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慢病毒表達載體,即通常所說的穿梭載體,包含了包裝、轉染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。而慢病毒包裝質??商峁┧械霓D錄并包裝RNA 到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細胞的感染。
慢病毒系統(tǒng)可以轉染多種細胞類型如原代細胞、干細胞、非分裂細胞等,實現可重復的穩(wěn)定表達。對于一些較難轉染的細胞,慢病毒系統(tǒng)采用病毒包裝外源基因方式進入細胞并穩(wěn)定表達,是一種理想的基因表達工具。慢病毒通過順式作用元件將病毒運送入細胞核,將所要表達的基因序列重組整合到細胞的基因組中,從而實現目的序列持續(xù)穩(wěn)定的高表達。
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