熒光素酶( Luciferase )是生物體內(nèi)催化熒光素(luciferin )或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化發(fā)光的一類酶的總稱。雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶活性的一種報告系統(tǒng),通常采用第二個報告基因(如海腎熒光素酶報告基因)來減少實驗的變化因素。熒光素酶可以催化熒光素氧化成氧化熒光素,在熒光素氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光。然后可以通過熒光測定儀測定熒光素氧化過程中釋放的生物熒光。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā) 光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。是檢測轉(zhuǎn)錄因子與目的基因啟動子區(qū)DNA相互作用的一種檢測方法。
實驗流程:
1.構(gòu)建表達載體和熒光素酶報告基因表達載體。
2.細胞培養(yǎng)及質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染。
3.熒光素酶活性檢測。