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做過(guò)病理檢查的患者總希望病理報(bào)告能立等可取,尤其懷疑存在腫瘤的患者更是焦慮。但病理常規(guī)報(bào)告的時(shí)間至少3-5天,“究竟是不是癌,給我個(gè)痛快吧!"
病理檢查是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程,其中病理切片質(zhì)量好壞,直接影響到對(duì)疾病的診斷和治療。切片制作過(guò)程中每一環(huán)節(jié)都很重要,包括良好的組織固定、包埋、染色和封片。
今天毛豆就來(lái)和大家一起討論一下組織包埋技術(shù)。
圖:組織包埋步驟操作流程圖
01 組織包埋
在制作切片或超薄切片時(shí),由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質(zhì)浸透組織內(nèi)部,整個(gè)組織一樣硬化,以利于切成薄片,這種物質(zhì)叫做包埋劑。
包埋就是將已經(jīng)經(jīng)過(guò)固定、脫水、透明、浸透支撐劑的組織塊,從最后的支撐劑中取出,置入充滿熔融支撐劑的包埋框內(nèi),用支撐劑將組織塊包裹→包埋成塊,使組織和支撐劑 (包埋劑)相熔成一體,并迅速冷卻。
包埋劑凝固后,使組織的硬度和韌度與支撐劑 (包埋劑)相當(dāng),從而使切片成為可能,實(shí)際上我們前面所進(jìn)行的所有步驟,都是為這最后的包埋打基礎(chǔ),所以說(shuō)包埋也是關(guān)鍵一步。
02 包埋劑的分類(lèi)
一般用光學(xué)顯微鏡觀察的切片,用石蠟、火棉膠、碳蠟、明膠等作包埋劑;電子顯微鏡則用環(huán)氧樹(shù)脂、聚苯乙xi樹(shù)脂、異ding烯樹(shù)脂及水溶性樹(shù)脂。硬組織包埋 (骨、牙齒)則采用塑料包埋,甲酯甲基丙烯。
實(shí)際上包埋劑就是浸透劑 (支撐劑),用什么樣的浸透支撐劑,包埋時(shí)也要用相同的包埋劑 (同樣的支撐劑),它們是同一種物質(zhì),只是用在不同的步驟上叫法不同而已,比如:要用石蠟作浸透支撐劑,同樣在包埋時(shí)也要用同樣的石蠟包埋。
這么多種類(lèi)的包埋劑,如何精準(zhǔn)使用呢?這個(gè)問(wèn)題回答起來(lái)比較繁復(fù),因?yàn)槊糠N包埋劑都有其特定的對(duì)象,不是拿來(lái)哪種都可以隨便使用的。
石蠟包埋:是我們常用的,它是我們病理制片經(jīng)典的包埋劑,是不可替代的,也是使用簡(jiǎn)便,容易掌握,經(jīng)濟(jì)的、安全的。
碳蠟包埋:適于脂肪及類(lèi)脂的制片 (因不經(jīng)有機(jī)溶媒的處理),制片時(shí)間短,故急用時(shí)3小時(shí)即可制成蠟塊,主要優(yōu)點(diǎn)是不經(jīng)脫水與透明處理,故組織塊收縮較?。蝗秉c(diǎn)是吸水性強(qiáng),致使攤片及保存蠟塊比較困難。
火棉膠包埋:適用于大塊組織 (直徑在3~10cm的軟組織、器官、脫鈣后的大塊骨組織→整個(gè)股骨頭和眼球等),可避免纖維組織和肌肉組織的過(guò)度硬化;還可減少纖維組織的收縮和扭轉(zhuǎn),有利于保持組織的原有構(gòu)造。缺點(diǎn)是操作過(guò)程較久,不適宜臨床外科病理和尸檢制片,但對(duì)研究神經(jīng)組織、骨組織和眼球等有一定幫助。
明膠包埋:適用于一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)標(biāo)本,這種包埋劑在病理制片中很少使用,故不做過(guò)多介紹。
樹(shù)脂包埋:主要用于電子顯微鏡的制片,種類(lèi)比較多,環(huán)氧樹(shù)脂、聚苯乙xi樹(shù)脂、異丁xi樹(shù)脂及水溶性樹(shù)脂,但用法大同小異.
塑料包埋:主要用于不脫鈣骨組織、牙齒等硬組織的制片。
03 產(chǎn)品推薦
HistoCore Arcadia H 包埋機(jī)熱臺(tái)操作簡(jiǎn)單且控制精確,從而提高了包埋作業(yè)的質(zhì)量、可靠性和速度。
HistoCore Arcadia H 熱臺(tái)
HistoCore Arcadia H 熱臺(tái)配有 LCD 觸摸屏,以提升控制性能并方便對(duì)儀器進(jìn)行監(jiān)測(cè);改良的放大鏡可方便小活檢樣本的包埋。
HistoCore Arcadia C 是具有超大工作表面的冷臺(tái),可容納多達(dá) 65 個(gè)包埋盒。冷卻效率非常重要,因此冷臺(tái)采用了環(huán)境自適應(yīng)控制模塊設(shè)計(jì),以確保操作溫度穩(wěn)定在 -6 ℃。
HistoCore Arcadia C 冷臺(tái)
HistoCore Arcadia C 冷臺(tái)可以用作獨(dú)立單元,以便在切片前重新冷卻組織塊,或者作為包埋系統(tǒng)的一部分,用于石蠟灌注后冷卻模具。
廣州東銳科技有限公司是Leica biosystems的授權(quán)代理商。如需進(jìn)一步了解包埋系統(tǒng)ARCADIA產(chǎn)品,可聯(lián)系東銳科技。
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