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一、3D基質(zhì)膠細(xì)胞系細(xì)胞培養(yǎng)套裝（不含酚紅）產(chǎn)品說(shuō)明

1、貨號(hào)：B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10

2、規(guī)格：2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

3、儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸，4℃保存，可保存兩年

二、3D基質(zhì)膠細(xì)胞系細(xì)胞培養(yǎng)套裝（不含酚紅）產(chǎn)品描述

3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝是一套完整設(shè)計(jì)的微環(huán)境的3D細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)應(yīng)用試劑。易于使用、可*控制生物分子修飾和凝膠硬度，可用于多種細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。聚合物可以快速凝膠化速度生成基質(zhì)膠。

（3D基質(zhì)膠材料為100%植物源材料，無(wú)動(dòng)物來(lái)源）

試劑的制備

1、A Gel：將A Gel置于 37 ℃水浴中至少 10 分鐘直至*解凍。

2、C 緩沖液 (1X)：使用前用冷的無(wú)血清培養(yǎng)基（例如無(wú)血清 DMEM）將10X C 緩沖液新鮮稀釋至 1X C 緩沖液。（做不稀C緩沖區(qū)與PBS）

3、d緩沖液（1X） ：新鮮稀10X d緩沖用冷1× PBS至1X d緩沖之前使用。

3D 細(xì)胞培養(yǎng)的制備

所有步驟均在層流中進(jìn)行，并按指示添加每個(gè)組分的體積比。

1. 將導(dǎo)熱片放在冰袋上。該片材可以快速均勻地冷卻培養(yǎng)板。

2. 重懸于1×10 5 ?10 7個(gè)細(xì)胞在1毫升混合物生長(zhǎng)介質(zhì)和甲凝膠在1：1成的比例。例如，在 500 m L 生長(zhǎng)培養(yǎng)基和 500 m L A Gel 中重懸 1×10 5 個(gè)細(xì)胞。

注意：在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件下培養(yǎng)細(xì)胞。貼壁細(xì)胞應(yīng)在~80% 匯合度下培養(yǎng)。

3. 將培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿放在導(dǎo)熱片/冰袋上。將步驟 2 中的20-40毫升細(xì)胞懸浮液混合物添加到每個(gè)孔中。所述混合物應(yīng)該形成凝膠后5分鐘。注：測(cè)試凝膠形成通過(guò)輕觸凝膠用移液管尖，和膠線應(yīng)收回從凝膠表面時(shí)提示無(wú)法拉出。

4. 一旦凝膠形成，加入 1mL 冷的 1X C 緩沖液以覆蓋圓頂 15分鐘。

5. 經(jīng)過(guò)15分鐘溫育后，小心地取代C緩沖區(qū)與培養(yǎng)平臺(tái)。第二天更換培養(yǎng)基。

6. 將 細(xì)胞在CO 2培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)7 至14 天，并用顯微鏡觀察球狀體的形成。培養(yǎng)基可以根據(jù)細(xì)胞正常生長(zhǎng)的需要每隔一天更換一次。