細(xì)胞株名稱:K562/Taxol耐藥細(xì)胞 人白血病紫杉醇耐藥株
種屬:人,女性
組織來(lái)源:骨髓;慢性骨髓性白血病(CML)
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
形態(tài)特征:淋巴母細(xì)胞
微生物及支原體檢測(cè):陰性
細(xì)胞背景:K-562由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。 細(xì)胞被歸入高度未分化的粒性白細(xì)胞類(lèi)。 Anderson等對(duì)其表面膜性質(zhì)的研究表明,K-562是一株人類(lèi)紅白血病細(xì)胞。 K-562細(xì)胞株在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體。 See Pross等將它用于NK細(xì)胞的體外詳細(xì)檢測(cè),包括NK細(xì)胞活性的數(shù)學(xué)量化。 K-562母細(xì)胞是多能性,造血惡性細(xì)胞,它能自發(fā)分化成可識(shí)別的紅血球祖細(xì)胞、粒性白細(xì)胞、單核細(xì)胞等。它是EBNA陰性的。
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
培養(yǎng)條件:*培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+50ng/ml Taxol血清我們推薦用:
GIBCOFBS-10099-141 或 HYCLONEFBS-SH30084.03。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
K562/Taxol耐藥細(xì)胞 人白血病紫杉醇耐藥株
凍存方法:凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO
儲(chǔ)存:液氮儲(chǔ)存
何謂FBS, FCS, CS, HS ?
FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思, 兩者都是指胎牛血清, FCS 乃錯(cuò)誤的使用字眼, 請(qǐng)不要再使用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。
培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 % 或10% CO2?或根本沒(méi)有影響?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng), 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2 濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時(shí), 則應(yīng)使用5 % CO2 培養(yǎng)細(xì)胞。
何時(shí)須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定, 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外, 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下, 培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
附著性細(xì)胞繼代時(shí)所使用之trypsin-EDTA 濃度?應(yīng)如何處理?
一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。第一次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中, 保存于–20 ℃,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低, 并可減少污染之機(jī)會(huì)。