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【瑞士步琦】巴爺爺?shù)牟┛汀绾螌LC條件成功轉(zhuǎn)化到Flash色譜上

閱讀:295      發(fā)布時(shí)間:2024-6-18
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如何將 TLC 條件

成功轉(zhuǎn)化到 Flash 色譜上

色譜應(yīng)用

"

在進(jìn)行全面的 Flash 色譜之前,化學(xué)家通常會(huì)進(jìn)行薄層色譜(TLC)篩選。除了節(jié)省時(shí)間、溶劑和樣品外,用戶還可以使用他們的 TLC 數(shù)據(jù)為接下來(lái)的 Flash 色譜運(yùn)行找到更合適的參數(shù)。這篇文章強(qiáng)調(diào)了 TLC 結(jié)果如何轉(zhuǎn)化為優(yōu)化分離的理論,并展示了軟件如何將 TLC 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為更好的純化條件。


假如平時(shí)愛(ài)好騎平衡車(chē)的你突然某一天想去嘗試自己從未涉獵的自行車(chē)時(shí),并且很輕而易舉的就掌握了騎自行車(chē)的技巧,請(qǐng)你不要驚訝。這是因?yàn)槟阍O(shè)法將平衡技能從簡(jiǎn)單的無(wú)踏板自行車(chē)轉(zhuǎn)移到復(fù)雜的自行車(chē)上。


有趣的是,我們實(shí)驗(yàn)室里的科學(xué)家也有類似的功能。我們通常從更簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)和方法開(kāi)始,這些實(shí)驗(yàn)和方法需要更少的資源,然后再轉(zhuǎn)移我們的知識(shí)并嘗試更復(fù)雜的技術(shù)。以薄層色譜(TLC)和 Flash 色譜為例。由于簡(jiǎn)單、快速和樣品使用量少,許多 Flash 用戶更喜歡在純化前對(duì)樣品進(jìn)行 TLC 篩選。就像從平衡車(chē)到腳踏自行車(chē)一樣,人們可以使用從 TLC 實(shí)驗(yàn)中獲得的信息進(jìn)行更具挑戰(zhàn)性的Flash色譜分析。


如何在自動(dòng)化 Flash 色譜儀將 TLC 上的結(jié)果轉(zhuǎn)化成為有用的方法?

首先我們需要理解從 TLC 色譜上獲得的數(shù)據(jù)與待分離 Flash 色譜柱體積(CV)之間的關(guān)系。一個(gè)典型的 TLC 色譜分析如下:

 TLC 色譜示例,其中(a)表示溶劑前沿移動(dòng)的距離,(b)表示分析物移動(dòng)的距離


跑完 TLC 薄層色譜之后,需要計(jì)算每個(gè)分析物的保留因子(Rf),這個(gè)可以用一個(gè)簡(jiǎn)單的公式表示:


保留因子(Rf)=分析物到原點(diǎn)的距離(b)/溶劑前沿到原點(diǎn)的距離(a)


其中:

Rf =1 表示在 TLC 上沒(méi)有保留(隨著溶劑前移),

R=0 表示對(duì)溶劑沒(méi)有親和力(停留在起跑線上)。


使用薄層色譜開(kāi)發(fā)的方法可轉(zhuǎn)移到 Flash 色譜,因?yàn)楸A粝禂?shù)和柱體積之間的關(guān)系如下:



在實(shí)際應(yīng)用中,保留系數(shù)與柱體積的反比關(guān)系如下:


最佳 Rf 值范圍為 0.15 ~ 0.35,CV 值范圍為 2.8 ~ 6.7。


較小的 Rf 值導(dǎo)致很長(zhǎng)的運(yùn)行時(shí)間和高溶劑消耗,而較大的 Rf 值導(dǎo)致較短的運(yùn)行時(shí)間,并有未全部分離的風(fēng)險(xiǎn),如下圖所示。


 不同 Rf 和 CV 值下的 TLC 色譜和 Flash 色譜儀示例。(a)較小的 CV 值導(dǎo)致較短的運(yùn)行時(shí)間,這可能導(dǎo)致分離度不夠。(b) CV 范圍在 2.8 和 6.7 之間的結(jié)果是分辨率和運(yùn)行時(shí)間以及溶劑消耗之間的最佳平衡。(c)較大的 CV 值導(dǎo)致運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng),溶劑消耗高。


這些理論考慮可以很容易地應(yīng)用于特定的方法開(kāi)發(fā)軟件,例如 Navigator。該程序可以將 TLC 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為優(yōu)化的 Flash 方法,以獲得最佳的分離和純化。


用戶只需要幾個(gè)簡(jiǎn)單的步驟將他們的 TLC 結(jié)果轉(zhuǎn)移到軟件中,并為他們的 Flash 色譜過(guò)程確定最合適的參數(shù)。


首先,將 TLC 保留因子數(shù)據(jù)和色譜柱信息輸入軟件中,輸入使用的溶劑和 Rf 值,然后選擇色譜柱類型和相應(yīng)的流速。



其次,單擊“計(jì)算"按鈕并接受,系統(tǒng)自動(dòng)將分離參數(shù)呈現(xiàn)在待操作界面。



最后,根據(jù)轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并得到想要結(jié)果。



需要注意的是,在 TLC 板上使用不同的硅膠與在所選色譜柱上使用不同的硅膠可能會(huì)由于硅膠的選擇性不同而產(chǎn)生不同的結(jié)果。


理想情況下,TLC 板和色譜柱應(yīng)選擇相同類型的 Silica。


考慮到這些注意事項(xiàng)和軟件應(yīng)用,輕松傳輸 TLC 數(shù)據(jù)將幫助您獲得目標(biāo)化合物的最佳分離效果。




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