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腫瘤動(dòng)物模型

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更新時(shí)間:2024-01-12 10:43:20瀏覽次數(shù):550次

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腫瘤動(dòng)物模型:常用見(jiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是腫瘤動(dòng)物模型的構(gòu)建,一般包括小鼠移植瘤模型和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型則是引入致癌基因或敲除抑癌基因建立自發(fā)腫瘤或誘導(dǎo)生成腫瘤的轉(zhuǎn)基因模型小鼠,再在模型小鼠的基礎(chǔ)上進(jìn)行相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)。

腫瘤動(dòng)物模型第一類是皮下移植瘤


顧名思義,這種模型的建立是將腫瘤細(xì)胞或腫瘤組織直接種植在小鼠的皮下。種植的點(diǎn)也有講究,一般選擇血運(yùn)淋巴回流豐富的腹股溝和腋窩??筛鶕?jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇移植點(diǎn),統(tǒng)一移植點(diǎn)的位置,除了遵守實(shí)驗(yàn)統(tǒng)一的條件外,待腫瘤成熟后收集腫瘤時(shí)留下照片證據(jù)也顯得美觀。


裸鼠(Balb/c 鼠, 無(wú)毛發(fā), T 淋巴細(xì)胞缺陷)是比較常見(jiàn)和常用的實(shí)驗(yàn)用鼠,尤其是在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)然,這種腫瘤模型也有缺陷,即不能很準(zhǔn)確的模擬正常人體腫瘤發(fā)生發(fā)展的過(guò)程。


腫瘤動(dòng)物模型腫瘤細(xì)胞移植時(shí)的簡(jiǎn)要步驟


首先準(zhǔn)備好要移植的腫瘤細(xì)胞(細(xì)胞量根據(jù)不同腫瘤略有不同,我們所用的前列腺癌細(xì)胞系每個(gè)移植點(diǎn)一般選擇 1x106 左右;腫瘤細(xì)胞可與基質(zhì)膠 1:1 混勻后用 1 ml 注射器吸取,基質(zhì)膠能夠給腫瘤細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,有助于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng))。


戴無(wú)菌手套后,將小鼠用左手大拇指和食指捏住頸部皮膚,然后將鼠尾用左手無(wú)名指和小指固定于左手大魚(yú)際。將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)膠混合液的注射器,在腹股溝或腋窩的位置,45 度斜角進(jìn)針,注意不要突破腹膜,將針頭保持于皮下位置。


然后近水平位置將針頭幾乎wan全插入皮下,將混有基質(zhì)膠的腫瘤細(xì)胞注射入皮下(腫瘤細(xì)胞量約 1x106),快速退針,左手食指輕壓針孔約 1 min 后將小鼠放回飼養(yǎng)籠中,注意將小鼠側(cè)放于墊料上,放置其不適嘔吐時(shí)嘔吐物誤入呼吸道引起窒息。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。


如果是利用腫瘤組織(人體腫瘤標(biāo)本或小鼠移植瘤傳代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,則需要首先將腫瘤組織用無(wú)菌 PBS(或 1640 培養(yǎng)基)洗滌 3 次,然后在無(wú)菌平皿上切成或用無(wú)菌剪刀剪成<1 mm3 體積的小塊(種植前可裹基質(zhì)膠)備用。


將小鼠用水he氯醛麻醉后平臥于解剖板上,四肢用膠帶固定,將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次,然后用眼科剪剪開(kāi)約 0.5 cm 小口,小鑷子將皮下筋膜與皮膚分開(kāi),然后將腫瘤組織放入貼近腹股溝或腋窩的深部,每個(gè)位置放置 2~3 塊腫瘤組織,注意不同組間統(tǒng)一放置腫瘤組織塊數(shù)以保持一致。


然后縫合皮膚,消毒后將小鼠側(cè)臥位放置于飼養(yǎng)籠的墊料上。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。


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