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德國Cegrogen  (A0500-3011) 胎牛血清 血清開始進行試用時，如果是重新復蘇細胞，建議用原培養(yǎng)體系進行細胞復蘇，待細胞狀態(tài)進入zuiyou狀態(tài)后再進行測試。測試時不建議直接100%直接換成新血清體系進行培養(yǎng)，而應該按照比例進行梯度替換(例如，shou次換液按照新舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后wanquan替換。對于一些對培養(yǎng)體系比較敏感的細胞，可以進一步優(yōu)化替換比例。)通過這種方法可以避免細胞因環(huán)境改變而出現(xiàn)應激或者異常造成不必要的損失。

血清在4度冰箱能放多久？對細胞有何影響呢？

根據(jù)文獻顯示血清和血漿在4℃條件儲存2小時，血清中的成分就會發(fā)生變化，所以建議用戶在使用血清要分裝成自己常用的規(guī)格，建議現(xiàn)配現(xiàn)用。如果不能實現(xiàn)現(xiàn)配現(xiàn)用的話，配好的培養(yǎng)基在4℃保存的時間不要超過1周，如果期間使用頻次較高或恢復室溫次數(shù)較多時，能夠保存的時間還會減少。

血清沉淀是什么?

血清非人工產(chǎn)品，沉淀出來系自然現(xiàn)象，沉淀主要是纖維蛋白原，其次是鹽析出。如磷酸鈣等，還有一些danguchun和脂肪酸以及其他蛋白析出物質(zhì)等

哪些因素血清沉淀會增加？

血清熱滅活、37℃培養(yǎng) 、反復凍融、溶解過程中沒有搖勻、伽馬射線照射、長期存放在 2-8°C、血清加入到RPMI 1640中時、pH升高時、在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基的蒸發(fā)等等因素都會導致沉淀的增加。

沉淀不會影響其對細胞的促生長作用？

技術(shù)人員對此問題有過深入研究證明，血清沉淀對細胞的生長沒有影響，但有一個例外：沉淀對巨噬細胞的培養(yǎng)會有一些影響。

沉淀這種現(xiàn)象發(fā)生在所有的血清中？

“G*品牌的胎牛血清沒有預老化,如果存放在2-8℃，血清中的各種蛋白或酯類有可能會凝聚析出,出現(xiàn)沉淀或混濁. 這種不會影響血清對對細胞的促生長作用.我們建議把血清存放在 –20℃，并避免反復凍融。S*品牌胎牛血清說明書中說: “在融化過程中混濁多絮狀沉淀，這種現(xiàn)象對多數(shù)血清來說是正常的，并不影響其使用質(zhì)量。但它影響血清的外觀，影響瓶與瓶之間的一致性。

有沉淀出現(xiàn)的血清并不是污染

檢測血清是否被污染的方法是將血清接種到血酯板上，培養(yǎng)后看是否有菌落形成。在1000x顯微鏡下，有經(jīng)驗的通過觀察細胞液狀態(tài)和常見細菌的外形即可鑒別，或者通過有無革蘭氏染色的細菌，也可以判斷血清是否被污染。

如何去除血清中的沉淀?

如想去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝到無菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養(yǎng)液中使用。不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因為可能阻塞濾膜。

血清溶解過程如何減少沉淀

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱12-24小時左右使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地輕輕搖晃均勻。切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中，無論室溫的水或者37℃的水，因為在水浴中血清迅速融化，很大的溫差(-20℃到37℃，溫差為57℃)極其容易造成血清產(chǎn)生沉淀。直接放65℃水浴中更是極其殘忍的做法，是對血清的褻玩，對科學規(guī)則的粗暴踐踏!

胎牛血清凍存注意事項

需要長期保存的血清有必要儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因而，血清在凍入低溫冰箱前，有必要預留一定體積空間，不然易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。大包裝的瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)，使溫度與成分均一，削減沉積的發(fā)作。切勿直接將血清從-20℃進入37℃融化，溫差大的情況下血清容易形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積和沉淀絮狀物。

血清是否需要熱滅活處理?

熱滅活是指56℃， 30分鐘加熱已chedi凍結(jié)的血清。加熱過程中須規(guī)矩搖晃均勻。目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非有必要，一般不建議做此熱處理，因為熱處理會形成血清沉積增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與反應有: 平滑肌細胞收縮、 肥大細胞和血小板釋放組胺、 增強吞噬作用、促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)作化學趨化和活化。相關研究的使用者可以考慮血清增加熱滅活處理。

血清使用濃度是多少?

原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔，部分細胞原代提取時會使用20%血清，大部分細胞正常培養(yǎng)時會使用10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細胞特性、實驗目的做測試和調(diào)校。

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