流式細(xì)胞術(shù)是一種功能強(qiáng)大的方法，被廣泛用于細(xì)胞的高通量定量和定性分析。然而，由于細(xì)胞外囊泡（EVs）（主要是外泌體）體積?。ㄍ饷隗w：~80-200 nm，微囊泡：~200-1,000 nm）、多分散性和低折射率等原因，流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞外囊泡（EVs）（主要是外泌體）的直接應(yīng)用受到了一些挑戰(zhàn)的阻礙。目前最好、使用的外泌體無(wú)珠流式細(xì)胞術(shù)方案是使用超速離心法（UC）結(jié)合蔗糖梯度漂浮法分離外泌體，用親油性染料 PKH67 和抗體標(biāo)記外泌體，并使用優(yōu)化版商用細(xì)胞儀進(jìn)行分析。然而，這種方法需要經(jīng)驗(yàn)豐富的流式細(xì)胞儀操作員能夠手動(dòng)調(diào)整硬件和校準(zhǔn)細(xì)胞儀。在這里，我們提供了一種新穎、快速的方法，通過(guò)使用專為小顆粒設(shè)計(jì)的流式細(xì)胞儀，對(duì)從細(xì)胞培養(yǎng)基以及更復(fù)雜的人體樣本（卵巢癌患者腹水）中分離出來(lái)的外泌體和微囊泡進(jìn)行定量和表征，這種方法適用于多用戶實(shí)驗(yàn)室，在數(shù)據(jù)采集前無(wú)需調(diào)整即可使用。