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所 在 地上海市
更新時間:2024-06-18 10:09:25瀏覽次數(shù):440次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)組織石蠟包埋和切片:
1、切取組織,浸泡在4%用pH7.4 BS配成的甲醛固定劑中,室溫24小時。
附:4%甲醛固定劑(5ml):4.5ml 1×PBS(pH7.4)+0.5ml甲醛
2、倒掉甲醛固定劑,加pH7.4 BS,每隔8小時更換一次,4℃保存,換液共3天。
3、打開烘箱,調溫至62℃,融石蠟。
4、酒精梯度脫水(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%×2),隔30分鐘更換一次。
5、50%酒精+50%二甲苯30分鐘(過渡步驟)。
6、100%二甲苯,時刻觀察組織塊至透明。
7、放入烘箱中已經(jīng)預融的50%石蠟+50%二甲苯中,30分鐘。
8、100%石蠟兩遍,每次2小時。(若石蠟浸潤不夠,仍有二甲苯,則包埋后的石蠟塊較脆,易分層、斷裂。)
9、100%石蠟紙盒內凝固(先用蠟打底,再放入組織塊,澆上蠟包埋,放入4℃冰箱或水中冷凝,標明組織塊放入方向),4℃存放備用。
10、修塊。
11、融化石蠟抹于塊底,貼在木塊上,壓實。
12、切片(5-10μm),將切片平展于平板上,光面朝上。
13、將光面朝下,將石蠟薄切片放于水面上(水溫40℃),使其伸展。(時間勿太長)。
14、將石蠟薄片貼在預先處理好的玻片上。
15、40℃烘烤過夜。
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