各式檢測附件能夠滿足多種樣品狀態(tài)的測量需求。
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