細胞株名稱:A549/Taxol耐藥細胞
種屬:人組織來源:肺癌
生長特性:貼壁
生長形態(tài)特征:上皮細胞
微生物及支原體檢測:陰性
安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
A549/Taxol耐藥細胞培養(yǎng)條件:*培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+50ng/ml Taxol血清我們推薦用:
GIBCOFBS-10099-141 或 HYCLONEFBS-SH30084.03。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
觀察細胞最好在低倍鏡(4 或 5X 物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在 10X 或 20X 物鏡下。瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。
凍存方法:凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO
儲存:液氮儲存
何謂FBS, FCS, CS, HS ?
FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思, 兩者都是指胎牛血清, FCS 乃錯誤的使用字眼, 請不要再使用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。
培養(yǎng)細胞時應使用5 % 或10% CO2?或根本沒有影響?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng), 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2 濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時,細胞培養(yǎng)時應使用10 % CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時, 則應使用5 % CO2 培養(yǎng)細胞。
何時須更換培養(yǎng)基?
視細胞生長密度而定, 或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。
培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外, 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下, 培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。
附著性細胞繼代時所使用之trypsin-EDTA 濃度?應如何處理?
一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。第一次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中, 保存于–20 ℃,避免反復冷凍解凍造成trypsin 之活性降低, 并可減少污染之機會。